两张检验结果不一样，到底哪张准确？

【案例经过】

前段时间，天气阴冷，呼吸内科一患者流感病毒检测结果不一致，本院检验科检测该患者呼吸道病毒七项(流感病毒A型、流感病毒B型、副流感病毒1,2,3，腺病毒、呼吸道合胞病毒)全部为阴性，省疾控中心检测结果为甲流H1N1弱阳性。临床医生对我科检测结果提出了严重质疑。

患者郑某，男性，66岁，上个月10日10：30入院，患者5天前受凉感冒后发热，体温39.3，于当地诊所治疗后退热，但出现间断性胸闷气促，伴咳嗽，少量咳痰，有加重感，为求进一步治疗，我院呼吸内科收治入院。入院当日下午13：30分，患者出现I型呼吸哀竭,病房转lCU治疗。12日上午，本院检验科检测呼吸道病毒七项全部为阴性，当日下午，临床医生取样送省CDC检测流感病毒，13日下午，省级CDC回报:甲流H1N1弱阳性。 

为什么两家医院检测结果不一致呢？到底哪张检测结果是准确的？

对于流感病毒的检测，我们都知道常用检测方法有以下三种：

一、 病毒分离培养

这是流感病毒检测的传统方法之一，包括鸡胚接种和细胞培养。目前分离流感病毒主要应用的是犬肾细胞（MDCK），分离培养的检测时间一般需要4-5天，本院为市级医院，没有条件做此项检测。 

二、分子生物学方法 

病毒核酸检测常用的方法有核酸杂交、逆转录聚合酶链反应、多重逆转录聚合酶链反应、酶联免疫PCR、实时定量PCR、依赖性核酸序列扩增、荧光PCR等方法。核酸检测的普遍优点在于检测速度快、特异性强。一般在省级医院与CDC应用,本院也没有开展此项目。

三、免疫学检测方法 

免疫学检测有两类：血清学检测与抗原检测。

血清学诊断主要是检测患者血清中的抗体水平，即用已知的流感病毒抗原来检测血清中的抗体。血清抗体检测方法不能在感染初期检测，因为感染早期抗体还未产生或低于检测浓度时进行检测，多用于流行病学调查，临床少用。

抗原检测的方法主要有两类：直接荧光抗体检测和免疫胶体金层析方法。免疫胶体金层析技术操作简便，无需任何专用仪器，检测结果直观，但假阳性、假阴性多。

本院使用的是直接荧光抗体检测抗原的方法，是应用荧光色素标记抗体分子后，再与标本中特异性抗原结合，用荧光显微镜观察细胞中的病毒抗原及其存在的位置。检测的呼吸道病毒为：流感病毒A型（甲型）、流感病毒B型（乙型）、副流感病毒1,2,3，腺病毒、呼吸道合胞病毒。这是临床常用的检测方法，笔者相信大多数基层医院呼吸道七项检测也是用直接荧光抗体检测方法。

针对两家机构检测结果不一致，我们查阅了资料，与临床医生进行了沟通交流。

首先，排除了检验前因素后，我们注意到两家机构检测的方法学是不一致的。

本科室七项呼吸道病毒检测采用的是直接免疫荧光法，试剂说明书提示，样本检测结果为阴性的样本应接种于适当的细胞进行病毒分离，以确定该样本中是否存在某种呼吸道病毒，直接样本检测结果为阴性，并不能排除病毒感染的可能，这就说明了本科室方法学在排除检验前因素后，仍有局限性。

而省疾控中心用的是基因扩增法（real-time RT-PCR或RT-PCR），检测的敏感性高于本科的直接免疫荧光法，所以检出甲型H1N1流感病毒核酸弱阳性。此方法敏感度高、特异性高。 

再者，造成检测不一致的原因还要考虑到发病时间和检测时间。患者病志示5天前已受凉感冒后发热，自己用药不祥，不确定没用过抗病毒药。12日，也就是7天后，本科室检测呼吸道病毒七项为阴性。病人自用药可使抗原减弱，导致检测结果为阴性，这是可能的。初次感染，人体一大约会在96小时后产生抗体，这是因为初次感染时，适应性免疫反应需要96小时才能启动。如果是二次感染，抗体产生时间会缩短，大约12-48小时就可以清除病毒抗原，7天后，本科室检测的是抗原，结果所以为阴性，这是可能的。而省疾控中心用的是PCR基因扩增法，检测的为RNA，检测为弱阳性，这是准确的。

最后，我们与临床医生沟通的结论为：七项呼吸道病毒直接免疫荧光法检测结果为阴性，CDC流感病毒PCR基因扩增法检测为H1N1弱阳性，两张检测结果并不矛盾。临床医生表示理解。

【心得体会】

作为检验人，针对临床医生提出的质疑，我们要学会辩证对待，不要绝对地认为是自己的错误，或者一味肯定自己没有错误，很多时候,事情不是绝对的。当两者检验结果不一致时，要学会分析原因，首先是找主观原因，从自己找原因，在排除各种影响因素外，要对自己的检验结果有信心，持肯定态度。再者就是查找客观原因，从方法学 、病人特征等因素来分析检测结果的不一致，这样才能找到最终答案。

还有就是要学会与临床医生多沟通、多交流，多与他们探讨检验结果与临床体征不一致可能的原因，在很多时候，只要我们好好沟通了，他们总是会理解的。