找回密码
 立即注册

QQ登录

只需一步,快速开始

  • QQ空间
  • 回复
  • 收藏

TrALL 患者 HOX11L2 基因的表达及其临床意义

归去来兮 2020-12-18 105人围观 技术

急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)是由于早期淋巴细胞在造血组织中异常增殖,并浸润各组织器官的恶性克隆性疾病, 是儿童最常见的白血病类型之一,在成人发病率较低,其中 80%为 B 细胞型 ALL(B-ALL),约 20% 为 T 细胞型 ALL(T-ALL)[1-3],其临床表现主要为出血、贫血、发热和感染症状,以及肿瘤细胞对全身各组织器官的浸润引起的症状和肝、脾、淋巴结肿大等体征。近年来的研究表明,大约有 20%儿童 T-ALL 由于 t (5;14)(q35;q32) 从而导致 HOXllL2 基因激活表达,此基因定位在 1 号染色体短臂 3 区 2 带,是最常见的 T-ALL 分子生物的异常,同时也是儿童 T- ALL 中最常见的特征性分子生物学改变之一 [4,5]。


 

研究内容

 

1. 所有 T-ALL 患者均为 2009 年 1 月至 2020 年 1 月西安市中心医院血研所住院的患者,其中男性 27 例,年龄为 0~42 岁,中位年龄为 19 岁;女性 23 例,年龄为 0~38 岁,中位年龄为 16 岁。以上所有病例的诊断均符合世界卫生组织修订的急性淋巴细胞白血病的分类和诊断标准 [6]。所有患者均经实时荧光定量 PCR 行分子生物学检测。


2.HOX11L2 基因检测:抽取 EDTA-K2 抗凝的骨髓或者外周血 2~5ml ,按照 RNA 提取试剂说明书提取有核细胞 RNA,并利用 CFX96 实时荧光定量 PCR 对 HOX11L2 基因进行定性检测。通过收集荧光信号的变化来实时检测 PCR 扩增反应过程中每一个循环扩增产物的变化量,进一步通过 Ct 值对起始模板进行定性分析。整个实验操作过程均严格按照标准的操作规范进行,同时做阳性、阴性对照和内参,结果均在室内质量控制范围。


3. 形态学检查:骨髓及外周血涂片经瑞士 - 吉姆萨染色分类,并同时做过氧化物酶化学染色(myeloperoxidase,POX)。


4. 白细胞计数:所有的研究对象均采集 2ml EDTA-K2 抗凝外周静脉血,充分混匀,及时送检,采集后的标本均在 2 小时内进行测定,测定前再次颠倒充分混匀。研究样本检测前采用标准血浆对血细胞仪进行测定,要求结果在室内质量控制范围,方可进行研究样本测定。


患者其它临床资料,包括年龄,性别以及随访预后等指标通过病案室病例查阅收集,本研究均取的医院伦理委员批准和患者家属知情同意。

 


研究总结与结论


1.50 例 T-ALL 患者,检测结果显示 HOX11L2 基因阳性患者 12 例(24%),HOX11L2 基因阴性患者 38 例(76%)。阳性患者中,男性 7 例(58.3%),女性 5 例(41.7%),HOX11L2 基因阳性患者在男女性别方面,差异无统计学意义(X2=0.119,P=0.730);表达 HOX11L2 基因患者年龄在 5~10 岁间居多,表达率为 58.3%,与其它年龄组之间的比较,差异有统计学意义(X2=11.577,P=0.018);白细胞计数≤50×109/L 的患者 10 例(83.3%),>50×109/L 的患者 2 例(16.7%),两组间差异有统计学意义(X2=5.469,P=0.019);FAB 分类中,有 75% 的 HOX11L2 基因表达者为 L1 型,与 L2、L3 组相比较,差异有统计学意义(X2=8.766,P=0.008)(见表 1)。



