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生化试剂水空白“上蹿下跳”,这个原因一般人还真想不到

归去来兮 2022-3-31 04:59 PM 1213人围观 技术


作者:史剑飞 李俏

单位:西安市儿童医院检验科

一天的工作开始啦!我们跟往常一样对AU5821全自动生化分析仪进行每天的操作,这次由于前一天晚上进行了1单元模块样本和试剂注射器的定期更换和保养,根据情况要进行留样再测校准质控等。首先对AU5800进行日常的保养(检查昨日更换的样本注射器、试剂注射器以及清洗水和ISE注射器无泄漏,检查清洁剂蠕动泵装置无泄漏等)后,对ISE单元进行灌注和清洁以及定标,检查所有试剂单元的数量充分后,一切准备就绪开机运行。


每天进行测量的第一项是水空白检测排除试剂加错、R1及R2位置放反等问题,此项步骤必不可少!当我们满以为试剂空白结果跟之前一样,结果却大相径庭!从下图中可以看出与之前每天的试剂水空白OD检测值相比,1单元ALT、AST水空白OD检测值全部上升,CK、TCHO、TBA水空白OD检测值全部下降,UREA水空白OD检测值未检出。


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根据我们的工作经验,这肯定是由于系统误差导致的结果,原因在哪里?

①是去离子水的问题?AU5821有2个模块,立刻检查2单元试剂水空白OD检测值与之前相比均正常,同时每天检测的纯水机电导率在正常范围,滤芯反渗膜等也是近期更换,早上仪器用水也是新取的去离子水,通过比对排除水质问题,同时为确保瓶子污染,同时重新取水选取1单元两个试剂(Mg和ALB)项目进行上机检测,结果未发生明显改变,OD检测值甚至更低。



②进行上述排除的同时,我们自然想到了很可能是昨天注射器更换导致的,早上开机前已检查注射器等未出现泄漏等问题,仪器工作中注射器也未泄漏,注射器中压力弹簧稳定,未出现吸力不够和气泡等问题。

③查看仪器报警信息中有一条显示“sample probe clot”,为排除样本加样针堵塞问题,在仪器待机状态下,对样本加样针用导丝和洗耳球分别进行畅通,同时用酒精棉签擦拭针周,样本加样针头水流通畅未发现凝块等杂质。

④试剂添置过程中无差错,且Mg和ALB等试剂均为单一试剂,为排除试剂加错R1和R2放反等,检查1单元试剂仓无差错。

⑤观察试剂的反应曲线,看是否能发现问题。

单一试剂ALB和TP的反应采用终点法检测,加入水之后并不会影响吸光度,在测量点检测区间内主波长和反应OD检测值应该变化不大,次波长无反应。下图中早上异常的反应曲线主波长和次波长均显示波浪形,TP和ALB从一开始加入吸光度就偏高逐步下降,最后均呈波浪反应,且次波长均有反应;双试剂UREA从一开始吸光度降低呈波浪线,R2加入后出现反应,次波长反应消失,曲线趋于稳定。

观察上述变化,结合其他试剂的异常反应曲线,我们与工程师讨论后,觉得问题应该还是出现在注射器问题中,因为从开始反应后的OD值就出现异常,反应体系的稳定性存在异常,如果是因为光源寿命过长的问题,次波长应该不出现反应,同时之前的光路校准和灯泡使用时间均在使用期限内故排除光路问题。


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⑥此时注意到今天所用的试剂水空白的用量明显增多,如下图所示。




根据往常经验,今早上机的去离子水吸样量明显增多,问题应该锁定昨天的注射器有问题,是不是注射器失效还是批次不对,在工程师的协助下立即进行拆卸查看,谜底终于解开!

样本注射器和试剂注射器两者更换时交换了位置如下图所示,因为两种注射器都套在管里面,外观上不仔细看不容易发现两者的不同,样本注射器直径细,试剂注射器直径粗,在吸样刻度相同的情况下,两者的吸样量显著差别,两者互换导致的直接后果就是样本吸样量增加而试剂吸样量严重不足,进而出现早上试剂空白“上蹿下跳”的现象,进而之前出现的问题迎刃而解。



此次的问题给了我们今后日常工作以警示,在看似琐碎繁忙的工作中务必要仔细留神,在细微之处见真知,提升工作效率,不断夯实自己的理论知识和操作能力,多问多查勤动手,方能做一名合格的检验人!


来源: 检验医学网
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