二级以上医院核酸检测全覆盖！PCR实验室建设所需所有资料一文给你！ ... ...

4月26日，国家卫健委举办全国视频会议，明确提出“所有县区级以上疾控机构、二级以上综合医院要抓紧进行改造，在短时间内形成核酸检测能力”。你们医院开始了吗？

各地的公立机构检测能力不能满足需求只是暂时的，独立医学实验室在充实检测力量的同时，发挥自己丰富的检验管理运营理念，以及区域化覆盖的经验优势，融入到“国家队”核酸检测能力的建设中，顺势而为，乘势而上。

开展病毒核酸聚合酶链式反应（PCR）检测，对检测场地、实验人员以及防护措施都有很高的要求。三级医院都有PCR实验室，达到新冠病毒核酸检测条件并不难，而对于多数二级医院来说，却存在着诸多难点。

由此看来，二级医院要逐步达到新冠病毒核酸检测条件，确实存在着诸多难点……

随着各地都在建立PCR实验室，本文从硬件基础的角度，梳理了PCR实验室建设的几个关键点，独立医学实验室可以运用丰富的运营经验，进行建设指导、人员梯队建立、质控体系搭建、区域化服务支持等。

如何建设PCR实验室

与PCR实验室建设相关的指导文件主要有四份：

要求临床PCR实验室，不但在实验室设置及仪器设备等硬件上要满足开展临床检验的条件，而且要求实验室在日常工作要有文件化的工作程序。

下面就在PCR实验室建设过程中的几个关键控制点进行阐述:

根据实验室的具体情况编写质量体系文件，《质量手册》、《程序文件》、《作业指导书》，并保证管理体系运行有效。

管理体系的特点是应有明确的目的、规范的管理、有效的制约、高效的机制、能自我发展的整体。

建立完善的SOP文件，对完成各项质量活动的方法作出规定，每个SOP都应对一个或一组相互关系的活动进行描述。

每个SOP文件应说明该项质量各环节的输入、转换和输出所需的文件、物资、人员、记录以及它们与有关活动的接口关系。

明确每个环节转换过程中各项因素的要求，即由谁做、做什么、做到什么程序、达到什么要求，如何控制、形成什么记录和报告，以及相应的审批手续。

规定在质量活动中需要注意的例外或特殊情况的纠正措施。SOP应简练、明确和易懂并且工作人员熟练掌握和严格遵守。

要完成一组PCR实验，通常需要经过试剂配制、样品处理、核酸扩增和产物分析4个实验过程。

这4个实验过程的实验用房应相邻布置，组成一个独立的PCR实验区。标准的PCR实验区包括:试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区、各区配套的缓冲区及公共走廊。

某医院PCR实验室平面布局如图1所示，整个区域有一个公用走廊，每个独立实验区设有专门的缓冲区。通过压差控制，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染，并且降低扩增产物对人员和环境的污染。

图表1、某医院PCR实验室平面图

该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。

试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。

试剂准备区配备有2~8°C冰箱和-80°C冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。

房间的面积宜控制在15m2~20m2。本区的压力梯度要求为:相对正压状态，以防止外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染。

该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。

标本制备区配备有2~8°C冰箱和-20°C冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。在标本制备区，还需要配备生物安全柜，用于进行提取核酸的操作。

为避免提取的核酸在柜内反复循环，造成标本之间的交叉污染，出现假阳性结果，该区域配备的生物安全柜必须是B2型的。生物安全柜工作区垂直气流全部来自实验室，排风经过高效过滤器过滤后直接排至室外，不允许回到安全柜和实验室中。

根据经验，如果实验室内配备生物安全柜，每配备一台，