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NGS丨核酸提取的原理与方法

归去来兮 2024-5-28 10:35 AM 126人围观 技术



为什么要进行核酸提取?


核酸分子的获取(核酸提取)是核酸分子检测必不可少的前处理步骤,而且从复杂的生物样本中分离出高纯度的核酸是确保高灵敏、高精确度检测的关键。


现今并非所有的核酸检测方法都需要从原始样品中提取核酸,但如果不对核酸进行提取和纯化而采取直接检测,样品中的杂质可能会影响检测结果的准确性。例如,如果某病毒样品中存在过多的RNA酶等杂质,可能会使得病毒RNA发生降解,而导致检测失败,此外,杂质还可能与检测试剂发生非特异性反应,干扰检测过程,降低检测敏感度等问题,甚至可能造成假阳性或假阴性结果。


因此,为了实现目标物的精准检测,核酸提取是至关重要的实验步骤。



核酸提取原理


总的来说,核酸提取包括裂解和分离纯化两个过程。


核酸是复杂的生物大分子,通常位于细胞核内,并与各种蛋白质结合在一起。为了获得高质量的核酸分子,需要将细胞进行裂解以释放核酸分子(裂解),并需要利用核酸与蛋白质等其他分子理化性质的差异,从混杂的溶液中将核酸分子分离出来(分离纯化)。


同时,为了便于后续的研究,需尽可能保证核酸分子一级结构的完整性,并避免蛋白质、脂类物质和多糖等生物大分子的污染。







来源: 健康守望角
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