2. 34 例患者获随访资料,随访率为 68.0%,中位随访时间为 20(6-120)个月,死亡 23 例。12 例 HOX11L2 基因表达者死亡 8 例,存活 4 例,中位生存期为 8 个月,1 年生存率为 14.4%;22 例 HOX11L2 基因非表达者死亡 19 例,存活 3 例,中位生存期为 11 个月,1 年,2 年生存率分别为 46.8% 和 8.9%。两组病例生存率进行比较,差异具有统计学意义(log-rank P=0.026)。


我们研究结果中 50 例 T-ALL 患者 HOX11L2 基因表达患者为 24%(12/50)。HOX11L2 基因在男女性别组间差异无统计学意义;HOX11L2 基因表达患者主要分布在 5~10 岁年龄范围,1~5 岁年龄范围次之;而且以 L1 型 ALL 为主,组间差异具有统计学意义;HOX11L2 基因表达者白细胞计数以≤50×109/L 为主,与 > 50×109/L 的患者比较,组间差异有统计学意义(X2=5.469,P=0.019),上述研究结果与西方研究者[7,8]的结果相似。

 

研究结果还显示 HOX11L2 基因表达者与非表达者在生存率方面比较,差异有统计学意义,这与国内研究者左文丽[9]等对 HOX11L2 基因表达对儿童 T-ALL 预后影响观察的结果相吻合。研究表明同源盒 HOX11L2 基因可能是通过甲基化的修饰来影响白血病其它基因的表达,从而来改变可能影响肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,进一步影响白血病的预后。也有一些研究者认为中枢神经系统白血病的发生与 HOX11L2 基因的表达存在相关性[10-12]。因此,HOX11L2 基因的表达作为 T-ALL MICI 分型必不可少的分子生物学标记,已成为 T-ALL 诊断和治疗以及预后观察中的重要指标,其结果对于临床进行明确诊断、分型判断,以及预后具有非常重要的意义。

 


延申阅读

 

急性淋巴细胞白血病是血液肿瘤中最常见的疾病之一,约 60%-75% 的 ALL 患者,可以被发现特征性的遗传学异常和分子生物学改变,比如染色体的增减所导致的低二倍体和高二倍体,染色体易位所形成融合基因,以及引起抑癌基因失活和基因表达失调控等[13]。血液肿瘤中分子生物的异常,可作为血液病诊断,分型的重要依据,也可作为微小残留病变的分子标志[14]。同源盒基因 HOX11L2 是表达于 T-ALL 的原癌基因,由 t (5;14)(q35;q32) 形成,可使 T 细胞发育停滞在某一阶段,从而导致 T-ALL 的发生[15-17] 。还有研究表明 T-ALL 是未成熟 T 细胞或者祖细胞过度增殖所导致的恶性造血系统疾病,通常伴有白细胞数量增高、纵隔肿块、以及中枢神经系统浸润和预后差等特征[18]。

 

T-ALL 具有其特有的细胞与分子生物学特征,HOX11L2 基因主要表达于 T-ALL,并且以 L1 型儿童 T-ALL 为主,HOX11L2 基因表达可能是 T-ALL 独立不良预后因素,临床上通过 HOX11L2 基因检测结果与常规细胞形态学、遗传学、荧光原位杂交等技术检测结果相结合,将对急性淋巴细胞白血病的鉴别诊断、分型,预后及微小残留病(MRD)检测等具有十分重要的意义。


作者单位:西安交通大学附属西安市中心医院血液病研究所

参考文献:
[1] 刘晓明,陈晓娟,邹尧,等。中国儿童白血病组织急性淋巴细胞白血病 2008 方案治疗急性 T 淋巴细胞白血病 84 例分析 [J]. 中华儿科杂志,2019 (10):761-766.                   
[2] 蔡春霞,李健,乐少华,等。达沙替尼联合中国儿童白血病协作组急性淋巴细胞白血病 2008 方案治疗儿童费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病的疗效及安全性 [J]. 白血病・淋巴瘤,2019 (12):728-733.                                                         

[3] Nashwa El‐Khazragy,Amal Ali Elshimy,Safaa Shawky Hassan, et al. Dysregulation of miR‐125b predicts poor response to therapy in pediatric acute lymphoblastic leukemia[J]. Journal of Cellular Biochemistry,2019,120(5):7428-7439.

