全国新冠室间质评100家实验室不合格！警惕导致假阴性的7大原因 ...

作者：郭小兵

单位：郑州大学第一附属医院  

国家卫生健康委临床检验中心于2021年07月29日，应急开展2021年全国新型冠状病毒德尔塔变异株核酸检测室间质量评价，目的在于了解全国各新型冠状病毒核酸检测实验室对德尔塔变异株的检测质量，保证新冠病毒核酸检测在疫情防控中的有效性。

让我们担忧的是，在参加的8127家实验室中，有 100 家实验室不合格，合格率仅为98.77%。从占比前五的检测试剂来看，均有一定的不符合率。

那么，造成检测假阴性的原因有哪些呢？小编认真分析了整个操作流程，对于假阴性结果进行如下剖析：

临检中心室间质评多为干粉样本，在复溶过程中，若混匀程度不够或溶解不充分，病毒在样本中会呈不均一分布，这样会产生取样误差引起病毒漏检。

大批量反应试剂配制过程中，若反应体系添加不当，或者各种成分添加后未充分混匀即进行分装，会造成批内差异，引起检测误差。

在日常进行新冠核酸检测过程中，我们观察到，试剂配制后，若长时间存放（超过3天以上），会导致检测Ct值增加。对于弱阳性标本而言，会造成假阴性结果出现。

大规模核酸筛检时，所用仪器设备往往会超负荷运转，若未及时保养维护，更换耗材，在进行核酸提取时，提取的效率会显著降低。此外，若核酸提取试剂与提取仪非完全匹配，也会造成提取效率降低，这些也是造成假阴性的常见原因。

加样枪的校准是必要的，也是分子检测实验室常规的工作，其意义即为保证核酸模板加样的精准性。若此项工作未很好完成造成加样误差，也会产生假阴性结果。

在大规模筛检时期，PCR扩增仪24小时运转是屡见不鲜的事情。若未对设备及时保养维护，部分反应孔会出现温度异常或升降温异常。若在这样的孔内进行扩增反应，出现异常结果是难免的。

在加样过程中，若八联管管帽加盖不严，在扩增过程中，反应体系中的水分会挥发，导致各种成分浓度异常，也会造成扩增结果假阴性。