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教你正确使用移液器

归去来兮 2024-8-28 03:13 PM 76人围观 技术


您知道吗,如果只是简单地遵从接下来这些技巧,您移液的准确性和重复性将可能会得到5%的提高。

最优的量程范围

大多数移液器的正常操作体积范围是指示量程的(10-100)%。尽管这一范围是可操作范围,但随着体积设定的下降性能参数将会发生变化。100uL移液器的准确性参数在指示量程的50-100%的时为±0.8%。然而如果你移取10μL(或者指示量程的10%),不准确度将会提高3倍,或者为(2.5-3)%。所以获得最佳性能的最优量程范围是指示量程的35-100%。尽量避免将一个移液器的体积设定少于最大体积的10%,而应该用小量程的移液器来进行小体积移液操作。

吸头浸入深度

正确的吸头浸入深度可以提高准确性高达5%,尤其对微量移液器相当重要。对于微量移液器,吸头应该浸入(1-2)mm,而对于大量程的移液器,浸入深度应为(6-10)mm。如果吸头浸入的太深,吸头内部的空气就会被压缩,造成过多的液体被吸入。残留在吸头表面的液体也可能会影响结果。吸头如果浸入的不够充分,那么可能会吸入空气,就会造成气泡的形成和移取体积不准。两者都会造成不准确的移液体积,

正确的吸液角度

吸液时吸头尽可能以90度角浸入到样品中,最好不要偏离垂直位置超过20°对于微量体积的移液器,以垂直角度移取溶液可以提高2.5%的准确性。偏离垂直超过20°吸液将会导致不准确的量取-过多的液体将会被吸入,造成移液不准确。以60度角浸入,将会使你的液体吸取量超过所设定的0.7%

保持一致性

保持一致的移液节奏和速度将会帮助你得到理想的、重复性更高的结果。保持节奏和速度的一致性可以将准确性提高5%。

一致的样品分配、一致的样品排液

注意区分润洗吸头和不适合润洗的情况

润洗吸头2-3次可以在吸头内形成同质膜,这样可以提高0.2%的准确度性。润洗可以中和微量移液中的毛细效应,对于大体积移液,这可以使吸头内部温度与样品温度一致当移取热的和冷的溶液时润洗会对结果产生不利影响,如从冰浴中移液或者溶液温度超过37摄氏度,润洗可能会造成高达5%的错误率。

避免温度变化

恒定的室温:移液和校准的理想温度是21.5℃士1℃。避免在有风或者有阳光直射,温度变化较大的区域操作,这些区域可能会降低移液的精准度保证足够的平衡时间:除非另有其他要求,否则请保证足够的时间来使您的液体样品和移液器达到平衡温度。

手温效应长时间使用移液器,来自手的热量可能会加热移液器一导致移液器内部的空气受热膨胀从而会产生不准确的结果。




本文编辑:小薇

来源: 化验员之家
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