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对于自身抗体的检测，特别是常规检测项目—抗核抗体（ANA）的检测，IIFT一直都是检测方法的“金标准”。而对于特异性自身抗体检测，目前市场上不断有新的方法学出现，从经典的免疫印迹法、ELISA、到化学发光法（CLIA）、流式荧光法和磁条码免疫荧光法。针对如此多样的方法学，本文将进行系统的介绍，为临床实验室进行正确选择提供参考。 间接免疫荧光技术（IIFT）因其独具的技术优势成为自身抗体检测的“金标准”，是国内外公认的自身抗体筛查首选方法。 首先，该方法以细胞或组织为检测基质，保留了抗原谱的完整性，保证了自身抗体筛查的敏感性。如HEp-2细胞包含了多达100种靶抗原，可以做到对抗核抗体的全面筛查。同时，以抗原转染细胞为基质的IIFT亦是一种特异性抗体确认方法。 该技术将细胞中含量较低的靶抗原以其天然构象大量表达在细胞表面，极大提高了特异性抗体检测的灵敏度和特异性。 随着IIFT技术的广泛应用，临床实验室对自动化要求日益迫切，目前市场上已经推出了从加样到判读的全自动化检测平台，大大提升了实验室的工作效率并提高了检测结果判读的标准化。 免疫印迹法作为多指标联检的特异性抗体确认技术，自90年代初进入中国以来，现已普遍应用于自身抗体检测。该技术是将各种特异性抗原呈条带状包被于理化性质相匹配的不同材质的膜基质上，各种抗原包被带之间间隔一定的距离，由此保证了检测结果的高灵敏高特异性，并完全避免各种抗原间的结果干扰。 根据2022年国家卫生健康委临床检验中心（NCCL）室间质评上报的1752家实验室数据统计，ENA靶抗原检测的方法学中，使用免疫印迹法的实验室占比80%，是目前自免领域份额占比最大的方法学，且质评结果准确率达到98%，可以看出免疫印迹法使用率很高，备受临床实验室的认可，是自身抗体检测的主流方法学。
免疫印迹法备受青睐，究其原因主要是该技术操作简单、性能优异，多指标联检完全符合临床特异性抗体筛查和确认的需求，经济又高效。此外，免疫印迹法提供的是具有临床意义的半定量检测结果，这种半定量等级结果和抗体水平呈线性相关，且这种相关性已经过长期的临床验证，为临床诊断的把握度和病情的严重程度判断提供了依据。 因此，免疫印迹法凭借自身的诸多优势，稳居自身抗体靶抗原确认检测方法中的主导地位。
原作者: IVD咨询
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