[4] Yeh TC, Liang DC,Liu,et al. Clinical and bio logical relevance of genetic alterations in pediatric T-cell acute lymphoblastic leukemia in Taiwan [J]. Pediatr Blood Cancer,2019 ,66(1):e27496.

[5] 侯振江,杨晓斌。血液学检验 [M]. 北京:人民卫生出版社,2015:163-165.

[6] Danlel A. Arber,Attilio Orazi,Robert Hasserjian,et al. The 2016 revision tothe World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia [J]. Blood,2016,127(20):2391-2405.

[7] Zhao X,  Hong Y,  Qin Y, et al. The clinical significance of monitoring the expression of the SIL-TAL1 fusion gene in T-cell acute lymphoblastic leukemia after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation.[J]. International Journal of Laboratory Hematology, 2017, 39(6):613-619.

[8] Jing Pan, Yang Zhang, Yan-Li Zhao, et al. Impact of clinical factors on outcome of leukemia patients with TLS-ERG fusion gene[J]. Leukemia & Lymphoma, 2017, 58(7):1655-1663.

[9] 左文丽,邓梅,林全德,等.HOX11L2 基因表达对儿童 T 细胞型急性淋巴细胞白血病预后影响观察 [J]. 肿瘤基础与临床,2018,31(6):478-480.

[10] Heba Moussa, Iman Sidhom. NKX2 ‐5, SIL / TAL and TLX3/HOX11L2 expression in E gyptian pediatric T ‐cell acute lymphoblastic leukemia[J]. Asia‐Pacific Journal of Clinical Oncology, 2016, 12(1). 

[11] Yeh TC, Liang DC, Liu HC, et al. Clinical and biological relevance of genetic

alterations in pediatric T-cell acute lymphoblastic leukemia in Taiwan[J]. Pediatr Blood Cancer. 2019 ,66(1):e27496.

[12] Heba Moussa,Iman Sidhom. NKX2 ‐5, SIL / TAL and TLX3/HOX11L2 expression in E gyptian pediatric T ‐cell acute lymphoblastic leukemia[J]. Asia‐Pacific Journal of Clinical Oncology,2016,12(1).

[13] 马晶晶,陈月,于亮。急性淋巴细胞白血病耐药机制的研究进展 [J]. 中国实验血液学杂志,2016,24 (01):261-265.                                                       

[14] 张建平,杨君芳,王芳,等.1392 例初诊儿童急性淋巴细胞白血病患者 36 种融合基因筛查分析 [J]. 临床与病理杂志,2018,38 (05):956-960.

[15] Mengli Zhuang, Qiqige Chaolumen, Linlin Li, et al.  MiR-29b-3p cooperates with miR-29c-3p to affect the malignant biological behaviors in T-cell acute lymphoblastic leukemia via TFAP2C/GPX1 axis[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications,2020,527(2).

[16] Viviana Soto-Mercado, Miguel Mendivil-Perez, Marlene Jimenez-Del-Rio, et al. Cannabinoid CP55940 selectively induces apoptosis in Jurkat cells and in ex vivo T-cell acute lymphoblastic leukemia through H 2 O 2 signaling mechanism[J]. Leukemia Research,2020.

[17] Adam E, Pflugrath, Vikram S, et al. Bilateral optic nerve and retinal infiltration as an initial site of relapse in a child with T-cell acute lymphoblastic leukemia[J]. American Journal of Ophthalmology Case Reports,2020,18.

[18] Roberta La Starza, Valentina Pierini, Tiziana Pierini, et al. Design of a Comprehensive Fluorescence in Situ Hybridization Assay for Genetic Classification of T-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia[J]. The Journal of Molecular Diagnostics,2020,22(5).

来自: 检验时间 | 作者 :郭晓波
我有话说......