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检验人必知:金标定量检测仪常见问题处理方法总结

归去来兮 2020-12-9 87人围观 技术







1、开机后屏幕出现“ERROR,READUSTING”自动定标不能完成,按任何键关机,仪器不能进入测试程序如何处理?

这是由于测定笔圈使用时间过长,产生漏光所致,更换检测笔的笔尖笔圈后,进入“options”菜单下的 “New White”程序,反复检测三至五次,通常即可解决。

2、屏幕持续出现“Battery low”的提示如何解决?

这是电力不足的提示:可插上充电器进行充电,但不要长期充电。

查看充电线路是否通畅;打开仪器后盖板,观察电池是否完好,连接是否正常,必要时更换新的充电电池(2A,1.2V充电电池)

3、Nycocard金标仪测定试剂储存有那些要求?

未开封试剂盒于2-8℃暗处保存,避免冰冻。

试剂盒开封后,HbA1c反应板,R2洗涤液置于15-25℃保存;CRP R1、R3试剂和U-Albumin R1、R3试剂置于2-25℃保存;

需2-8℃保存的试剂:HbA1c R1试剂,D-二聚体全套试剂,CRP、尿微反应板,尿微R2试剂和胶体金缀合物;

需平衡至室温后应用的试剂:HbA1c、D-二聚体、CRP反应板、D-二聚体全套试剂、尿微R1稀释液。

4、Nycocard金标仪检测的标本要求:

HbA1c:加抗凝剂或不加抗凝剂(EDTA、肝素和NAF)末梢血和静脉血均可。随时可采血、不受空腹用药影响。待测血样不溶血2-8℃可储存10天,但不能冰冻。

D-dimer:用0.11M(即3.28%)柠檬酸钠:血为1:9进行抗凝,立即离心,15-20分钟,血样最长不能超过6h,小心吸取无白细胞、血小板血浆;24小时内进行测定。亦可-20℃保存,4周内再测定须37℃15分钟复溶。

U-Albumin:尿液标本-20℃冰冻标本可稳定保存12周,但不可反复冻溶。已用R1稀释的尿标本,可再冰箱或室温(2-25℃)稳定保存14天。

CRP:全血(含抗凝剂)或血清、血浆2-8℃可保存3天。血清或血浆-20℃冰冻保存可使检测结果相对稳定。但是已用R1稀释的血清标本放置时间不超过1小时,加EDTA抗凝的全血或血浆稀释标本不超过15分钟。

5、Nycocard金标定量仪定量测定操作中共同的注意事项:

不同批号的试剂不要交叉使用。不要用吸管头或手接触滤膜,以免触破或污染。使用吸管的每一步骤,均应更换吸管头。加样或试剂到反应板时,吸管头应离反应孔0.5-1.0cm,垂直滴于反应孔中间,待溶液渗滤完后再加第二个试剂,操作不能停顿。加样应避免气泡,气泡可形成白色圈影响比色。操作步骤完成后立即用仪器测定,过时超过5分钟反应圆孔内滤膜干燥、收缩、褶皱不平,引起读数结果误差。

6、Nycocard金标定量仪四个项目的质控品:

CRP:阳性质控品:包装:1×0.5ml。纯化的CRP人血清,检测时请在CRP serum/plasma程序下进行测定。

D-dimer:质控品包装1×1ml;每瓶含量见瓶签

U-Albumin:应用国际尿液标准CRM470(IFCC/BCR/CAP参照品)进行定标;(另配,不随试剂盒)

HbA1c:质控品由于时全血制品,不易保存不随试剂盒,需另配。

上述各项质控品含量以每批标签标注为准!

 7、衡量是否是渗滤减慢首先了解加样于反应板时出现渗滤速慢的常见原因及处理?

正常时参考滤速(秒),见下表:

 项目

 第一步

 第二步

 第三步

 第四步

 HbA1c

 15-20"

 10"



 CRP

 30"

 20" 

 20"


 D-Dimer

 45"

 45"

 45"

 45"

 U-Albumin

 50"

 50"

 50"


渗滤速度减慢的常见原因:

 反应板储存中受潮。

 冰箱中取出反应板未平衡至室温15-25℃即开始操作。

溶血不完全。

测D-Dimer时,血浆标本离心不够,血浆中含细胞,血小板导致堵塞反应膜。

CRP测定时白细胞过高。

U-Albumin、尿中含有尿酸盐类导致堵孔,应离心去除。

8、HbA1c检测的标准化问题:

目前国际上 HbA1c检测最主要的问题就是缺乏一个能被广泛认可的标准化方案。特别是由于血红蛋白有多种变体,而目前没有给分析对象做出一个明确的定义。为了结束这种状况,国际标准化委员会(IFCC)HbA1c标准化工作明确定以[β-N-(1-脱氧果糖基)血红蛋白]作为测定的标准对象。

