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分子|如何修复实时PCR中的软件设置错误?

归去来兮 2022-12-16 191人围观 技术


很多时候,我们会大脑短路,然后犯下巨大的错误,比如,在PCR实验开始后,我们发现,居然忘记了在软件中设置实验时,给含有待测样本的孔加标签!


这个实验还能拯救嘛?还是说只能作废了?


遇到事情的时候先不要慌,拍照发个朋友圈。然后,打开这份已经完成运行了的文件。


在建立文件的时候,我们时常会犯一些错误,比如错误的样品名称,错误的染料,以及忘了给一些孔贴标签。


这个时候,我们需要把菜单转移到‘Setup’界面。


在‘Setup’界面,我们可以看到目标和样品的清单,如果最初输入的信息不正确,,就可以修订一些简单的错误,比如错误的样品名称。


然后通过点击‘Assign Targets and Samples’标签进入,就会新的样品名称已经被自动添加到相应的孔中。


好,让我们回到‘Define Targets and Samples’标签界面。现在,如果我们给一个检测项目分配了错误的荧光标签怎么办?虽然这里是FAM,但其实应该是VIC。这个错误如果不纠正,肯定会引起一些分析问题。


然而,我可以使用‘Reporter’的下拉菜单进行切换。


当我们回到‘Analysis’界面,并且将改变应用时,就会发现数据得到了极大的改善。


这怎么可能?


这是可能的,因为当PCR仪器进行读数时,它是通过一个刮削器组合对原始数据进行提取的,而不是只读取这部分数据,所以原始数据一直存在于我们的设备当中。


好,现在让我们来处理样本孔标签缺失的问题,回到‘Setup’界面,我们可以看到标签是空白的,那是因为我们忘了分配测定和样品编号。


但他们的原始数据还在,因此,我们只需要进行简单地分配,然后回到‘Analysis’界面,然后将应用改变,这些样本孔的数据就会出现了。


那么,我们可以在实验结束后改变什么信息呢?


除了循环条件之外,几乎所有的信息都可以改变,包括样品和检测的名称,哪些样本孔被标记为标准品等等。


来自: 诊断科学 | 作者:认真的刘博
我有话说......