PCR-RFLP检测人NQO1基因多态性

NQO1是NAD依赖的醌氧化还原酶的简称，NQO1基因定位在第16号染色体16q12~q22位置，基因全长20kb,含6个外显子，中间被5个内含子所隔开，其中第6个外显子最大，达1833bp，上面有4个强多聚A信号序列(AATAAA)和一个人类Alu重复序列。NQO1基因编码含274个氨基酸残基的蛋白。

1992年Traver等在MMC-抗人类结肠肿瘤细胞株中发现NQO1基因的cDNA序列609位点有C到T的错义突变，这一多态位点可通过限制性核酸内切酶HinfⅠ来识别。

HinfI是别的位点是G ANTC，其中T为609位突变位点，而野生型C则不能被酶切，导致RFLP酶切片段大小和数量差异。

此突变使NQO1编码的第187位氨基酸由脯氨酸变成了丝氨酸，虽不影响其mRNA的合成，但可能改变了酶的二级结构，使酶活性发生改变。根据Ross等的研究，具有两个野生型等位基因即野生型（C/C）的个体NQO1的酶活性正常，而具有杂合型基因分子生物学功能（C/T）的个体其酶活性降低，纯合突变型（T/T）个体酶活性完全丧失。

NQO1酶是两个电子的还原酶，能够还原内源性和外源性的醌类，使其生成毒性低且稳定的氢醌，再转化为水溶性的化合物排出体外。

从单个代谢酶基因多态性与苯中毒的遗传易感性的关系来看，NQO1基因第六外显子609位点的多态性导致NQO1酶活性发生改变，故携带NQO1C609T纯合突变基因型 (T/T)个体接苯时发生苯中毒的危险性增高 ,考虑此基因可作为易感性生物标志物 ,用于苯作业工人上岗前的筛检。