快速检测碳青酶烯酶检测方法(rCDM)的介绍

rCDM与sCIM和mCIM等方法的检测原理相似，都是基于碳青霉烯酶能水解碳青霉烯类抗生素， rCDM实验操作与sCIM相似，但检测时间较sCIM更短，在常规实验条件下能在4-6小时之内检测出产碳青霉烯酶菌株。这对治疗产酶株引起的感染和院感的防控更有临床意义，现将rCDM检测方法简述如下：

1. 薄的M-H平板的制备：按M-H琼脂的配方配制1000ml M-H琼脂，高压灭菌后倒入直径为9mm的无菌平皿中，每个平皿倒入19ml琼脂，水平放置，等平皿凝固后放入4℃冰箱保存待用；

   
   

2. 过夜生长的大肠埃希菌ATCC25922用肉汤调到3麦氏单位，，将菌液直接涂到薄的MH平板上（同K-B法）。取一张亚胺培南药敏纸片，用纸片的一面直接粘取过夜生长的待测菌菌落，使纸片的一面全部涂上待测菌（图1），再将有菌的一面贴到涂有大肠埃希菌ATCC25922的M-H平板上。取一张亚胺培南药敏纸片直接贴在平板上作对照。35℃孵育4~6小时后测量亚胺培南的抑菌环，抑菌环与对照之差大于5mm以上为阳性（图1，2）。 如果抑菌环之差小于3mm则判断为阴性。介于二者之间为不确定的结果，需用其他方法进行检测。

   
   

需要注意的是rCDM在检测一些产酶量比较少的细菌时，可能会有假阴性结果。

图1：肠杆菌科细菌rCDM检测结果

图2：铜绿假单胞菌rCDM检测结果

参考文献：

Xiaopeng Jing, Xiaochun Min, Xing Zhang, Lin Gong, Tingting Wu, Ruiling Sun, Liujun Chen, Rong Liu, Ji Zeng*. The rapid carbapenemase detection method (rCDM) for rapid and accurate detection of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae and Pseudomonas aeruginosa. Frontiers in cellular and infection microbiology. 06 November 2019 doi: 10.3389/fcimb.2019.00371