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移液枪如何实现灭菌操作?

归去来兮 2020-10-19 88人围观 技术


移液器又称移液枪,是一种用于定量转移液体的器具,被广泛用于生物、化学等领域。


疑惑:

实验中,需要用移液枪来移液,枪头灭菌了但枪不能灭菌,怎么实现无菌操作?要移的液体量只有几十微升用移液管不好实现,主要是担心枪里面的无菌情况,在吸打时那些空气是直接接触液体的呀。


支招:

1.有可以灭菌的移液枪,如果没有 还是用吸管好 别图省事~或者可以用紫外线进行照射,表面灭菌还可以。

2.枪头灭菌,移液枪70%酒精擦拭。移液时注意慢吸快打,移液量不超过枪头2/3即可。

3.你可以在枪头上部塞上脱脂棉再去灭菌,然后再使用。

4.我看用移液枪的问题关键在于你要求的无菌级别高低以及操作的规范和熟练程度。我现在做活菌计数就用移液枪做梯度稀释,没有问题,很少有杂菌污染。


体会:

1.移液枪可以浸泡在75%酒精中过夜,甚至更长时间;

2.移液时枪尽量不要碰到器皿壁;

3.最好在超净工作台上操作,超净工作台内的空气可以认为是无菌的,这样吸进枪管中的空气很少,可以认为样品不会被污染; 

4.操作熟练程度关系实验成败,建议你先用普通肉汤培养基,和其他非实验菌进行操作练习,熟练后再进行你的正式试验。 

5.关键是灭菌的tip头是要有脱脂棉的tip头,然后对移液枪进行表面消毒就行了。 

6.其实不用那么麻烦,你可以将一般的移液枪放在超净台中,打开紫外灯灭菌半小时,使用时先将移液枪用(70%-75%)酒精棉擦拭表面,然后在酒精灯火焰上2cm左右处将移液枪反复吹打几次即可。有网友是这么操作的,也没有出现染菌的问题! 

7.移液枪放置在超净台中和台子一起紫外灭菌半小时;枪身用75%酒精擦拭;枪头塞入脱脂棉一起灭菌;这样使用应该没问题,以网友实践经验来说。 

8.枪头是经过高压消毒的,直接接触液体的是枪头又不是别的,网友觉得剩下的无非就是无菌操作的问题了,紫外线消毒移液枪就足够了,还泡啥泡,多余. 


小结

关于如何保证移液器的无菌使用,不少朋友提出用紫外线照射,实际上并不恰当。

首先,移液器的杆柄(通常为白色部分)是有机高分子化合物,说白了就是类似塑料的东西。日常生活中大家知道,露天暴晒的塑料容易变脆。经常用大剂量、长时间的紫外线照射移液器同样会极度加速其老化。我们实验室曾经有一把枪从前面的金属圈处(图中a处)断掉,维修人员给出的解释之一就是经常照射使其脆性增加。



其次,将移液器放在超净台中照射时,其靠近台面的一侧以及被金属架遮盖的部分并不能被照到,所以消毒是不彻底的。


有朋友提出将移液器在酒精灯2cm处反复吸吹几次以消毒内部空气的方法。这样操作时移液器的的末端同样可能因温度高而加速老化,天长日久甚至可能导致局部变形,而一旦末端不是绝对的圆润,且老化后丧失应有的弹性,其与枪头之间的密封性将不能得到保证。


另外对于实验室多人公用的移液器,有时会有人不注意就将培养液等吸入移液器杆柄而又未能及时清理,最后会在杆柄内部形成卫生死角,甚至成为污染源。

根据经验,针对移液器(或类似结构者)推荐下列使用保养方法

1.日常消毒,用70%酒精棉球擦拭移液器杆柄表面。使移液器末端(a端)稍低于手持端(c端)并使金属推杆在下方(如图),使用吸满酒精的棉球,还能够保证移液器的金属推杆内面被酒精覆盖、消毒。按动金属退杆同时擦拭被退杆末端(a处)环柄包住的部分。对重要实验若需更加仔细消毒,可将金属推杆拔下,彻底擦拭消毒。


2.不定期将金属推杆拔下,将白色塑料杆柄从b处拧下,用酒精棉球清理杆柄内部。此时可能需要使用钝头铁丝等挟持小棉球以便够末端较细的部位。

来自: 临床实验室
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