找回密码
 立即注册

QQ登录

只需一步,快速开始

  • QQ空间
  • 回复
  • 收藏

两台生化仪肌酐结果相差6倍多,万万想不到是“它”惹的祸…… ...

归去来兮 2023-4-20 04:47 PM 396人围观 技术

作者: 蒋晓军[1]王振逸[2]

单位:[1]邵阳学院附属第一医院 [2]迈瑞医疗临床应用部

  


肌酐(Creatinine,Crea)是肌酸代谢的终产物,尿素(Urea)是人体蛋白质代谢终产物,正常情况下血清中Urea与Crea的比值在一定范围内波动,当比值显著异常时需排除可能干扰,谨慎审核Crea或Urea中的异常结果。



在实验室结果审核中,发现一例两者严重不成比例且Crea结果和患者临床实际情况完全不符合的病例,经过原因排查发现竟是M蛋白的干扰。以下是本次案例详细分析及处理过程。


案例介绍


患者,男,65岁。


主诉近一周血糖控制不佳。


现病史近五日每日空腹手指血糖平均在8.5mmol/L,一直规律服用格列美脲滴丸,控制血糖不佳,为求进一步治疗来我院内分泌门诊检查。患者神志清,精神好,尿量正常,无腹部不适,无恶心呕吐,体重无明显变化。


既往史平素体健,糖尿病三年。


辅助检查】肝胆脾肾B超正常,空腹生化结果GLU 9.11mmol/L↑,HbA1C 7.0%↑,球蛋白 44.3g/L↑,β2-MG 3.1mg/L↑,CysC 1.36mg/L↑,Crea和Urea见下表1,门诊生化均源自A系统(某进口品牌生化仪+国产试剂),根据患者现病史、检验检查结果及就诊医生反馈,患者肾功能轻度受损,不存在急慢性肾衰竭的诱因和症状。通过Lis系统查询患者半月前两项结果完全正常。


为什么Crea结果短期内迅速升高?先排除标本问题,确认无纤维蛋白、无溶血脂血、无凝块干扰。再次用A系统重测,与原结果一致。当日改用病房生化B系统(迈瑞配套系统)复检两个项目,结果见下表1。令人惊讶的是:前后两系统Crea结果相差竟达到6倍多。


表1


问题分析


究竟什么原因导致A和B系统结果出现如此大的差异?我们分别查看两系统反应曲线变化情况,见下图1和图2:


图1 A系统反应曲线

图2 B系统反应曲线



从两系统反应曲线中可以看出差异,A系统加入试剂2后副波长吸光度明显升高,说明可能存在干扰,而B系统副波长并未出现抬高现象。

为进一步验证是否是A系统存在干扰,分别将A系统R1、R2试剂和B系统R1、R2试剂混合在两个样品管中,依次记录为第1-2管,按照生化反应的比例加入等量患者血清后发现:第1管外观明显混浊,第2外观无变化。

为什么患者血清在加入A系统试剂后会出现混浊现象呢?先依次排除仪器和试剂问题:A系统仪器是1年前刚装机,平时质控和维护保养正常,仪器状态良好,翻看试剂说明书原成分并没有更换升级。有没有可能是药物引起的干扰?


病史记载患者近半月未曾增加新药物,Crea既往检测从未出现结果异常的情况。再看看患者自身特异性问题,分析一下内源性干扰相关的实验室检查结果:RF 6.2IU/ml,特定蛋白IgM 28.8g/L↑,血清蛋白电泳查见M蛋白,免疫固定电泳可见IgM-κ型免疫球蛋白异常升高,见下图3和图4。


图3 血清蛋白电泳

图4 免疫固定电泳



结合患者的骨髓涂片和病理检查,最终诊断多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)。综合分析该患者检验结果,怀疑酶法Crea升高受到M蛋白干扰。


M蛋白究竟何物?M蛋白是B淋巴细胞单克隆恶性增殖产生的一种异常免疫球蛋白[1],“M蛋白血症”又称为单克隆免疫球蛋白血症,最常出现在MM患者中。


MM常见症状包括高血钙、肾功能损害、贫血、病理性骨折,以及免疫力下降反复细菌感染、高粘滞血症等多种临床表现[2]首发症状和体征多样性导致误诊率高于54%[3],因此M蛋白血症容易被临床工作人员所忽略。


