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《新型冠状病毒感染临床检测技术》：“面对种类繁多的商品化试剂和自建方法，如何利用性能确认/性能验证过程明确所选择使用/建立的试剂是否能在本实验室操作条件下达到可接受的检测性能、实现预期临床检测需求，从而为患者提供可靠的临床结果，是每一个拟开展SARS-CoV-2核酸检测的实验室在开展临床检测前都需要深入了解的问题。” 《医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行 第二版）》中：“各医疗机构应当加强核酸检测质量控制。”“性能验证：在用于临床标本检测前，实验室应当由提取试剂、提取仪、扩增试剂、扩增仪等组成的检测系统进行必要的性能验证；性能指标包括但不限于精密度（至少要有重复性）和最低检测限。” 1. 料：荧光RT-PCR扩增检测试剂盒、核酸提取试剂盒…… 2. 机：加样器、离心机、核酸提取仪、荧光PCR扩增仪…… 3. 人：操作者 4. 法：SOPs 5. 环：实验室及环境条件 如何来编写使用前的性能验证方案？ 最好的性能验证方案来自于哪里？ 性能验证合格的标准来自何处？
答案在——“试剂盒的说明书”里 说明书里有性能验证需要验证的指标： 分析敏感性（最低检出限）和临床评价（准确性和重复性〔精密度、特异性〕） 性能指标的定义 （1）准确度（accuracy）：指待测物的测定值与其真值的一致性程度。准确度不能直接以数值表示，通常以不确定度来间接衡量。对一分析物重复多次测定，所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏差即为测定的不确定性。 （2）精密度（precision）：指在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。与准确度一样，精密度同样也是以补精密度来间接表示。测定不精密度的主要来源是随机误差，以标准差（s）和（或）变异系数（CV）具体表示。s或CV越大，表示重复测定的离散度越大，精密度越差，反之则越好。 （3）敏感性（sensitivity,Sen）：又称灵敏度或真阳性率，是指一项检测能够将患者样本正确检出为阳性的能力。敏感性越高，检测发现的阳性的可能就越大。 （4）特异性（specificity，Spe）：又称真阴性率，是指一项检测能够将非患者样本正确检出为阴性的能力。 特异性越高，实际无病的人被判断为阴性的可能就越大。 （5）假阴性率：又称漏诊率，是指将患者样本检出为阴性的百分比。 （6）假阳性率：又称误诊率，是指将非患者样本检出为阳性的百分比。 性能指标之间的关系 （1）精密度与准确度度之间的关系：准确度好的实验，其精密度一定好；准确度差的实验，其精密度则不一定差；反之亦然。
（2）敏感性、特异性与cut-off值之间的关系：Cut-off值，又称分界值、临界值或截断值，是阴阳性判读值或疾病与否的阈值。一般来说，检测结果高于cut-off值时判断为阳性，而低于cut-off值时判断为阴性，其选择决定了检测的敏感性和特异性。cut-off值设置得高，则敏感性低、特异性高；相反，cut-off值设置得低，则敏感性高、特异性低。
基于人群流行病学看， 预测值对于高敏感性和特异性 检测结果的影响 阳性预测值：指得出阳性检测的样本总数中，患者样本占阳性检测样本总数的百分比。 阴性预测值：指得出阴性检测的样本中，非患者样本占阴性检测样本总数的百分比。
当检测试剂的敏感性和特异性达到99%时，阴性预测值可达到99%以上，并且不受流行率高低的影响；而阳性预测值则随着流行率的降低而急速越低。 因此，当下在大规模人群筛查时，因流行率极低（＜0.1%），一旦出现阳性结果，为防止出现假阳性，需对阳性样本要采用另外一种到两种更为灵敏且扩增不同区域的核酸检测试剂对原始标本进行复核检测。
“由于性能确认和性能验证的过程只是通过人、机、料、法、环等方面明确了检测的质量控制点和标准操作程序，但在临床实验室实际开展检测的过程中，还需要严格遵循标准操作程序并监控相应的关键质量控制点，才能实现检测正常运行的目的。” 参考资料： 1.《实时荧光PCR技术》 2.《新型冠状病毒感染临床检测技术》 3.“医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行第二版）更新内容解读”2021.1.9 国家卫健委能力建设和继续教育中心 -END- |
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