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IVD人值得收藏的:74条免疫学检验常识!

归去来兮 2020-11-12 65人围观 技术







1. 免疫防御(对外)免疫自稳(防自身免疫病)免疫监视(防肿瘤)。

 

2. 标记免疫技术应用最多,自动化是免疫学检验发展趋势。

 

3. 抗原的表位至少有二种方式:顺序或线性表位,三维结构的构象表位。

 

4. 天然抗原绝大多数是胸腺依赖性抗原(TD-Ag)。超抗原被T细胞识别时虽然要与MHCⅡ类分子结合,但不受Ⅱ类分子的限制,可以直接活化T细胞而且效率高。抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL是抗原结合部位,CL,CH1是遗传标记所在,CH2有补体结合点,CH5能固定组织细胞,CH3和CH4还参加Ⅰ型变态反应。免疫学中常用木瓜酶和胃蛋白酶。

 

5. 免疫球蛋白的血清型有:同种型(正常个体都有)同种异型(只存在同种的某些个体中)独特型(某一个体独有的。独特性网络在免疫应答的调控中起重要作用)。

 

6. 天然IgG分子无活性。IgM(五聚体,天然凝集素和冷凝集素,是B细胞膜上主要表面膜Ig)激活补体能力最强,IgG(单体,电泳最慢,再次免疫应答的主要抗体)至少要两分子。0.1mol/L 2巯基乙醇能破坏IgM但不破坏IgG,可以区分它们。

 

7. 母乳中的分泌型IgA提高了婴儿出生后4~6个月内的局部免疫屏障,常称为局部抗体。

 

8. 人类重链基因位于14号染色体上,K基因位于第二号染色体上。

 

9. 参与补体激活经典途径的固有成份按先后为C1,C2……C9,C1由C1q,C1r,C1s,三种组成。灭活的补体在片在符号前加i,有酶活性的上加一横。

 

10. 补体大多是糖蛋白多属β球蛋白,C1q,C8是γ蛋白。C1s,C9是α球蛋白。C3含量最多,C2含量最少。替代途经的激活物主要是细胞壁成分。

 

11. 补体清除免疫复合物的方式:吞噬调理,免疫粘附,免疫复合物抑制。

 

12. 编码人C4,C2,B因子的基因在第六染色体短臂上与MHC的基因相邻,命名为Ⅲ类组织相容性基因。产生补体主要是肝脏主要是巨噬细胞。

13. 已发现的归巢受体有:CD44,LFA-1,VLA-4,MEL-14/LAM-1等。CD2表达于全部T细胞和NK细胞。CD3表达在全部T细胞,CD4(辅助性T细胞)/CD8(细胞毒性T细胞)相互关联但意义不同是T细胞亚群的表面标志。

 

14. SIg的功能是作为B细胞表面的抗原受体可与相应抗原特异性结合并将抗原内摄处理。MHCⅡ是辅佐细胞(AC)递呈抗原的必须物质是辅佐细胞(有单核吞噬,树突状,B细胞)的标志。明确的白介素有15个,IL-2主要由T细胞(CD4+)受抗原或丝裂原刺激后产生,15KD,113糖蛋白。

 

15. Ⅱ型干扰素又称免疫干扰素或IFNγ,主要由T细胞产生。肿瘤坏死因子:TNFα:由细菌脂多糖活化的单核细胞产生引起出血坏死也称恶病质素,TNFβ:由抗原或丝裂原刺激的淋巴细胞产生有肿瘤杀伤和免疫调节功能又称淋巴毒素。

 

16. 红细胞生成素(EPO)是糖蛋白,30~39KD,主要由肾小管内皮细胞合成也可由肝和巨噬细胞产生。

 

17. 人类MHC称为HLA复合体,位于第六对染色体的短臂上。其多态性为复等位基因所致,当群体中位于同一位点的等位基因多于两种时为复等位基因,HLA的遗传特点:单倍型,共显性,连锁不平衡。Ⅰ和Ⅱ类MHC分子是引起同种异体移植排斥反应的主要抗原。

 

18. 当抗原递呈细胞向免疫活性细胞递呈抗原时,免疫活性细胞在识别特异性抗原时,必须识别递呈细胞的MHC抗原称为MHC限定性。

 

19. HLA是体内最复杂的多态性基因系统。抗原-MHCⅡ类分子复合物与T细胞受体的结合是使Th细胞活化的首要信号。

 

