生化结果为何出现负值！9大原因，7个处理高招

下面，我来试着解释下生化项目负值的结果是怎么来的，为什么会出现负值。

上图是两点终点法的浓度计算公式，其中定标液1一般是0浓度，斜率和截距仪器默认一般是1和0（参数设置界面有可能做过更改，不是1和0）。那么负值就自然就来自于前半部分的K（A_x-A_b）。

其中A₂的计算方式与上面提到的A_x相同，S1 Abs即试剂空白。

以上三者都可能是负数，都与吸光度有关，所以凡是会造成吸光度不正常变化的因数都有可能造成负值的结果。

1、灯泡老化或质量问题：部分生化分析仪是要求吸光度>19000或750小时需要更换。

2、反应杯脏或者损坏：部分生化分析仪是要求与1号反应杯的吸光度差值＜±800。

3、清洗针堵塞或者漏气：反应液无法抽走或者无法添加清洗液进行清洗；也有的可能会在测试中滴水，反应液被稀释，造成吸光度突然下降，可能出现负值。

4、搅拌棒清洗不干净：搅拌棒有一层特氟龙涂层，如果被刮坏，不易洗干净，易造成交叉污染。

5、样品针堵塞：样品没有被加入到反应杯，没有发生反应，反应曲线是一条直线，吸光度没有变化，差值为负，出现负值。

6、试剂R1/R2添加错误：很多实验室应该都是习惯于在试剂快用完了时，往试剂瓶里面添加试剂的做法，部分生化分析仪加样顺序是：样本S+试剂R1+试剂R2，因为主要反应物在R2，如果放反了，样本S和试剂R2直接就开始反应，吸光度上升，等试剂R1加入后吸光度下降，吸光度差值为负，结果出现负值。

7、严重脂血或黄疸标本：加入样品S+R1时吸光度就很高，加入R2之后反应的吸光度可能还没有S+R1高，吸光度差值为负，结果出现负值。

8、长时间未定标或未做试剂空白：试剂使用时间太长被污染或变质，试剂空白吸光度升高很多，等到你下次更换一瓶新试剂的时候，未定标或未做试剂空白，使用的还是被污染之后的定标和试剂空白结果，可能出现负值（见过超过一年没有定标，没有做试剂空白的）。

9、底物耗尽：通俗的讲就是，浓度太高，试剂里面的反应物不够用了，造成吸光度异常下降或上升。一般酶类项目会出现这样的情况，可采取稀释重做。