凝血酶激活的纤溶抑制物（TAFI）检测的临床意义

凝血酶激活的纤溶抑制物（TAFI）是一种凝血过程中的纤溶调控因子，具有抑制纤溶酶原（PLG）转化为纤溶酶（PL）的生理功能，主要由肝脏合成和分泌，在血浆中以酶原形式存在，其水平与血栓性疾病的发生和发展有关。

吉林大学第一医院检验科崔巍琦等撰文对TAFI的生理功能进行介绍，并总结TAFI检测技术及其检测原理，梳理TAFI的临床应用价值，旨在更深入地了解TAFI，为血栓性疾病的防治提供参考。

TAFI抑制纤维蛋白溶解的作用机制

TAFI在肝脏中以酶原的形式被合成，活化后能够抑制纤维蛋白溶解，其作用机制为：

1）PLG和组织型纤溶酶原激活物（t-PA）与纤维蛋白表面结合，在PLG和t-PA的赖氨酸结合位点，以及纤维蛋白降解产生的C端赖氨酸残基的特异相互作用下形成三元复合体，促进纤溶酶PL生成；

2）PL切割纤维蛋白，产生新的C端赖氨酸残基，进一步促进PL的生成；

3）凝血酶、PL、凝血酶调节蛋白（thrombomodulin，TM）复合物激活TAFI，活化的TAFI通过持续水解纤维蛋白产生的C端赖氨酸残基来限制PL生成，从而抑制纤维蛋白溶解；

4）为维持机体凝血和纤溶平衡，活化蛋白C（APC）的水解使凝血酶原中必需的辅因子Ⅴa失活，并限制凝血酶的形成和TAFI的激活，从而促进纤维蛋白溶解。见图1。

TAFI检测技术

TAFI检测始于上世纪90年代，主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、火箭免疫电泳、酶法和活性测定等方法。近年来，免疫比浊法和同位素稀释质谱法等新的检测方法被开发并普及，推动了TAFI在深静脉血栓、心脑血管疾病、出血性疾病和炎症性疾病中的临床应用。

ELISA双抗体夹心法检测TAFI抗原所需血浆量为100 μL，具有灵敏、特异、操作简便等优点。然而，CPB2基因型，尤其是325 Ile/Thr位点多态性会造成一些捕获抗体对TAFI抗原不敏感，检测时会出现伪影。采用火箭免疫电泳法检测TAFI抗原可较准确地测定TAFI水平，且只需2.5 μL血浆，其缺点是操作相对繁琐、耗时，不便于动态监测

检测TAFI活性的优点是所需的血浆量仅为20 μL，且不受失活的TAFI、前肽和TAFI的蛋白水解片段干扰。然而，酶学测定需要在反应前将酶原激活，检测更为耗时，且存在稳定性差异。

基于活化TAFI抑制t-PA介导的血浆凝块裂解的能力，功能检测不仅能反映TAFI水平，还能反映TAFI亚型的稳定性和活性。功能学检测方法的优点是不受血浆其他成分的干扰，不足之处在于不能解释其他变异位点，还需进一步研究TAFI功能水平及其基因型。

免疫比浊法又被称为免疫浊度法，具有快速、灵敏、准确等优点，现已被广泛应用于测定微量抗原、抗体及其他小分子半抗原物质。与ELISA相比，免疫比浊法更快速、灵敏，只需要3 μL血浆，适用于高通量快速实验室检测。缺点是成本高。

同位素稀释质谱法是一种定量质谱方法，使用稳定同位素标记内标来测量目标蛋白质，以代替整个蛋白质并进行量化，具有很高的重现性、可靠性、准确性和适用性。

TAFI的临床检测意义

静脉血栓栓塞是静脉内血凝块形成，或由血栓/血栓的一部分脱落至静脉内引起的栓塞。高水平TAFI可能与急性肺栓塞（PE）患者的发生有关。有研究显示，TAFI可作为成人下肢深静脉血栓形成的血栓后综合征（PTS）发展的生物标志物，也可以作为评估深静脉血栓的生物学指标。

国内外已有多项研究报道了TAFI与动脉粥样硬化血栓形成有密切的关系。TAFI是冠心病的危险因素，高水平TAFI（>22.88 μg·mL^-1）患者发生冠心病的风险是低水平TAFI（≤22.88 μg·mL^-1）患者的1.64倍。此外，多项研究结果均提示TAFI与动脉粥样硬化、AMI的发生具有一定的相关性，但TAFI的临界值及其预测价值需要基于大样本量的临床研究进一步确定。TAFI水平在不同心血管疾病中的作用机制及影响具有多面性，值得进一步研究和探讨。

血浆TAFI可作为急性脑出血患者术后再出血的保护性因素和早期评价再出血的参考指标，诊断效能良好。WYSEURE等发现，血友病A患者TAFI激活缺陷是关节损伤后病理性扩大和异常血管重塑发展的诱发因素，TAFI活化缺陷是先天性血友病A患者关节出血的主要原因，内源性TAFI可使获得性血友病A患者关节出血明显减轻。

TAFI除抑制纤维蛋白溶解外，还可以作为天然抗炎分子参与炎症过程，这种作用主要是因为其能够抑制活化因子补体3a和补体5a以及促炎介质（缓激肽和凝血酶裂解的骨桥蛋白）。脓毒症作为一种严重的炎症性疾病，其发生与炎症/补体和凝血系统的失调密切相关。TAFI可能通过抑制补体而发挥保护作用，提示TAFI可作为脓毒症或其并发症的早期诊断标志物。

糖尿病患者普遍存在血栓形成倾向和纤溶功能异常的情况。2型糖尿病患者血浆TAFI水平和活性显著高于健康对照组，可能是低纤维蛋白溶解的重要致病因素。2型糖尿病肾病患者外周血TAFI水平对评价2型糖尿病肾病患者肾小球过滤功能和临床治疗具有一定的指导意义。

在肿瘤患者中，如果能够及早发现高凝状态或易栓状态，不但能够避免或减少血栓形成，还会大大提高患者生存率。乳腺癌患者血浆TAFI水平显著升高，可作为乳腺癌早期凝血-纤溶功能紊乱的标志，但对乳腺癌分期作用并不明显。胃癌患者TAFI水平明显升高，且与胃癌的病理分期有一定的相关性，提示其可以作为胃癌诊治的辅助实验室指标。TAFI或可作为肿瘤相关疾病的辅助诊断指标，但仍需大样本多中心研究结果进一步验证。

免疫性疾病患者普遍存在高凝和血栓前状态，在血栓形成后，患者多个器官会有缺血性变化，从而造成器官功能不全。SLE患者的高凝状态与TAFI水平有关，TAFI水平可提示系统性红斑狼疮（SLE）患者疾病严重程度。抗磷脂综合征（APS）以血栓形成和补体激活为致病特征，活化TAFI可作为APS患者动脉血栓形成的新生物标志物。在过敏性支气管哮喘中，TAFI可能通过抑制补体系统而对过敏性炎症起保护作用，提示TAFI可能参与支气管哮喘的发生。此外，检测血浆TAFI水平，可以在某种程度上对肾衰竭病情的进展进行预测，从而为临床治疗提供参考。

TAFI在凝血和纤溶中的作用促进了相关溶栓药物研发的发展。TAFI抑制剂能够改善不同动物败血症和血栓形成模型中的内源性纤维蛋白溶解，TAFI抑制剂联合t-PA能够提高药物溶栓效率，从而降低t-PA的剂量，减少出血并发症的发生。

未来期待未来TAFI能够在检测技术和临床应用方面为血栓性疾病的诊疗及监测提供更为精准的参考数据。