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警惕!一次小纰漏导致 7 天新冠核酸检测实验内参失常!

归去来兮 2021-12-23 238人围观 技术


新冠核酸检测是确诊新冠肺炎的重要手段。在当前疫情仍然十分严峻的情况下,新冠核酸标本日益增多,为提高工作效率,很多实验室都选择了提前一天把试剂配好储存备用,本实验室也是如此。


配试剂的盘跟随配好的试剂从试剂间传到样本间再到扩增间后我们会回收使用,回收的方法是用 2000 mg/L 含氯消毒液消毒浸泡后清水冲洗或高压后再晾干待用。这样的流程经长期实验验证是没问题的。


但在 11 月初,实验室在此环节中某一处出现了纰漏,导致接下来的 1 周的工作受到了严重影响。


现将该案例和同仁们分享如下:



案例经过




11 月 4 日


实验中使用 11 月 3 日配的金豪新冠扩增试剂突然出现整批标本无内参,弱阳和阳性质控品也无曲线,如下图 1(该批试剂在 11 月 3 日使用时正常):

 

图 1


用之前剩余的 11 月 2 日所配试剂,结果正常(后面分析问题时发现该批结果标本内参 ct 值较以往偏高)。如下图 2:


图 2

 

这个结果证实扩增仪和标本均无问题。

 

我们初步怀疑储存冰箱可能出现问题,于是将所有试剂转移至另一台冰箱内储存。



11 月 5 日


换冰箱储存后,使用 11 月 4 日配的试剂整批标本内参 ct34 左右。

 

我们怀疑可能有抑制物。经排查发现 11 月 3 日配试剂使用的盘用 2000 mg/L 含氯消毒液浸泡后新人将其捞出未经清水冲洗直接晾干后使用。于是又把之前配试剂的盘全部换掉。



11 月 6 日


情况无好转,仍有不少标本(近 1/4 板)无内参;换用达安新冠扩增试剂,结果类似也不理想。如下图 3:


图 3

 


11 月 7 日


11 月 7 日现配试剂标本内参 ct34 左右,无内参标本占 1/10 板。



11 月 8 日


 8 日情况依然无好转。



11 月 9 日

当天现配试剂标本内参 ct34 左右,偶无内参;同时拿 2 盒试剂去其他医院做平行实验。



11 月 10 日


10 日好转,标本都有内参,ct 值 < 30。其他医院回复试剂正常。



11 月 11 日


11 月 11 日标本都有内参,ct 值 27 左右,恢复正常。



11 月 12 日


12 日扩增结果正常。并使用 11 月 5 日、11 月 7 日、11 月 9 日所配的试剂与 11 月 12 日现配试剂同批次平行实验,结果均正常(标本都有内参,且 ct27 左右)。如下图 4(所用试剂同品牌均属同一批号):


图 4

 


原因分析

此次事故持续一周,额外消耗了大量人力、试剂、时间成本,实验人员疲惫不堪。


罪魁祸首就是用含氯消毒剂(健之素)浸泡消毒的试剂配制盘使用前未过水洗净。

 

具体分析一下原因:

 

首先是浸泡了健之素消毒液的盘表面晾干的情况下,如果配完直接使用,此时八连管上不会沾染过多,转移到扩增仪上不会影响结果(因此 11 月 3 日当天使用未发现问题)。

 

如果把试剂连盘一起装入密封袋(不盖盖子),冷冻过程中形成的水汽会溶解盘上的健之素残留,从而沾染八连管,甚至会进入管内试剂中。当这样的八连管转移到扩增仪上运行实验时,一方面管内的健之素会抑制扩增反应,使结果出现假阴性(11 月 4 日整批无结果);另一方面八连管外壁上的健之素残留会在加热过程中挥发到仪器内部,在下一批甚至下几批实验时仍能继续影响结果,这也是后面即使换了盘仍然连续几天出现扩增反应被抑制的原因。



经验及思考

 

成功的经验千篇一律,失败的原因各有千秋。实验前、实验中、实验后任何一个环节出了差错都有可能影响整批甚至更大批的实验结果。


因此,实验人员在日常工作中一定不能掉以轻心,特别是对新人的培训更要面面俱到(随着新冠业务量的增多,越来越多的新人加入核酸检测队伍)。

 

除了浸泡消毒的盘使用前必须过水洗净晾干外,仪器的消毒尽量选择易挥发的 75% 酒精,若选用含氯消毒液擦拭后必须用清水或 75% 酒精再次擦净。

 

此外,本实验中还暴露了所用八连管质量可能存在密封不严的问题,考虑实验室之前采用的八连管质检方法有待改进。

 

另外,推测的仪器内部健之素挥发会影响标本内参 ct 值,但实验中弱阳和阳性质控品的 ct 值却未受影响,原因需要进一步探讨。


来自: 检验时间 | 作者赵桂梅
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