在没有建立一个科学、合理的参考系统之前,美国临床化学协会(AACC)糖化血红蛋白标准分会和IFCC HbA1c标准化工作组建议以美国糖尿病控制和并发症调查协会(DCCT diabetes control and complication trial)研究中所用的方法作为指定的比较方法(Designated comparison method)。DCCT用Bio-Rad公司的DiamatTM HPLC作为HbA1c的测定方法,但也不是一个广泛认可的“金标准”。但目前各国生产HbA1c测定仪的实验方法,均应参照指定的比较方法。与其他型号的仪器对照,实现相对的标准化,凡仪器技术参数中标有“DCCT Standardised”,说明该仪器已参照DCCT要求。

 9、屏幕显示“above/below unit”表示什么意思,如何处理?

 现上述提示表示测定标本高于/低于**单位;检测结果超出其测量范围。

 各项目检测范围如下:CRP: 全血8-250mg/L,血清或血浆5-150 mg/L,高于检测范围时,可用二管稀释液或标本量减少一半结果乘以2。D-Dimer: 0.1-20 mg/L,高于测定最高量程可用试剂盒R2洗涤液稀释标本。U-Albumin: 5-200 mg/L高于检测范围时减少标本量,用25μl尿,结果乘以2。HbA1c:3-18%,一般不用稀释,因为HbA1c18%已经相当于平均血糖水平480-500mg/dl。超过上述范围,可出现上述符号;可进行加量或稀释处理后测定。

 10、HbA1c测定时屏幕显示“Hb conc too low”意义及处理:

 该显示表示Hb浓度太低,样品中Hb浓度低于60克/L的范围,可用10μl全血加在各稀释管中振摇,仪器将显示正确结果。此外,Hb浓度位于正常范围,标本加于稀释管中时,未彻底振摇,血液凝固在毛细管中,亦可出现上述提示。

 11、HbA1c测定时屏幕显示“Reduce Hb Conc”意义及处理:

(1)该显示表示样品中Hb浓度大于180克/L,应通过稀释降低血红蛋白的浓度。解决办法:如确定Hb过高,可用2管400μl稀释液加5μl血液或是吸2/3毛细管血加到稀释管中。

(2)此外血液在稀释液中未彻底振摇,红细胞破坏不完全,渗滤不好,染色不充分,引起反应板红色偏高。校正方法:血样加到稀释管中应彻底振摇,振幅每秒3-4次,放置2-3分钟,冬季可再适当延长。

 12、部分病人血糖正常,但HbA1c结果较正常高0.1-0.6%,如何解释?

 Nycocard HbA1c正常人参考值4.5-6.3%,部分病人血糖正常,而HbA1c略高于正常值0.1-0.6%的水平,这种情况可能原因是:

 空腹血糖是即时指标,只能反映病人当时血糖情况,受饮食、用药、空腹时间等多种因素影响,个别糖尿病人有时亦可正常。

 糖尿病的形成也是个循序渐进的过程,出现这种正常高值可能是糖尿病前期较早期的预兆。

 HbA1c能反映2个月来,糖代谢的总体情况和整体观察指标,发生变化的时间及其敏感性要早于血糖。

 出现上述情况,临床上虽不能诊断为糖尿病,但应提醒病人,注意饮食控制,运动并定期随访观察。

 13、白细胞增高为什么会影响CRP水平?

 很高的白细胞可引起溶血不完全,(包括少部分肝胆病人红细胞异常溶血不完全者)。由于标本通过滤膜时部分堵塞了细孔,反应物全滞留在表面,可以引起假阳性结果升高。稀释血清、血浆和全血一样正常滤速为20-30秒。

 WBC、35×109/L,渗滤时间轻微延长,但CRP结果无意义。

 建议用离心法,澄清的血清、血浆标本检测结果较全血更为满意。

 14、尿微量白蛋白(U-Albumin),换算成μg/min排泄率的计算

 μg/min=(尿微浓度mg/L×尿液总量(ml)÷收集总量时间(分钟)

 则30×1200÷(24×60)=25μg/min

 15、尿微量白蛋白测定主要影响因素及处理:

 尿标本预处理不好,尿酸盐等物质应在加样前离心或过滤,尿中有RBC,当血红蛋白大于0.5mg/L时,血中的人血清白蛋白引起U-Albumin的假性增高。

 16、D-二聚体假性(非病理性)增高的原因及处理:

未彻底离心,血浆中含有血细胞,PLT,高脂或高粘血浆,导致渗滤不好,上述物质滞留在膜表面,可导致假阳性高值。

处理方法:4000转离心15分以上,小心吸取血浆。

来自: 体外诊断POCT论坛 | 作者:风尘男土
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