不同生化血清非定值质控品性能的应用评估

在全面质量管理体系中，实验室内质量控制是一个重要环节，而质控品是保证质控工作的重要物质基础。ISO 15189认可要求和美国临床实验室标准化协会（Clinical andLaboratory Standards Institute，CLSI）发布的CLSI C24文件，都建议临床实验室优先考虑选择独立于检测系统之外的第三方质控品^[1,2]。但是，目前我国临床实验室所用的独立第三方质控品大多为国外品，存在诸多问题。因此，研发可以满足不同方法学、不同检测系统且互换性好的我国生化质控品已成为一个必需的发展方向。本研究以我国Pretrol^®生化非定值质控品作为对象，对该质控品的瓶间差、开瓶稳定性及互换性进行评估，以验证该质控品在日常临床检验科室内质控应用的可行性^[3]。

一、材料

1．生化非定值质控品：（1）Pretrol^®生化非定值质控品（上海昆涞生物科技有限公司生产），货号分别为水平1（581-1）、水平2（581-2），按要求复溶后取0.5 ml分装于洁净的Eppendoff管（微量离心管）中。按照不同的实验方案于2~8 ℃或者-30 ℃冰箱保存。（2）伯乐生化非定值质控品（美国伯乐生命医学产品有限公司生产），货号分别为水平1（694）、水平2（696），按要求复溶后取0.5 ml分装于洁净的Eppendoff管（微量离心管）中。按照不同的实验方案于2~8 ℃或者-30 ℃冰箱保存。

2．于2016年5月在华山医院北院检验科分别选取各项目覆盖线性范围的高、中、低值患者血清样本，分离血清于洁净的Eppendoff管中，置2~8 ℃冰箱中保存，于1周内完成检测。

二、评价项目

钾（K）、钠（NA）、磷（P）、胆固醇（CHOL）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷丙转氨酶（ALT）、γ-谷氨酰氨基转移酶（GGT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、淀粉酶（AMY）、总胆红素（TBIL）、葡萄糖（GLU）。

三、仪器与试剂

罗氏Cobas 8000全自动化学分析仪及罗氏配套原装试剂盒、日立7600全自动化学分析仪及罗氏配套原装试剂盒、西门子ADVIA 2400全自动化学分析仪及西门子配套原装试剂盒。

四、质控复溶方法

严格按照厂商说明书要求操作，在室温15~25 ℃、无空气流通、无阳光直射的环境下，打开瓶盖，并将瓶盖朝上，以便防止瓶盖附着的粉末洒出。再取定量吸管，吸取5 ml符合质量要求的去离子水，从内侧瓶口沿瓶壁缓慢加入瓶内。之后，盖上瓶盖，静置约20min，使瓶内的冻干粉末缓慢溶解，期间轻轻晃动质控品瓶5~10次。并倒置质控品瓶后，静置约5 min，使瓶盖上的粉末也充分溶解。最后，将质控品瓶慢慢旋转混匀10次，以确保瓶内的冻干粉末充分混匀。

五、评价方法

1．瓶间差：

取生化非定值质控品L1、L2各10瓶，按要求复溶质控品，每瓶测定1次，计算其均值和标准差，作为批间均值（批间）和批间不精密度（SD批间）。并且，该批间不精密度包含批内不精密以及瓶间差^[4]。同时取L1、L2各1瓶质控品连续测定10次，计算其结果的均值和标准差，作为批内均值（批内）和批内不精密度（SD批内）。通过批间不精密度及批内不精密度，可计算得出瓶间差，计算公式^[5]如下：

若SD批间小于SD批内，则CV瓶间为0。

2．开瓶稳定性：

按照厂商说明书要求复溶、分装，并分别在2~8 ℃条件下保存7 d及-20 ℃条件下保存30 d。每天检测2次，分别计算2~8℃连续7 d的均值（₁）和标准差（SD₁）以及-20 ℃连续30 d的均值（₂）和标准差（SD₂）^[6]。

3．互换性：

取覆盖线性范围的高、中、低值患者样本分别于上海华山医院北院、上海仁济医院及上海同仁医院进行检测。每个样本测3次，以上海华山医院北院的数据作为基准，分别计算出上海仁济医院和上海同仁医院对各个评价项目的回归方程y_北院=ax_仁济+b（y_北院是上海华山医院北院数据，x_仁济是上海仁济医院数据）和y_北院=ax_同仁+b（y_北院是上海华山医院北院数据，x_同仁是上海同仁医院数据），求得a、b，用于消除不同医院间检测结果间的系统误差。分别取Pretrol^®生化非定值质控品与伯乐生化非定值质控品的高值和低值质控品，分别在3家医院与标本一样的条件下检测。每个样本测3次，取均值。上海华山医院北院的结果直接记录_p1和_q1，即Pretrol^®生化非定值质控品与伯乐生化非定值质控品的检测均值。Pretrol^®生化非定值质控品与伯乐生化非定值质控品在上海仁济医院及上海同仁医院的检测结果通过上面的回归方程计算出均值的校正值记录为_p2、_q2以_p3和_q3。计算Pretrol^®生化非定值质控品与伯乐生化非定值质控品在3家医院检测结果的CV值，分别记录为CV_p和CV_q，比较大小。

一、瓶间差

各项目瓶间差不精密度应符合WS/T 403-2012内规定的CV%要求。检测结果及评判要求见表1。Pretrol^®生化非定值质控品各项目瓶间差均符合要求。

表1 Pretrol^®生化非定值质控品各项目瓶间差

二、开瓶稳定性

质控品复溶、分装后，在2~8 ℃条件保存7 d及-20℃条件下保存30 d，各评价项目的变异系数（CV）应符合WS/T 403-2012内规定的CV%要求。检测结果及评判要求见表2。Pretrol^®生化非定值质控品各项目无论在2~8 ℃条件保存7 d及-20℃条件下保存30 d，连续检测的CV均符合要求。

表2 Pretrol^®生化非定值质控品各项目开瓶稳定性结果

三、互换性

比较两种质控品的CV_p和CV_q的大小，较小的互换性较优。除了GGT、AST、ALB、LDH的2水平以及ALT的1水平CV_q<CV_p之外，其余项目的两个水平CV_P<CV_q，即Pretrol^®生化非定值质控品比伯乐生化非定值质控品的互换性更优。结果见表3。

表3 Pretrol^®生化非定值质控品与伯乐生化非定值质控品的互换性比较

有研究数据表明，接近80%的医疗决策依赖于临床实验室的检查结果^[7]。严格执行监管和认可的质控要求是临床实验室保证检测结果可靠性和时效性的重要途径，而这需要借助于合适的质控品。国际临床化学和实验室医学联盟（International Federation of Clinical Chemistry and LaboratoryMedicine，IFCC）对质控品的定义是专门用于质量控制目的的样本或溶液。临床实验室选设置质控是为了检测、减少以及纠正发送患者报告之前的实验室内部分析过程中的有关不足。质控样本是加入到检测过程中的特殊样本，并且被当作是暴露于同样的操作环境中的患者标本来看待。质控材料需要具备以下特征：拥有与患者样本相同的基质