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真菌1,3-β-D-葡聚糖检测(G试验)的临床应用!

归去来兮 2020-7-21 69人围观 技术

侵袭性真菌病(invasive fungal disease,IFD)系指真菌侵入人体,在组织、器官或血液中生长、繁殖,并导致炎症反应及组织损伤的感染性疾病。随着器官移植、肿瘤化疗、免疫抑制剂使用、侵袭性操作等不断增多,侵袭性真菌病 invasive fungal diseasesIFD)的发病率越来越高,尤其是免疫功能低下者。早期诊断及恰当的抗真菌治疗是降低病死率的关键,但IFD的临床表现相对缺乏特异性,仅根据临床症状难以早期诊断,故误诊率高。因此,所有国内外IFD指南中均明确指出,临床诊断和确诊的依据必须包括病原微生物的实验室检查,后者是诊断标准极为重要的组成部分。

    

真菌感染的传统诊断方法主要是真菌涂片镜检和培养,由于培养在诊断真菌感染方面存在一定的局限性,近些年,一些非培养技术逐渐发展起来,其可以在一定程度上弥补真菌培养的缺陷,G试验是目前比较成熟的应用比较多的非培养技术之一。

 

01

 

关于G试验

 

检测原理 

通过检测真菌细胞壁成分1, 3-β-D葡聚糖1,3-β-D-glucan,BG)来判断有无真菌感染。人体吞噬细胞吞噬真菌后,可持续释放BG,使血液中含量增高,浅部真菌感染和真菌定植时BG很少释放入血,血清中BG含量通常不会升高。

影响因素

因素

1)污染;(2)应用纤维素膜进行血液和腹膜透析;(3)手术中使用的纱布或其他医疗物品中含有葡聚糖;(4)免疫静脉制剂(白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白等);(5)某些细菌败血症患者(链球菌败血症、铜绿假单胞菌败血症、 金黄色葡萄球菌败血症);(6)抗肿瘤类药物(香菇多糖、裂殖菌多糖、黄氏多糖注射液、灵芝多糖、双黄连注射液、参麦注射液);(7)磺胺类、阿莫西林/克拉维酸、头孢类药物、多粘菌素、厄他培南;(8)蘑菇类食物;(9)新生儿足跟采样;

假阴性因素

1)粒缺患者;(2)病人体内抗体水平高,1-3-β-D-葡聚糖与体内相应抗体形成免疫复合物;(3)使用棘白菌素类药物;(41-3-β-D-葡聚糖释放不持续,很快被机体免疫系统清除;(5)特殊真菌,如接合菌、隐球菌;(6)近平滑念珠菌,马尔尼菲蓝状菌有时会假阴性;7)曲霉中1-3-β-D 葡聚糖的含量与宿主因素及空腔中的真菌数量均有关系,当真菌作为腐生菌保留在空腔中形 成曲霉球并被厚厚的纤维组织包围,真菌细胞碎片可能不能进入血流中而无法被检测到;(8)标本保存不合理,1-3-β-D 葡聚糖发生降解;(9)某些抗真菌药物(如卡泊芬净能非竞争抑制1-3-β-D-葡聚糖合成)。

 

 应用范围

G试验适用于除隐球菌和接合菌外的所有深部真菌感染的早期诊断,尤其是念珠菌和曲霉,但不能确定菌种,是诊断IFD如侵袭性念珠菌病、侵袭性曲霉病、肺孢子菌肺炎等早期敏感生物标志物之一。对于念珠菌血症,G试验检测是首选方法。

 

 结果解释

G试验的阴性预测价值更高,据研究资料显示,G试验对侵袭性真菌感染检测阴性预测值为97.73%。建议作为入院筛查的有效手段,快速排除 IFI 的可能。由于G试验易受多种因素影响出现假阳性结果,因此,阳性结果要结合临床、影像学或其他微生物学指标进行综合分析。

 

 

02

 

G试验与真菌培养比较

 

各自优劣势

真菌涂片

真菌培养

优势:可以确定感染真菌的种类

劣势:①阳性率较低,且培养耗时长,有可能延误最佳治疗时机

②来源非无菌部位的标本如痰液、尿液等无法区分定值和感染

G

优势:①可以鉴别真菌的侵袭与定植;

②早期诊断侵袭性真菌感染,G试验一般先于临床症状平均4天,早于发热5天,早于呼吸道症状10.7天,早于HRCT检查平均9.3天出现阳性;

③连续监测还可以评估治疗效果

劣势:不能确定菌种


 结果解释

G试验(+),培养(-

窗口期不同,有文献报道,血浆1, 3-β-D葡聚糖在IFD症状出现5天前就可检出阳性。

方法学不同

G试验(-),培养(+

吞噬细胞功能缺陷

感染的真菌数量少

某些药物的影响

 

标本要求:

空腹采集血液4ml,采血管为桔黄色盖,为真菌1,3-β-D-葡聚糖检测专用管(无热源)。请到检验科23号窗口领取。


参考范围

60pg/ml以下,无深部真菌感染(隐球菌、接合菌除外)                

60-100pg/ml之间,为观察期,应连续检测;               

100pg/ml以上,怀疑为深部真菌感染,建议临床结合症状治疗。

临床意义:

阳性意义: 1) 可以检测多种致病真菌感染,如念珠菌、曲霉、肺孢子菌、镰刀 菌、地霉、组织胞浆菌、毛孢子菌等,但是不能区分真菌种类; 2) 阳性结果指示有 IFI 的可能,可以区分定植和感染; 3) 指导临床科学合理的使用抗真菌药物; 4) 动态监测可以有效评价抗真菌药物的疗效。


阴性意义:1) 据研究资料显示,G试验对侵袭性真菌感染检测阴性预测值为97.73%。建议作为入院筛查的有效手段,快速排除 IFI 的可能;2) 指导临床科学合理的用药。


影响因素:

假阳性因素:(1)污染;(2)应用纤维素膜进行血液和腹膜透析;(3)手术中使 用的纱布或其他医疗物品中含有葡聚糖;(4)静脉制剂(白蛋白、凝血因子、免 疫球蛋白等);(5)某些细菌败血症患者(链球菌败血症、铜绿假单胞菌败血症、 金黄色葡萄球菌败血症);(6)抗肿瘤类药物(香菇多糖、裂殖菌多糖);(7)磺 胺类、阿莫西林/克拉维酸、头孢类药物、多粘菌素、厄他培南;(8)蘑菇类食 物;(9)新生儿足跟采样; 


假阴性因素:(1)粒缺患者;(2)病人体内抗体水平高,(1-3)-β-D-葡聚糖与体 内相应抗体形成免疫复合物;(3)使用棘白菌素类药物;(4(1-3)-β-D-葡聚糖 释放不持续,很快被机体免疫系统清除;(5)特殊真菌,如接合菌、隐球菌;(6 近平滑念珠菌,马尔尼菲蓝状菌有时会假阴;(7)曲霉中(1-3)-β-D 葡聚糖的含 量与宿主因素及空腔中的真菌数量均有关系,当真菌作为腐生菌保留在空腔中形 成曲霉球并被厚厚的纤维组织包围,真菌细胞碎片可能不能进入血流中而无法被 检测到;(8)标本保存不合理,1-3)-β-D 葡聚糖发生降解。

 

真菌1,3-β-D-葡聚糖检测专用管(无热源)

来自: 检验星空
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