血涂片估测血小板计数的 5 种方法与 8 大影响因素（超实用） ...

当下细胞自动分析仪是计数血小板 PLT 的主要手段，检测血常规的首选仪器是全自动血细胞分析仪，该方法具有操作相对简单，检测速度更快等诸多优势，但当计数值超出参考范围或与临床明显不符时，仍需血涂片镜检进行复核复检。

❶ R 值法

选取体尾交界处红细胞排列紧密且不折叠的高倍镜视野进行计数，在油镜下至少计数 10 个视野，PLT 估测值 = 每油镜视野中平均 PLT 个数 ×R×10⁹/L。

公式中Ｒ值又称视野因子，不同文献 R 值的取值并不相同，一般需要选取一定量的样本进行最小二乘回归分析得到。R 值法最简单，仅考虑细胞是否均匀分布，并没有考虑 RBC 比容对结果的影响。但是 R 值法只能作为极为粗略的估计方法，贫血越严重估测误差越大。

一般 PLT 结果有疑问时，普遍选择 PLT / 白细胞比值法和 PLT / 红细胞比值法。

❷ PLT / 白细胞比值法

在血片厚薄适中处，计数 100 个以上白细胞 (N 目测白细胞数) 和所涉及的视野中所有的 PLT 总数 (N 目测血小板数)，以仪器计数的白细胞数 (N 仪器白细胞数) 为参考计算出 PLT 的总数，PLT 数量 N=(N 目测血小板数 / N 目测白细胞数)×N 仪器白细胞数 ×10⁹ L。

❸ PLT / 红细胞比值法

对于白细胞严重减少的患者，可在红细胞均匀分布的区域计数红细胞数量和 PLT 数量。以仪器计数的红细胞数（N 仪器红细胞数）为参考计算出 PLT 的总数，PLT 数量 N=(N 目测血小板数 / N 目测红细胞数)×N 仪器红细胞数 ×10⁹ L。计数红细胞时在目镜中放置 Miller 窥盘会提高计数准确性。

另外，若根据仪器红细胞数值，在油镜下选择均匀分布又含有相应数量红细胞的区域（若红细胞计数值为 5.0×10¹²/L，选择 500 个红细胞 / 油镜视野的区域），结果会更加准确。

❹ 散点图和拟合曲线

以平均高倍镜视野下 PLT 个数为 X 轴，仪器 PLT 值为 Y 轴，作线性回归分析获得类似 Y=a+bX 的线性方程，使用时将高倍镜下获得的 PLT 平均个数代入计算即可。该方法和 R 值法原理相同，但是计算较为繁琐，不方便临床使用。

❺ 血红蛋白因子法

同样在油镜下观察至少 10 个视野，则 PLT 估测值 = 每油镜视野中 PLT 平均个数 × 血红蛋白浓度（g/dL）×10⁹/L。但用血红蛋白浓度推测 PLT 数量有时不如 R 值法准确。

❶ PLT 数量的异常

异常低值及高值 PLT 计数均会对血细胞分析仪检测 PLT 计数的准确性提出挑战。

PLT 计数降低可见于：慢性肾功能衰竭、慢性肝病及肝硬化、肿瘤病人化疗期间、流行性出血热、糖尿病、烧伤、输血、肝素、体外循环、药物影响等。

PLT 计数增多可见于：类风湿性关节炎、川崎病、恶性肿瘤等。

❷ PLT 计数假性增加或减少

多表现为 PLT 参数异常：PLT 异常直方图、PLT 聚集报警等。PLT 计数假性增加：小红细胞、红细胞碎片、白细胞胞质碎片、冷球蛋白、脂质及细菌 / 真菌干扰；

PLT 计数假性减少：大 PLT、PLT 聚集和 PLT 卫星现象抗凝剂等原因【2】。

1. 红细胞碎片和小红细胞干扰

小红细胞干扰多见于珠蛋白生成障碍性贫血患者，红细胞碎片干扰可见于弥散性血管内凝血患者、骨髓纤维化患者。

2. 有核细胞胞质碎片

除了红细胞外，由原始细胞或淋巴瘤细胞产生的小碎片胞质碎片也会导致 PLT 计数假性增加。单核细胞白血病和弥漫大 B 细胞淋巴瘤是这种罕见干扰最常见的原因。

3. 冷球蛋白

冷球蛋白的干扰是大小相关的，小的沉淀物会诱发假性 PLT 增多或掩盖 PLT 减少。

4. 大 PLT

无论是否存在 PLT 减少症（骨髓增生性肿瘤、骨髓增生异常综合征、遗传性 PLT 疾病和 / 或 PLT 减少症、免疫性 PLT 减少症等），在各种情况下均可发现大 PLT 甚至巨 PLT，并常常导致 PLT 计数被低估，甚至干扰白细胞计数。它们的检测对于纠正 PLT 计数和指导原发性 PLT 减少症的诊断具有重要意义。

5. 乙二胺四乙酸（EDTA）诱导的 PLT 聚集及卫星现象

EDTA 诱导的 PLT 聚集在临床并不少见，抗凝血涂片上出现 PLT 聚集、粘附于中性或单核细胞周围而成的卫星现象和大片状聚集。目前仍有由于 EDTA 诱导的假性 PLT 减少导致的不良临床后果，其中包括新型冠状病毒感染患者 EDTA 诱导 PLT 假性减少导致的不必要的 PLT 输注。 

❸ PLT 分布异常

PLT 散在分布多见于 PLT 无力症、再障等疾病，过度聚集多见于骨髓纤维化、慢粒、原发性血小板增多症等。

❹ 样本异常

此外，样本中小凝块和纤维蛋白丝的存在可使 PLT 数量降低，临床工作中小伙伴们需要注意呦。

临床通过 PLT 计数评价出血及血栓性疾病、感染严重性等，使该项指标越来越受到重视。在日常的检验工作中，检验人员需要利用仪器报警信息作出正确的判断，必要时通过涂片复检的方法判断仪器结果是否可信。