20. 细胞免疫的效应方式有:细胞毒,迟发超敏。

 

21. 体液免疫以血清中有循环抗体为特征。

 

22. 炎症细胞有:中性,肥大,嗜酸,嗜碱,血小板,内皮。炎症介质:血管和平滑肌收缩介质,趋化因子,酶类,蛋白多糖。免疫炎症类型:IgE介导,免疫复合物,细胞,皮肤嗜碱细胞型。

 

23. 抗原抗体结合基于结构互补与亲和性。由一级结构决定。结合力有:电荷吸引,范德华力,氢键,疏水性作用力。

 

24. 常用佐剂有:氢氧化铝,明矾(弗氏)是目前动物免疫中最常用的。


25. 抗血清保存:4℃,低温,冰冻干燥。

 

26. 抗体特异性纯化有:亲和层析,吸附法。

 

27. 特异性鉴定有:效价,特异性,纯度,亲和力。

 

28. 脾淋巴细胞特征是抗体分泌功能和能在选择培养基中生长,骨髓瘤细胞则可无限分裂既永生性。细胞融合的选择培养基有三成份:次黄嘌呤(H)氨甲蝶呤(A)胸腺嘧啶核苷(T)称为HAT培养基。

 

29. 液体沉淀试验有:抗原稀释法和抗体稀释法及方阵滴定法。

 

30. 免疫固定电流常用于M蛋白的鉴定。

 

31. 补体结合试验中5种成份分三个系统(反应,补体,指示)不溶血为阳性。

 

32. 常用的标记酶有辣根过氧化物酶(底物为邻苯二胺,四甲基联苯胺)碱性磷酸酶(底物为磷酸酯)。

 

33. 抗体制备常用二醛法及过碘酸盐法。

 

34. RIA(放免)核素标记抗原,竞争抑制,2~3个数量级,标记物限量。

 

35. IRMA(免疫放射)核素标记抗体,非竞争结合,3个数量级以上,标记物过量。

 

36. 常用的荧光素有:异硫氰酸(FITC)四乙基罗丹明(RB200)四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)。


37. 常用标记蛋白的方法有:搅拌法和透析法。荧光抗体鉴定包括效价及荧光素与蛋白的结合率,大于1:16为理想,一般固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜用于活细胞染色的以2.4为宜。

 

38. 时间分辨荧光免疫测定以镧系元素铕合物为荧光标记物,偏振免疫测定的偏振波长是485(蓝光)。

 

39. 发光免疫技术:生物发光有荧火虫荧光素,化学发光底物有:氨基苯二酰肼类主要为鲁米诺及异鲁米诺衍生物,哑啶酯类,电化学发光底物为三联吡钌另一类为三丙胺。

 

40. 胶体金颗粒由一个基础金核及包围在外的双离子层构成,其性质有对电解质敏感性,呈色性,光吸收性(510~550nm)。

 

41. 双抗体夹心法的质控点最好是相应抗原。

 

42. 外周单个核细胞的分离的分层液常用:Ficoll(由上到下为:血浆,单个核细胞,粒,红)和Percoll(由上至下:死细胞,单个核细胞,淋,红,粒)。

 

43. 纯淋巴细胞群的采集有:黏附贴壁法,吸附柱过滤法,磁铁吸引法。

 

44. 亚型的分离法有:E花环沉降法,尼龙分离法,亲和板结合法,荧光激活细胞分离仪法。

 

45. 淋巴细胞活力测定常用台盼蓝染色法,死为蓝色。保存时二甲亚砜为保护剂。

 

46. 植物血凝素(PHA)刀豆素(ConA)刺激T细胞增殖。

 

47. 增殖试验有:形态法(分别计数淋母,过渡型淋母,核有丝分裂相及成熟小淋,前三者为转化细胞,计200个,算转化率)核素法。

 

48. SmIg是鉴定B细胞可靠的指标。

49. B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(直接法只能检测IgM生成细胞,其它用间接法,即在脾细胞和SRBC混合时加入抗Ig抗体。B细胞增殖能力试验。测定人NK细胞活性多用以K562细胞株为靶细胞,测鼠NK细胞活性则用YAG细胞株。

 

