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特征不典型,抗酸染色弱,还能报诺卡菌吗?

归去来兮 2021-3-19 112人围观 技术

作者:王存洲

单位:西藏自治区东部八宿县人民医院检验科 




诺卡菌感染引发的疾病发生率较低,属于少见菌类。因其生长缓慢,生化反应不活泼,故对于基层医院主要根据染色形态和培养特性两方面来鉴别。因其与链霉菌属、放线菌属、拟诺卡菌属、红球菌属、分枝杆菌属以及一些棒杆菌具有相似特征,弱抗酸染色性为其重要的鉴别方法。且各属(甚至各属内不同种)之间在治疗方案上存在显著差异,故准确鉴定有其现实意义!


 


那弱抗酸染色都不特异了肿么办?


笔者近日就遇到了这么个现象,患者2020年12月于村医处就诊,行右侧臀部肌注药物治疗。其后一直感觉臀部不适,一月后不适加重,触及明显肿块,于2021年1月28日16时就诊于我院外科。既往有肺部结核感染与治疗史。就诊全程无发热症状,右侧臀部肿块区域与周边肉眼观察无明显异常,触诊可及皮下肿块伴液性包裹,皮温略疑似高于左侧(不能肯定)。


1

【血RT】WBC:10.12*109/L,NEU%:81.8%。

2

【生化】Cr:88umol/L,GLU:6.68mmol/L。

3

【感染类疾病筛查】HIV抗体阴性,梅毒抗体阴性,丙肝抗体阴性,乙肝五项中表面抗体阳性。


余未见异常!
 

上图血平板生长80h情况

上图巧克力平板生长80h情况





上两图分别挑取对两平板中单个菌落涂片,镜下形态相同如上。(10*100倍及局部)
 

上图对菌落用珠海贝索普通抗酸染液染色(脱色时间120秒)(10*100倍) 

上图对样本革兰氏染色(10*100倍)


 

上图对样本用珠海贝索普通抗酸染液脱色30秒染色:可见阳性丝团状菌。(10*100倍)

上图对样本用珠海贝索普通抗酸染液脱色120秒发现的一处丝状菌(10*100倍)。有调对比度和饱和度。



上图对样本用珠海贝索普通抗酸染色脱色60秒染色效果。(10*100倍局部放大)
 


从以上现象我们看到,平板中菌落并没有“咬琼脂”现象,菌落表面也没有褶皱,且其干燥程度也不似典型的诺卡菌那么干燥。仅原始区部分区域疑似有“绒毛状气生菌丝”。

 
菌落染色形态虽然革兰氏阴阳不定,且球杆状至杆状,甚至“垂直角”分枝状均可见,疑似诺卡菌;但正常普通抗酸染色也见有呈阳性的菌体。
 
样本直接涂片染色,发现丝团状菌体及串珠状细丝菌体,革兰染色阴阳不定,且有垂直角短链侧枝,这些也符合诺卡菌形态;但采用普通抗酸染液严格限制脱色时间发现,脱色60秒以上均可见呈阳性菌体,甚至脱色120秒仍然有呈弱阳性的完整菌体。
 
综上,虽然诺卡菌的概率比较大,可真能排除其它速生长分枝杆菌与其它放线菌?
 
笔者在请教一些老师的意见后,送上级医院请求帮助鉴定。后反馈,质谱鉴定为皮疽诺卡菌,但鉴定率不高!弱抗酸染色不典型!
 


在这里感谢海军特色医学中心李娜老师与四川省人民医院张欣两位老师的专业意见及指导,感谢西藏自治区人民医院检验科刘主任的帮助!



 
【参考资料】
[1] 陈东科,孙长贵.实用临床微生物学检验图谱.第1版[M].北京:人民卫生出版社,2011:289-293.
[2] 周庭银,章强强.临床微生物学诊断与图解(上册).第4版[M].上海:上海科学技术出版社,2019:262-271.
[3] 主译:胡必杰 潘珏 高晓东《哈里森感染病学》中文第一版


来自: 检验医学网 | 作者:王存洲
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