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FT3异常升高之谜?破解真相的关键因素竟在于“它”

归去来兮 2022-7-21 04:16 PM 683人围观 技术


作者:冯育英
审核:纪爱芳
单位:长治医学院附属和平医院检验科



为了进一步加强检验科与临床科室的交流,我院检验科实施了检验医师与临床科室点对点的交流,并制定了相应的管理要求与措施,这一举措使得检验与临床的沟通更加畅通和快捷。




案例经过


5月31日下午,我正在审核结果,突然接到在内分泌门诊坐诊的邢主任的电话:有一例患者FT3测定的结果与临床表现不符,你再复查一下吧。

放下电话,我查看了该患者的甲状腺功能测定报告,FT3测定值为12.94pmol/L,明显升高。我立刻找出了该患者的标本,查看了标本外观、仪器状态和室内质控,均无异常。于是我又将标本进行了复查,结果显示为11.18pmol/L,还是升高,与上次相差不大。这是什么原因呢?

查看病史:患者李xx,性别女,年龄14岁,于2021年12月8日入住我院分泌科,诊断为“甲状腺功能亢进症(Graves)病、甲亢性肝损害”。


  • 入院前体格检查

除手颤征(+)、甲状腺Ⅲ度肿大外,其余基本正常。

  • 辅助检查(2021-12-7)

甲状腺功能:FT3 21.91pmol/L、FT4 74.09pmol/L、TT3 6.88nmol/L、TT4 311.33nmoI/L、hTsH 0.33uIU/ml、TPOAb 86.71IU/ml、TRAb >30IU/L、TG 8.76ng/ml。

降钙素(TG):3.73pg/ml、肝功能:ALT 59U/L、AST 36U/L、胆红素未见异常。

血常规:白细胞(WBC)7.2x109/L、红细胞(RBC)5.07x1012/L、血小板(PLT)316x109/L。

甲状腺彩超:示双侧甲状腺弥漫性肿大,双侧颈部淋巴结存在。

患者于2021年12月15日进行131I核医学治疗。


  • 出院后辅助检查(2021-12-22)

甲状腺功能:FT3 8.94pmol/L、FT4 11.87pmol/L、TT3 2.15nmol/L、TT4 25.68nmoI/L、hTsH 0.01uIU/ml、TPOAb >1000IU/ml。

肝功能:ALT 35U/L、AST 22U/L。

血常规:白细胞(WBC)3.6x109/L、红细胞(RBC)4.36x1012/L、血小板(PLT)251 x109/L。

可以看出,患者的FT3和FT4在经过治疗后已基本正常,说明甲状腺功能已基本恢复。而此次复查,患者也没有甲亢病人的异常表现。经了解,患者家住山区,家中饲养牛羊,生活习惯无特殊改变。 



案例分析


患者之前所做的甲状腺功能检测是在核医学科,FT3所用方法为放免法;而此次所做的急诊甲功是在检验科,FT3所用方法为酶免疫化学发光法,仪器为A品牌。

为了查找原因,我们征得患者的同意后又重新抽了血,分别用A品牌化学发光法、B品牌电化学发光法及放免法同时进行检测,见表1。

表1  游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)测定结果


通过上述结果推测A品牌的检测系统可能存在干扰。经查找资料发现,在免疫学检测中,有很多物质会造成干扰,这些物质主要是与被测物化学结构存在差异但活性类似的物质,如异嗜性抗体(heterophileantibody,HAb)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、人抗动物抗体(human anti-animalantibody,HAAb)、自身抗体与其他蛋白等[1]

  • 干扰排除方法

1、排除类风湿因子、血清免疫球蛋白等大分子蛋白质对FT3检测结果的干扰

以1例健康者血清标本作为对照标本,与患者血清标本同时采用A品牌分析仪进行测定,若检测值均在正常参考范围内,提示可排除这些常见大分子对FT3检测结果的影响,见表2。

