NGS丨一文读懂磁珠法核酸提取

归去来兮 2024-5-29 11:03 AM 352人围观技术

磁珠法（磁性纳米颗粒吸附法）的基本原理是利用表面标记了一种官能团的纳米级磁性微珠（磁珠），官能团能与核酸吸附，但不会与蛋白质等杂质吸附，同时，磁珠可以在外部磁场的作用下聚集和分散，完成混合、移液、清洗步骤，从而实现将核酸与杂质分离的目的，之后将核酸物质从洗脱液中释放，最终完成核酸的提取。

具体而言，磁珠（即磁性纳米颗粒）通常以表面富含带正电荷化学基团的FeSO2或Fe3SO4制备。
在经过裂解的混合液中加入磁珠，当液体环境为偏酸性(PH5.0)时，游离的DNA分子被吸附到磁珠上。
此时利用磁场将磁珠固定，将磁珠与液体分离而弃除杂质，同时反复洗涤多次，可除去磁珠表面附着的其他物质。
在洗涤后的磁珠中加入偏碱性(PH8.0)的TE缓冲液(Tris-EDTA buffer solution)或磷酸缓冲液(Phosphate Buffer，PB)中，即可将磁珠与DNA分离，从而得到纯化的基因组DNA溶液。

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来源: 健康守望角

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