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新冠病毒核酸常规检测与快速检测有啥区别?

归去来兮 2022-4-6 1579人围观 杂谈

01 核酸检测是啥?


核酸检测即利用荧光 PCR 技术检测生物体核酸的过程。(PCR,全称为聚合酶链式反应)。



02 聚合酶链式反应又是啥?


我们在采集咽拭子的时候,只采集非常少一丢丢的液体。


然后看这非常少的液体里面有没有新冠病毒,如果没有或者非常少,就判定为阴性。里面如果病毒很多,就判定阳性。这是理想的情况。


但事实是,即使新冠患者,也不会体液里面密密麻麻都是病毒,可能就是非常稀松的分散着,也就是浓度很低。


浓度不高,就很难检测到,所以就想办法增加浓度。


如何增加浓度呢?就是利用 PCR 的手段。


PCR 技术能够利用特殊的酶在生物体外进行 DNA 片段复制,将特定的 DNA 片段扩增放大,从而达到能够检测的目的。


也就是让病毒的遗传物质翻倍,怎么知道翻了多少倍呢?用 Ct 值(循环数阈值)表示。如 Ct20,就是 2 的 20 次方倍;Ct40,就是 2 的 40 次方倍。


新冠病毒的核酸物质是 RNA,因此检测过程中首先要把 RNA 进行逆转录变成 DNA 后才能进行检测。随后由变性、退火、延伸三个基本反应步骤进行。



03 变性、退火、延伸又是什么?


➊ 变性:DNA 双链(模板)打开,变成单链 DNA;

➋ 退火:特定引物(DNA 小片段)与单链 DNA 互补配对结合;

➌ 延伸:单链 DNA 合成双链 DNA(半保留复制,在复制产生的两条子代 DNA 双链链中包含一条来自亲代 DNA 的单链和一条新合成的 DNA 单链)。


随后,重复循环以上三个步骤,获得更多的半保留复制链,成为下个循环的模板,从而使原始微量 DNA 模板特定区域得到指数级增加,放大几百万倍。


完成 1 个循环需要 1 ~ 2 min,整个反应时间 2 ~ 3 小时。



04 常规 PCR VS 快速检测

简单来说,常规 PCR 检测在样本采集后需要进行核酸纯化再进行后续 PCR 反应,纯大概需要约 30 ~ 60 min。

通常一块反应板中可够容纳 96 个独立的反应同时进行,(最多检测 91 个样本,外加 5 个质控样本),PCR 反应时间需要约 2 小时左右。

而快速检测在样本采集后直接放入裂解液中释放核酸,通常无须进行核酸纯化可以直接进行 PCR 反应,使用快检专用仪器,检测所需时间在 0.5 ~ 1.5 小时左右。


05 快速检测完胜常规检测吗?

快速检测一般通量较小(每批次 2 ~ 16 个样本),虽然单个样本检测时间缩短了,但进行大批量样本检测时,报告时间不占优势。例如要检测 100 个样本,16 通道检测需进行至少 7 批次,2 通道检测 50 批次

因此,快速检测适用于因特定原因需尽快获得检测结果、待检人群数量较少、实验室空间场地限制的情况。但对于高风险人群的检测以及大规模人群筛查还是推荐使用常规检测。


资料来源:上海市临床检验中心 、疾控中心
来自: 丁香园检验时间
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