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乳糜血干扰实验?这 3 个处理细节一定要注意!

归去来兮 2021-11-23 04:57 PM 3798人围观 技术

血脂是血浆中的中性脂肪和类脂的总称,它们是生命细胞的基础代谢必需物质,是能量的来源和细胞结构的重要成分。随着人们生活水平的改善,高脂血症的患者逐年增加血液中血脂浓度增高,不仅会增加动脉粥样硬化和冠心病的风险,改变血液自身黏度,有些患者在血液被采集离体后还会出现「牛奶样」外观,从而影响多种实验室检测结果的准确度。

Q

7 哥,那个老是乳糜血的病号又来了,甘油三酯都超出上限了,你当时是怎么处理的?

A

遇到问题不要慌~先看看反应曲线再说



图 1.患者反应曲线  

图 2. 正常反应曲线

患者样本当天(左图)& 患者样本静置过夜后(右图)

「我们血脂分析检测的项目包括甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白 A1、载脂蛋白 B,检测方法均为终点法。」

「AU5800 的整个检测过程是,0 点之前加入 R1 试剂,0 点加入患者样本,然后搅拌棒进行搅拌混匀,1 点到 10 点为温育过程,10 点加入 R2 试剂,然后搅拌棒进行混匀,温育直到最后 27 点反应终止。通过计算 27 点和 10 点的吸光度变化来计算相应项目的浓度」

「对比正常反应曲线我们可以看出,该患者的反应过程在加入样本后,有一个明显的异常峰值,这个峰值导致 10 点的吸光度异常升高,最终导致结果计算不准确从而干扰了相应项目的检测。」

高脂血症分类


乳糜血是指由于各种原因导致的含有大量乳糜微粒的一种血液标本,其产生的主要两大原因是高脂血症和脂肪乳注射液的广泛使用。

高脂血症是指血浆中总胆固醇和(或)甘油三酯水平升高,由于血脂在血中以脂蛋白形式运输,实际上高脂血症也可认为是高脂蛋白血症。根据 1970 年 WHO 建议,将高脂蛋白血症分为 6 型。


此法分型过于繁杂,目前从临床上,可将高脂血症简单分为四大类:高胆固醇血症、混合型高脂血症、高甘油三酯血症、低高密度脂蛋白血症

干扰项目及排除方法


一、对血细胞分析的干扰

白细胞计数过程会加入溶血剂破坏红细胞,但在乳糜血时,脂类物质成分过高,大量脂肪颗粒吸附在红细胞表面,导致溶血速度降低,许多红细胞被错误地检测为白细胞,使白细胞计数假性增高。当乳糜颗粒的直径为 7 ~ 9 fL 时,会使仪器误认为是血小板,造成 PLT 增多。

血红蛋白检测时,血细胞分析仪采用溶血剂溶解红细胞释放血红蛋白,在特定波长下测定溶液吸光度。溶液颜色与血红蛋白水平呈正比,此方法遵循朗伯 - 比尔定律。如果被测溶液里含过多的乳糜颗粒会产生浑浊干扰测定结果,而且乳糜颗粒也会影响溶血剂的溶血速度,造成红细胞破坏不完全而影响结果。

排除方法:可采用血浆置换法。将患者样本离心后,吸取上层约 2/3 的乳糜血浆(不要吸净,防止吸到中间白细胞和血小板层),加入等量的生理盐水混匀后上机检测。

二、对常规化学检测的干扰

1. 钾钠氯

目前检测血清中钾钠氯离子应用最广泛的方法为离子选择电极法(间接法),其原理是将样本进行一定比例的稀释后再测定离子浓度。一般情况下,血清中水占总体积的比例是稳定的,约为 93%(含有钾钠氯离子),剩余的 7%(不含钾钠氯离子)为蛋白质、脂类等。当样本中含有大量不溶于水的脂类物质时,水的体积被脂蛋白挤占,其所占比例降低,而仪器稀释的比例和默认的水占体积未变,这就导致间接法检测钾钠氯离子时会导致假性降低。

2. 其他生化项目

乳糜血对生化项目检测的干扰机制主要是不可溶物质增多使标本混浊,标本的透明度下降,使入射光产生散射,从而影响化学反应的吸光度或产物颜色的变化。

排除方法:目前实验室内方便快捷的处理方法多为稀释法和高速离心法。

①生理盐水(或去离子水)稀释法:用生理盐水对乳糜血标本按一定比例稀释后在进行检测,得出的结果再乘以稀释倍数。此方法可在一定程度上降低样本的浊度,减少对结果的影响,但仍存在些局限,比如低值的项目稀释后可能小于仪器检测下限。

②高速离心法:将离心速度设定为 15000 ~ 16000 r/min,离心后取下层相对清澈的样本进行检测。一般情况下,高速离心法对于去除乳糜血干扰比较有效,但离心后下层清液中脂类减少,故不适合其测定。

其他诸如乙醚萃取法、脂质清除剂法、磷钨酸 - 镁法和聚乙二醇法等,因对检测项目影响较大或对于实验室要求较高,并不适合普通医学实验室推广。


乳糜血样本属于常见的不合格样本类型,因其干扰多种实验室检测的结果而常被拒收,但是对于时间就是生命的急诊患者而言,难以做到完全符合实验室规定,甚至重新抽血可能会导致时间浪费而影响患者的治疗和预后,所以,对于实验室工作人员,除了遵守实验室规定之外,还应了解乳糜血样本对于各种检测结果干扰的严重程度以及排除干扰的方法。



文中插图:作者提供

参考文献:
[1]王赫,刘佳,范琳琳.高脂血症对大白鼠血液流变学影响的初探[J].当代畜禽养殖业,2020(06):13-14.
[2]韩梅,时建国.分析高血脂患者乳糜血对血常规检测指标的影响[J].检验医学与临床,2016,13(19):2820-2821.
[3]曹寒沁,金胜航,吴敏瑾.乳糜血标本对血细胞分析仪测定结果影响因素的探讨[J].国际检验医学杂志,2014,35(13):1776-1777+1780.
[4]梁紫薇,刘志贤.乳糜血影响生化项目检测结果的研究进展[J].检验医学与临床,2018,15(10):1531-1533+1536.


来源: 检验时间 | 作者:Doctor.7
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