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什么是胶体金？ 胶体金（colloidal gold）是氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成的一定大小的金颗粒。由于静电作用，金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，故称胶体金。胶体金具有高电子密度，能与多种生物大分子结合，已成为继荧光素、放射性同位素和酶之后，在免疫标记技术中较常用的一种非放射性示踪剂。 胶体金检测平台常用的检测方法有双抗夹心法、竞争法、间接法等，不同检测方法检测原理及适合检测的物质不同，下面就系统地介绍一下这三种方法。 双抗夹心法是胶体金检测平台最常用的检测方法，主要用于检测比较大的生物分子及颗粒性抗原。双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体，一个抗体用胶体金标记并固定在结合垫上，另一个抗体固定在NC膜的检测线（T线）上。另外，还需要准备能与金标抗体（即胶体金标记抗体）特异结合的二抗并固定于NC膜的控制线（C线）上。
当待测样品液体滴加到试剂条上后，通过层析作用，液体依次会运动至结合垫、T线、C线，每个阶段的反应如下表所示：
小分子抗原很难制备得到配对抗体（分子量小，很难找到两个结合位点供两个抗体同时结合），因此小分子抗原无法用双抗夹心法进行检测。对于小分子抗原，通常利用竞争法进行检测。 使用竞争法的胶体金检测平台，在试剂条的结合垫上固定的是金标抗体，NC膜上T线固定的是大分子偶联的待测抗原（小分子抗原不能直接固定于NC膜上，因此需要通过化学方法把小分子偶联到BSA等大分子物质上再固定于NC膜上），C线上固定的是能与金标抗体特异性结合的二抗。
间接法主要用于检测抗体。如果胶体金检测平台使用的是间接法，则试剂条的结合垫上固定的是带有胶体金标记的Protein A（Protein A能够与抗体非特异性结合），NC膜上的T线固定的是能与待测抗体特异性结合的抗原，NC膜上的C线固定的是抗Protein A抗体。
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