植绒拭子和棉拭子对抗体检测的影响研究

    导语：近期中国动物疫病预防控制中心发布了《养殖场非洲猪瘟病毒弱毒株防控技术指南》，指南中提到“采样要使用聚丙烯材质拭子，避免使用头部为棉花制品的拭子、含海藻酸钙拭子以及木柄拭子”，详见《养殖场非洲猪瘟病毒弱毒株防控技术指南》的使用说明。原博士曾在病毒采样拭子的评估试验初探 文章中通过实验对不同材质的拭子对核酸检测的影响进行了评估，实验表明植绒材质的拭子更适合用于核酸检测。但是，不同材质的拭子对抗体采样检测有什么影响呢？鸣捷生物左总的团队开展了不同材质的拭子对抗体检测影响的实验，现分享给大家：

    采样作为检测的第一个环节，采样质量的好坏直接影响检测结果的准确性，在原博士的研究中表示植绒拭子在核酸检测的病毒释放率和稳定性上均优于棉签拭子，但是对于抗体检测实验中是否也有类似的情况，尚不清晰。本文通过吸水量及抗体释放率两项指标对比了植绒拭子和棉拭子在不同情况下对抗体检测结果的影响，使用上海鸣捷生物高灵敏非洲猪瘟病毒抗体双抗原夹心法检测试剂盒X3检测溶液中的抗体含量，来确定抗体释放水平的高低，检测值越高，代表抗体释放越多。其结果如下：

1.吸水量

    吸水量体现的是不同材质的拭子的吸水能力，通常吸水能力越强越好。本实验选择一份背景清晰的非瘟阳性的血清分成两份，将不同材质的拭子在相同体积的血清中充分浸泡，然后拿出拭子计算每种拭子的吸水量。

试验结果：棉签>植绒（与原博士结果一致）。

表1 植绒及棉拭子吸水量对比

    讨论：由于两种拭子的拭子头大小不一样，棉签的头比较大所以吸水量也比较大，应该在相同大小的拭子头下进行评估会更准确，但是每个厂家生产出来的本身就是大小不一，因此在选择采样工具时，本试验结果仍具有参考性。

2.抗体释放率

    抗体释放率体现的是不同材质的拭子吸附抗体后的释放效率，抗体释放率越高，采样获得的抗体越多。考虑到临床采样的多样性，本次试验对比了拭子完全湿润的情况下和固定上样量情况下，两种拭子的抗体释放率以及模拟了采样后加保存液和不加保存液运输或干燥后运输的情况下的抗体释放率，以期为后期临床抗体检测的采样运输环节提供参考。

2.1完全浸润的抗体释放率

    本试验在相同体积的血清中分别加入两种拭子，使其充分浸泡吸取血清后，两种拭子放入另一个等体积的稀释液中浸泡并震荡，充分混匀后使用上海鸣捷生物高灵敏非洲猪瘟病毒抗体双抗原夹心法检测试剂盒X3检测溶液中的抗体含量。

    试验结果：完全浸润情况下抗体释放率：植绒＞棉签拭子。

表2 植绒及棉拭子完全浸润下抗体释放情况

    讨论：虽然棉签的吸水量是植绒的1.3倍左右（原博士结果1.5倍），但是释放结果上植绒好于棉签，后续试验评估了相同吸水量的情况下抗体释放率。

2.2 固定上样量情况下的抗体释放率

    本试验将同一份血清取100 ul中分别滴到两种拭子上，待两种拭子都充分吸取血清后，将两种拭子放入另一个等体积的稀释液中浸泡震荡，充分混匀后使用上海鸣捷生物高灵敏非洲猪瘟病毒抗体双抗原夹心法检测试剂盒X3检测溶液中的抗体含量。

试验结果：同一上样量情况下抗体释放率：植绒略好于棉签拭子。

表3 植绒及棉拭子固定上样量的抗体释放情况

    讨论：由于该组实验是在加样之后直接就放入稀释液中浸泡，此时植绒拭子的抗体滴度略好于棉拭子，但可能不能完全模拟临床的情况，因此后续试验模拟了不同运输条件下的抗体释放率。

2.3 保存液运输条件下及干燥运输条件下的抗体释放率对比
    本试验分为两组，第一组待两种拭子充分吸取血清后放入等体积稀释液中运输，第二组待两种拭子充分吸取血清后放入空EP管运输，运输时长为3小时，常温运输，收到样本后充分涡旋震荡，瞬离后使用上海鸣捷生物高灵敏非洲猪瘟病毒抗体双抗原夹心法检测试剂盒X3检测溶液中的抗体含量。

    试验结果：保存液运输条件下：植绒>棉签；干燥运输条件下：棉签＞植绒。

表4 植绒及棉拭子不同运输条件下的抗体释放情况

    讨论：本试验模拟临床上血拭子样本运输条件对比了不同采样材质和运输条件下的抗体释放率，结果显示在湿润条件下运输植绒的抗体释放率好于棉签拭子，但是在干燥运输条件下，由于棉签吸水量更大，承载的抗体更多，在干燥条件下运输更不容易挥发和损失，可能导致检测结果高于植绒拭子，但是本次实验因为条件限制未能充分对比两种拭子采样完全干燥后的抗体释放率，后续补充了这一块的内容。

2.4 干燥条件下的抗体释放率

    本试验分为两组，第一组对比充分浸润的两种拭子干燥后的抗体释放率，第二组对比同一上样量下（100 ul）两种拭子干燥后的抗体释放率，所有拭子干燥后用同一稀释液浸泡5min使之充分释放，同时设置对照组，即100 ul原液加500 ul稀释液比较干燥后的抗体检测值是否会受到较大影响，所有结果使用上海鸣捷生物高灵敏非洲猪瘟病毒抗体双抗原夹心法检测试剂盒X3检测，结果如下。

    试验结果：干燥后抗体释放率：植绒>棉签。

表4 植绒及棉拭子干燥后的抗体释放情况

    讨论：本试验模拟临床上血拭子干燥后运输，到实验室再处理的场景，结果显示，无论是充分浸润还是固定上样量条件下，彻底风干后（本实验风干耗时2天） 植绒拭子的抗体释放率都明显优于棉拭子。此外，本结果中100 ul血清直接稀释的结果和100 ul血清利用植绒作为载体运输的结果差异不大，也说明植绒在临床是非常好的采样载体。

  总结，原博士核酸释放率试验结果及本试验抗体释放率结果表明，在临床采样中植绒拭子相对于棉签拭子更有利于提高检出率。但是由于植绒拭子较棉签拭子成本更高，临床需要根据实际情况选择合适的采样拭子。

    鸣捷生物为临床非瘟抗体检测特地研发了一款适合于尾根血拭子检测非瘟抗体的试剂盒高灵敏非洲猪瘟病毒抗体双抗原夹心法检测试剂盒X3，相对于普通试剂盒能够极其显著的提高临床复杂毒株感染的检出率。

附：

高灵敏非洲猪瘟病毒抗体双抗原夹心法检测试剂盒X3抗体解读如下：

本文由鸣捷生物投稿，本公众号不对文中的数据和结论负责。