狼疮抗凝物（LA）检测

狼疮抗凝物质（LA）是一种自身抗体，首先在系统性红斑狼疮患者中发现，因此命名，但却不是系统性红斑狼疮的诊断学试验。持续的LA阳性患者被认为有较高的血栓形成和复发风险，也是不明原因习惯性流产，尤其是怀孕中后期的流产、死胎、易栓性疾病及某些自身免疫性疾病的危险信号。

1.LA是什么？   

LA是一种针对负电荷磷脂的自身抗体，是抗磷脂抗体的一种，与抗心磷脂抗体和抗β-2糖蛋白I型抗体共同可引起抗磷脂综合征。其本质是一种蛋白质，多数为IgG，少数为IgM。

 2.检测方法？

（1）筛查试验：稀释蝰蛇毒时间试验(dRVVT)的原理是在待测血浆中加入激活剂蝰蛇毒和钙离子，蝰蛇毒可直接活化凝血因子X，使血液凝固。若待测血浆中存在LA，则凝固时间延长。该试验是证明LA存在的特异且简便的检测手段。ISTH将LA的筛查试验限定为dRVVT和APTT(低磷脂浓度)。CLSI指南中推荐dRVVT和APTT'作为LAC的一线筛查试验，但不排斥使用其他检测方法。BCSH指南同样推荐dRVVT和其他任一检测方法组合用于LA的筛查等。

（2）混合纠正试验：在排除标本中肝素和类肝素物质存在的前提下，通过用正常

混合血浆与待测血浆采用1：1的比例混合，观察延长的APTT是否被纠正。若不能被纠正，证明可能存在LA。

（3）确认试验：基本原理是通过增加磷脂浓度以抵消LA的抗凝作用。当待测血浆中存在LA时，在增加磷脂浓度后血浆凝固时间缩短；相反，若存在其他凝血因子抑制物，则凝固时间不会被纠正。

（4）复合试验：是指对每个患者同时进行筛查试验(低浓度磷脂试剂)和确认试验(高浓度磷脂试剂)，然后计算凝血时间纠正百分比[凝血时间纠正百分比=(筛查试验比值一确认试验比值)／筛查试验比值×100％]或筛查试验比值／确认试验比值的比值(即标准化LA比值)。复合试验的优势在于检测低浓度的LA，此时患者凝血时间延长可能不明显，但通过筛查试验和确认试验的比值差异却可反映出LA的存在。

3.对标本采集的要求？ 

采集前臂静脉血，使用枸橼酸盐抗凝试管采集血液标本，离心后分离血浆进行检测。采集的血液标本量必须适合，且不能出现凝集。将血液标本正确离心后，待测的血浆样本中已去除大部分血小板。若血浆样本存在较多的血小板，就不能进行检测（因为血小板中富含磷脂）。同样，所以若患者红细胞压积很高，检测结果会受到影响。

4.试验注意事项？

（1）LA筛查试验异常时，需要进行确认试验。对于单独的APTT延长，如果仅进行混合纠正试验，可能导致假阴性结果。

（2）确认试验仍然存在一些缺点，首先含肝素或类肝素血浆会表现出LA样抗凝作用，建议通过凝血酶时间(TT)来排除肝素的存在或者如果有可能，应在开始抗凝治疗之前进行狼疮抗凝物检测；其次，除狼疮抗凝物检测外，如有必要可进行凝血因子VIII的检测。VIII因子抑制剂（针对VIII因子的特异性抗体）会降低VIII因子水平并导致狼疮抗凝物检测假阳性。急性感染或甲型血友病替代治疗的患者会出现VIII因子水平升高，引起APTT时间缩短，导致狼疮抗凝物检测暂时的假阴性。。

（3）混合纠正试验结果有助于区分患者凝血异常是仅由LA或其他凝血异常导致，抑或是两者皆有。

4.临床意义？

（1）狼疮抗凝物检测用以辅助判断无法解释的血栓形成、习惯性流产或APTT延长的原因。它可以帮助判断APTT延长是由于特异性抑制物存在还是非特异性的抑制物（例如狼疮抗凝物）存在而引起。

（2）它可以和抗心磷脂抗体、抗β-2糖蛋白I型抗体同时检测来诊断抗磷脂综合征。（3）如果狼疮抗凝物检测结果阳性，需在几周后复查以观察抗体是否只是短期存在。有时狼疮抗凝物检测也能帮助解释梅毒VDRL/RPR检测阳性的原因（抗心磷脂抗体和狼疮抗凝物都会导致试验假阳性）。