据文献记载M蛋白血症对生化免疫反应的干扰常较为严重,检测结果会出现异常高值或异常负值的情况[4, 5],且不同类型的M蛋白对不同厂商试剂产生的影响程度不一,干扰可呈现正性或是负性,更严重的是在毫不知情的情况下发出错误报告。


为什么Crea酶法试剂盒易受到M蛋白的干扰呢?M蛋白干扰反应的机制是其易在反应体系中析出,引起浊度和吸光度的异常。


当M蛋白遇到A系统时,结果异常可能来自如下三方面的响:


1、该蛋白可能干扰反应原理本身;


2、该蛋白在不同缓冲体系、离子强度等条件下溶解状态不同,在达到该免疫球蛋白的等电点后,免疫球蛋白溶解度下降,出现检测过程中吸光度变化;


3、样本状态:高浓度免疫球蛋白血清黏度高甚至形成小凝块,吸样误差增大甚至无法吸样。


  

当遇到B系统时,我们在查看其厂家试剂说明书,同时与厂家人员进行沟通了解后发现:迈瑞Crea酶法试剂优化后的配方中含有了特异性球蛋白增溶剂,可有效提升球蛋白在反应体系中的溶解度,故未见沉淀。


处理方法


鉴于M蛋白干扰临床样本检测的问题,我们在日常工作中总结出如下处理方法:


1、稀释重测:可以用仪器自动稀释重测,选用试剂说明书建议的最佳稀释倍数,稀释重测会一定程度降低干扰影响;


2、改变检测方法学重测:选用干式生化分析仪检测,干化学法试剂干片采用多涂层薄膜技术,样本穿过扩散层到达反应层,可截留大分子干扰物质,降低部分M蛋白的干扰;


3、更换抗干扰能力更强的试剂;


4、用沉淀法或超滤法对标本进行前处理[6]:通过聚乙二醇(和患者血清比例按照1:1)沉淀蛋白,经10000rpm 10min离心后取上清进行测定,测定结果乘以2倍稀释倍数得到最终浓度。


临床建议


实验室处理异常结果的能力是否完善,直接关系到实验室的报告质量。为规避异常结果的错误发出,日常复核异常结果时需熟悉仪器的异常反应曲线,完善本实验室的生化复核标准(如利用Urea和Crea比例显著异常)。此外还应结合患者病史、临床症状体征和其他检查结果作出综合分析,才能拥有发现异常数据的能力,找到问题背后的真相。


在临床生化检验工作中总结出不同厂商试剂的局限性,在几种检测系统结果出现显著差异时,选择合适的仪器和试剂将干扰降到最低,才能真正提高检验结果的质量。



作者介绍

    


蒋晓军
邵阳学院附属第一医院

主任技师,党支部副书记兼检验科副主任,负责科室新项目的开展立项及技术支持工作,科室质量管理工作。长期从事临床生化研究,对血脂类等项目性能评估、临床解读、学术研究颇有造诣。多次被医院评为优秀共产党员,医德医风先进个人,先进工作者。


参考文献

[1] 张柳芸,向云会,李艳英,张娟.M蛋白在多发性骨髓瘤与淋巴瘤中的临床作用[J].中国实验血液学杂志,2022,30(04):1281-1285 

[2] 中国医师协会血液科医师分会,中华医学会血液学分会.中国多发性骨髓瘤诊治指南(2022年修订)[J].中华内科杂志,2022,61(5):480-487 .

[3] Padelli M, Capaldo C, Chauvet J, Leven C, Maguet H, Dolphin S, Blasco H, Carré JL. Sensitivity of Capillary Electrophoresis to Detect Monoclonal Immunoglobulins: a Report of Two Cases and a Systematic Review. Clin Lab. 2021 Jul 1;67(7) .

[4] 韩建华,程歆琦,吴洁,等. M蛋白对免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测免疫球蛋白的干扰[J]. 检验医学,2019,34(3):197-201 .

[5] 李鹏昌,程歆琦,苏薇,等. 高单克隆IgG对无机磷检测干扰的解除[J]. 临床检验杂志,2016,34(6):477-478 .

[6] Chakraborty S,Sen S,Gupta D.Spurious hyperphosphatemia in a case of multiple myeloma[J].Ind J Clin Biochem,2014,29(2):250-252 .

编辑:小冉 审校:yeah

来源: 检验医学网
我有话说......