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一文读懂白细胞散点图

归去来兮 2020-8-21 12:00 AM 2463人围观 技术


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现在很多全血细胞分析仪都带有WBC散点图,散点图可以为我们提供很多有用的信息,想必很多朋友都对全血细胞分析中的WBC散点图头疼过,这里我们就简要的为大家分析一下(以sysmex XN-1000仪器为例):

1.什么是WBC散点图

 

运用流式细胞计数法和其它生物粒子的物理和化学性质进行检测。血液标本经吸取稀释后,进行化学染色,血细胞在鞘流内的试剂包裹下排成一行通过检测小孔,并有半导体激光束照射到血细胞上。当血细胞经过激光通路时,光束在每个血细胞的不同方向上产生光散射,通过检测散射光,将光信号转化为电脉冲,可以得到有关细胞体积大小和材质的信息,进而描画出二维的散点图。


2. WBC散点图怎么看

 

当一束激光照射到血细胞颗粒上时,产生光散射,散射光的强度取决于诸如颗粒直径和观察角度等因素。本仪器对前向散射光(FSC)进行检测,提供有关血液细胞体积大小的信息;同时对侧向散射光(SCC)进行检测,提供细胞内部(如细胞核、颗粒)的信息。
 
当光照射到经过荧光染色的血细胞等的荧光材料上时,就会产生比入射光波长更长的光。随着染液浓度的增加,荧光强度也随之增长。通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色程度的信息。荧光向所有方向散射,本仪器检测侧向荧光(SFL)


 


图1. 白细胞散点图

横坐标:SSC轴,代表侧向散射光的信号强度

纵坐标:SFL轴,代表侧向荧光的信号强度


散点图中,利用侧向散射光SSC和荧光SFL将白细胞分成五类:中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞。

侧向散射光SSC通常反映了细胞内部颗粒结构的复杂程度。例如,嗜酸性粒细胞由于内部颗粒特征明显,其侧向散射光(SSC)信号最强,落在散点图的最右方。

由于荧光染料通常和细胞中的DNA/RNA核酸结合,所以侧向荧光信号SFL通常反映了核酸的含量的多少,反映了细胞发育的成熟程度。占白细胞最大比例的粒细胞完整的生长要历经原粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞进而分化为成熟的杆状核和分叶核粒细胞。在粒细胞的成熟过程中,其细胞中的核酸含量逐步减少。

由于嗜碱性粒细胞的比例很小,而且通常和中性粒细胞混在一起,很难区分。通常采用另外一个专用的通道(WNR通道)进行检测。所以五分类通道(WDF通道)通常提供白细胞的四种分类(中性、单核、淋巴、嗜酸)。




图2. 嗜碱性粒细胞散点图


3. 常见的异常散点图


疑似异常淋巴细胞增多(WDF通道)


在单核细胞散点图(绿色)的上方出现异常均匀分布的呈长椭圆形或近似长方形的散点图(图中所圈位置),可能是由于病原体对淋巴细胞刺激下,核酸与染液结合加强,侧向荧光(SFL)染色强度增加,侧向荧光(SFL)加强,而出现在散点图上方,需进行血涂片复检。



图3. 疑似淋巴细胞增多(WDF通道)


疑似有核红细胞增多(WNR检测通道)

出现于嗜碱细胞散点图(蓝色)左上方,颗粒增多,区域扩大(图中所圈位置),需进行血涂片复检。


图4. 疑似有核红细胞增多(WNR检测通道)


疑似嗜碱粒细胞增多(WNR通道)

出现于嗜碱细胞散点图(蓝色)右上方,颗粒增多,区域扩大(图中所圈位置),需进行血涂片复检。


图5. 疑似嗜碱粒细胞增多(WNR通道)


来源: 丁香园
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