腺苷脱氨酶(ADA)的检测及临床应用

腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase，ADA)是一种与机体细胞免疫系统有重要联系的核酸代谢酶类。近年来在一些疾病的早期诊断和治疗监测以及免疫功能障碍的发病机理研究中受到重视。国内外研究表明，ADA对诊断结核性胸腹水、脑脊液等的特异性和敏感性明显优于活检和结菌学方法。尤其在良、恶性难辩的渗出液鉴别诊断上有重要价值。现将有关资料作一综述。

性质和作用

ADA是嘌呤核苷分解代谢过程中起关键作用的酶，它能催化腺嘌呤核苷降解为次黄嘌呤核苷，而后经核苷磷酸化酶催化成次黄嘌呤，最终氧化成代谢产物尿酸。

ADA属于一种巯基酶，每一分子含两个活性巯基，其活性能被对氯汞苯甲酸完全抑制。ADA基因位于第20对染色体上，并呈现遗传多态性现象。ADA常见有3种表现型(ADA1、ADA2、ADA3)，广泛分布全身各组织中，在动物体内主要分布在盲肠、小肠黏膜和脾。血液中的ADA主要存在于血细胞中(如红细胞、淋巴细胞和粒细胞)，其活性约为血清中的40～70倍。

ADA在临床诊断上的应用

1．结核病诊断

鉴别结核性和非结核性胸、腹水及脑脊液是临床病因学诊断的一个常见难题。虽然近年来有结核抗体、PCR测定等新技术，但由于假阳性及价格等因素，普及应用仍受限制。据报道，即使多方检测，仍有20％左右的积液不能明确病因。因此应用ADA检测，对不明原因积液诊断又增添了一项诊断指标。

结核菌感染人体虽然能产生抗体，但无保护作用，其抗感染免疫主要靠细胞免疫。细胞免疫作用是结核菌激活T淋巴细胞使其产生增殖，随之引起巨噬细胞的活化，活化的巨噬细胞内溶酶体酶大量增多，增强对细胞内结核菌的杀伤作用。

早在1978年Piras报道ADA在结核性胸水时P/S>I.0，癌性胸水<1.0(P/S表示液/血比值)，其机理为：由于各种物质的生成、存储、代谢以及化学特性、生物学活性、相对分子质量等各不相同，加之细胞血管、浆膜的屏障作用在各种因素下的通透性改变，造成了检测物质在胸水中与血清中浓度上的差异与规律性比例，为诊断提供有价值依据。

在胸腹水检测中，结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性无显著差异。

  2．肿瘤诊断

利用检测T淋巴细胞ADA活性，能够作为表面标志物辅助淋巴细胞白血病和淋巴瘤的诊断和分型。有关资料证实，急性淋巴细胞性白血病的T淋巴细胞活性增强，而慢性淋巴细胞性白血病和何杰金氏淋巴瘤患者外周血T淋巴细胞ADA无明显变化。

3．艾滋病(AIDS)的诊断

1987年Delia提出，在检测无症状AIDS高危人群时，ADA活性测定与检测AIDS相关逆转录病毒抗体可协同作为AIDS的诊断标志。获得性免疫综合征，无特征淋巴细胞中ADA和PNP均比健康对照组有显著性增高，在半数无症状AIDS高危个体的RBC中ADA活性显著增高加。

4．重症联合免疫缺陷病(SCID)的产前诊断

ADA缺乏与SCID有关，至今发现约有1/4~1/2的SCID是因先天缺乏ADA造成的，并且也证实ADA属常染色体隐性遗传。临床测定胎儿羊水中纤维母细胞ADA活性能有效地对ADASCID患者进行产前诊断。

   5．其他疾病的诊断

除对上述疾病的鉴别诊断外，在另一些能刺激细胞免疫系统的疾病(如伤寒、传染性单核细胞增多症、布鲁氏菌病、风湿热、溶血性贫血)的血清中，ADA也出现增高现象。此外，ADA鉴别胆汁淤积原因和诊断急慢性肝炎、肝硬化等有一定的价值。在反映急性肝病残存病变或慢性肝损害程度方面，如结核患者服用抗痨药物最常见引起肝损害，ADA较ALT敏感，并且可作为非甲非乙型肝炎的标记。

在临床方面的应用

利用相同血型红细胞悬液，经处理破坏其中的淋巴细胞后输注给SCID患儿，可使缺少ADA患儿的T、B细胞功能恢复，起到缓解症状作用。

ADA是淋巴细胞生长和功能的依赖性酶，利用ADA抑制剂(如去氧助间型霉素)选择性地抑制ADA活性，能够有效控制T淋巴细胞DNA的合成，治疗急性淋巴细胞性白血病，有效率达57％。

自身骨髓移植法也是一种用于缓解急淋症状的治疗手段。

检测方法

检测血清、体液、红细胞和淋巴细胞的ADA活性。通常利用ADA的作用底物——腺苷的分解速度，次黄苷或氨等产物的生成量，以及终产物——尿酸生成量的改变进行ADA活性测定。

小结

腺苷脱氨酶(ADA)广泛分布于体内各组织，主要与细胞免疫功能有关的核酸代谢酶类。检测ADA活性方法较多，其中以分光光度法和氨试剂法较为简单实用，一般普通医院易于开展。

ADA活性检测可用于SCID产前诊断、白血病的分型和艾滋病的普查，检测胸水、腹水、脑脊液中ADA活性对结核性积液病因学诊断有重要价值，国内外研究表明，ADA对诊断结核性渗出液的特异性和敏感性明显优于活检和细菌学方法，值得推广。