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NGS丨一文读懂磁珠法核酸提取

归去来兮 2024-5-29 11:03 AM 150人围观 技术



磁珠法(磁性纳米颗粒吸附法)的基本原理是利用表面标记了一种官能团的纳米级磁性微珠(磁珠),官能团能与核酸吸附,但不会与蛋白质等杂质吸附,同时,磁珠可以在外部磁场的作用下聚集和分散,完成混合、移液、清洗步骤,从而实现将核酸与杂质分目的,之后将核酸物质从洗脱液中释放,最终完成核酸的提取。


  • 具体而言,磁珠(即磁性纳米颗粒)通常以表面富含带正电荷化学基团的FeSO2或Fe3SO4制备。

  • 在经过裂解的混合液中加入磁珠,当液体环境为偏酸性(PH5.0)时,游离的DNA分子被吸附到磁珠上。

  • 此时利用磁场将磁珠固定,将磁珠与液体分离而弃除杂质,同时反复洗涤多次,可除去磁珠表面附着的其他物质。

  • 在洗涤后的磁珠中加入偏碱性(PH8.0)的TE缓冲液(Tris-EDTA buffer solution)或磷酸缓冲液(Phosphate Buffer,PB)中,即可将磁珠与DNA分离,从而得到纯化的基因组DNA溶液。








来源: 健康守望角
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