50. 嗜酸粒细胞活化产物的测定:产物有:阳离子蛋白(ECP),主要碱基蛋白(MBP),X,EPD,EDN等,其中ECP毒性最强因而认为是嗜酸的特异性标志。

 

51. 特异性鼻粘膜激发试验用变应原,非特异性采用乙酰甲基胆碱或组胺。

 

52. 新月体性肾小球肾炎的免疫病理类型有:免疫复合物,抗肾小球基底膜(GBM)抗体,抗中性白细胞质抗体。含有新月体的肾小球数目和比例是该病的关键。

 

53. 膜性增生性肾小球肾炎(MPGN)是原发性肾小球病中唯一具有独特的血清补体异常的疾病,测C3肾炎因子(C3NeF)。

 

54. 自身免疫病(AID)的特征:高滴度自身抗体,病理特点为免疫炎症损伤与抗原分布一致,能建动物模型。

 

55. 不溶性DNP(抗核蛋白抗体)通常完全被DNA和组蛋白吸收,是形成狼疮细胞的因子。

 

56. 抗dsDNA抗体对SLE有较高的特异性。抗Sm抗体是SLE的特异性标志之一。

 

57. ANA阳性的荧光现象分:周边型表示抗DNA抗体存在(SLE),均质型表示有抗核蛋白抗原(DNP)抗体,斑点型多为抗ENA抗体(结缔组织病),核仁型多为抗核小体抗体(硬皮病)。

 

58. 抗乙酰胆碱受体抗体的检测对重症肌无力(MG)具有诊断意义。

 

59. Hep-2细胞(人喉癌上皮细胞株),Hela细胞(宫颈癌细胞株),Farr法测定dsDNA抗体的特异性高为公认标准法,当抗dsDNA抗体结合率大于20%时对SLE有意义。

 

60. 口干症和干燥性角膜炎是干燥综合症(SS)的主要临床表现。


61. 多发性骨髓瘤(最常见免疫增殖病)以IgG居多,重链病类别常见γ,α,µ三型。

 

62. 原发性B细胞缺陷病:全Ig缺失(Broton病,女带,男患病,最先考虑测Ig浓度,CD分子,SmIg);部分缺失;Ig正常但无抗原反应。

 

63. 原发性T细胞缺陷病:易发生GVHR。

 

64. 原发性联合免疫缺陷病,以重症联合免疫缺陷(SCID)的预后最差,属性联或常染色体隐性遗传,T细胞表面存在特异性CD抗原,通过特异性单克隆抗体检测是诊断细胞免疫最有价值的试验。

 

65. 补体缺陷发病率最低。

 

66. 性联慢性肉芽肿(CGD)是性联遗传,女带男患病,特点是吞噬细胞不能产生超氧化物酶杀菌,白细胞低于1500时应考虑,可作四唑氮蓝(NTB)还原试验,REBUCK皮肤窗检测。

 

67. 只有感染了乙肝才肢感染丁肝。

 

68. 艾滋病T淋巴细胞亚群检查可发现T细胞绝对数下降,CD4+淋巴细胞也下降,CD4/CD8小于1。抗体主要是p24,gp120。

 

69. CEA大于60µg/L时可见于结肠,胃,肺癌。

 

70. 手术6周后CEA水平正常。血清CEA结合甲状腺降钙素测定有助于甲状腺髓样癌的诊断和估计。

 

71. AFP是原发性肝癌的最灵敏最特异的标志。

 

72. 胰胚胎抗原(POA),糖类抗原有:CA125(上皮性卵巢癌(基因有K-RAS)和子宫内膜癌)CA15-3(乳腺癌,基因有P53,C-ERB-2)CA19-9(胰腺,结直肠癌)CA50(胰腺结直肠癌)AFU(A-L岩藻糖苷酶)是原发性肝癌的新指标。神经元特异性烯醇化酶(NSE)是神经母细胞瘤和小细胞肺癌(基因有P53,RB)的标志物。

 

73. HLA-A,B,C,DR,DQ位点的抗原可用血清学方法进行检测,所以称为SD抗原,采用补体依赖的细胞毒(CDC)试验,HLA-D,DP位点的抗原须用细胞分型进行鉴定,称为LD抗原,采用混合淋巴细胞培养(MLC)。

 

74. 排斥反应有:宿主抗移植反应(HVGR)和移植物抗宿主反应(GVHR)。

来自: 体外诊断POCT论坛 | 作者:风尘男土
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