表2  患者与健康对照的类风湿因子
及免疫球蛋白测定结果


2、排除异嗜性抗体、人抗动物抗体等物质的干扰

经察看试剂成份,包被链霉亲和素的顺磁性微粒、MES缓冲液、生物素化T3相似物、TRIS缓冲液及克隆抗体-碱性磷酸酶结合物,其中TRIS缓冲液中含山羊或牛源性蛋白,碱性磷酸酶也是牛源性蛋白质。因试剂中含有来自动物的成份,抗干扰试验(试剂为A品牌公司提供)也多围绕这些成份展开,见表3。 

表3  患者抗干扰试验前后FT3测定结果

*备注:AP pool是针对碱性磷酸酶(ALP)的相关抗干扰物质;偏差(%)=(处理后的检测结果-处理前检测结果)/处理前检测结果x100%;回收率(%)=处理后的检测结果/处理前检测结果×100%。

可以看出标本中的某些物质对碱性磷酸酶(ALP)形成的干扰最大,偏差百分数为31%;回收率为68.5%,回收率越趋近于100%,说明内源性抗体干扰越小,回收率越小,结果提示可能存在内源性抗体干扰。

所以认为患者血液中可能含有能结合碱性磷酸酶的自身抗体,而又因为碱性磷酸酶为牛源性的,所以干扰物应该是抗牛碱性磷酸酶抗体(人体自身的碱性磷酸酶不会对结果产生影响),即人抗动物抗体(HAAb)。

那么HAAb干扰的环节是什么?我们看它的检测原理。

Access Free T3检测原理:这是一种竞争结合免疫法测定,将样本添加到含ALP结合物抗T3单克隆抗体的反应管中。在温育过程中,样本中的游离T3与抗T3抗体发生反应。然后将包被着链霉亲和素和生物素化T3相似物的微粒添加到混合物中。抗T3抗体上的未结合位点通过T3相似物与微粒相结合。在反应管内温育完成后,结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸住,而未结合的物质被冲洗除去。然后,将化学发光底物添加到反应管内,然后由照度计对反应中所产生的光进行测量。所产生光的量与样本内游离T3的浓度成反比。


样本内分析物的量由所储存的多点校准曲线来确定。由此分析ALP相关干扰模式:


从以上图示可以看出,由于ALP的相关位点结合了干扰物,最后使底物的发光量减少,FT3的浓度与发光量成反比,所以FT3的浓度假性增高。 

因初步判断为HAAb的干扰,又经进一步询问得知,患者家中确实长期饲养牛羊,平日与这些动物接触较多,所以笔者认为患者FT3的检测结果是受到动物来源HAAb的干扰所致。



总结与思考


结合患者的病史及检验结果,患者为自身免疫性疾病病人。其血清中产生了抗动物抗体(HAAb),结合在试剂ALP的相关位点产生了空间位阻效应,阻碍了底物发光,造成FT3假性升高。

HAAb可对多种组分的测定结果造成影响,因此检验工作者应深入了解并掌握其特征,寻找消除干扰的对策,以便为临床诊断提供准确、有效的实验室依据[2]

在当前的试剂产品设计框架下,无法完全避免这些干扰。如果确认存在干扰,实验室应该建议临床医生在该病人的病历中注明,以提示实验室该病人样本对于何种检测系统的试剂存在干扰,在未来检测中,该病人应该选择有效的检测系统进行该项目的检测。

最后,我认为检验科与临床科室应加强沟通与联系,树立“以人为本”的原则,发现患者的临床表现和实验室数据不一致时,检验医师应积极排除和确认常见的干扰因素,同时临床医师应与检验室加强沟通,避免假阳(阴)性结果导致不良后果。

【参考文献】
[1]PEDROSA W,TEIXEIRA L. Interference of heterophilic antibodies with free prostate-specific antigen in the Beckman-Coulter(Unicel DxI) assay, inverting the free/total prostate-specific antigen ratio[J]. Ann Clin Biochem,2009,46(Pt 4):344-345.
[2]黎锦,李一荣. 内源性抗体对临床免疫检测的干扰及对策[J]. 中华检验医学杂志,2016,39(11):811-813.

来源: 检验医学网
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