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因剂量效应导致杂合子抗原漏检,咋办?(附案例分享)

mango524 2023-4-13 12:00 AM 478人围观 技术


在公众号交流群里时不时的会看到类似这样的问题:

这两个问题,本质上是同一个问题,基层医院,抗筛阳性,没法做鉴定,盲配的风险,到底在哪里?
这里,小编认为,盲配最大的风险在于因剂量效应导致杂合子抗原的漏检。
首先,咱们来看看,什么是剂量效应。

当控制某血型抗原的基因为纯合子时,其红细胞上的该抗原为"双剂量",为杂合子时,其红细胞上的该抗原为"单剂量"。相应抗体与纯合子的红细胞反应强,抗体的反应效价高;与杂合子的红细胞反应强度弱,抗体的反应效价低,这种由于等位基因数量不同所致的抗原表达上的差异现象称为剂量效应( dosage effects )。剂量效应在共显性基因的情况下发生,常见剂量效应比较明显的血型系统有Rh、MNS、Kidd、Duffy等。


下面,照旧上案例。

患者邓某,O型RhD阳性,Hb 40g/L,申请红悬4u,有输血史
输血相容性检测
抗筛和交叉配血结果如下:

抗筛1号弱阳,交叉配血101721主侧弱阳,101718交叉“相合”。

对照抗筛谱,可能为抗-C,抗-e,抗-Ce,抗-M,抗-Fya等。
先做个Rh分型,结果如下:

Rh分型结果为CCDee,排除Rh系统抗体。

下面,再来验证抗-M。我们知道抗-M有个非常特别的地方,就在于他具有冷反应性。那就4℃环境进行抗筛和交叉配血吧。结果如下:

嘿,大概率是抗-M无疑了。

加做患者MN血型结果如下:

患者MN血型结果为M-N+
试验到这里基本明确,患者血清中存在抗-M抗体。
咱们来做个抗鉴(4℃)进行进一步的验证。

对照谱细胞格局表,完全符合抗-M抗体的格局。2.5.8.9为M纯合子,反应为强阳,6.7.10.11.12.15为M杂合子,反应弱阳,呈现出典型的剂量效应。

最后,我们为患者挑选了两袋O型Rh分型相同且M抗原阴性的献血者血液,经37℃和4℃交叉配血相合。

讨论
抗体鉴定细胞因其价格昂贵、有效期短(尤其是进口试剂,甚至刚到科室即过期),而对于基层输血实验室来说,一年中碰到需要抗体鉴定的样本量少且不确定,因此,基层医院如果把抗体鉴定细胞作为常规储备难免造成浪费。
小编翻阅了输血服务蓝皮书《中国输血行业发展报告》(2022),在《我国红细胞血型抗体鉴定的现状与展望》一篇中,有展示2021年全国输血相容性检测室间质量评价第三次抗体筛查和抗体鉴定上报情况,如下图:

由上图可见,我国三甲、三乙、二甲、二乙医院抗鉴结果上报率分别为23.57%、9.8%、7.91/1、1.05%,这个数据着实让小编感到非常惊讶,真的比小编想象的还要低很多,并且这里面还没有提到乡镇卫生院、社区医院等。
那么,在日常工作中,如果遇到了抗筛阳性,因剂量效应导致交叉配血假阴性的情况,该怎么办呢?
首先,我们可以根据抗筛结果,大概判断一下有哪些系统的抗体。然后根据相应抗体对应抗原的频率来推断,是否是真的相合。如-E抗体,大概是2选1;抗-M抗体,大概是5选1;抗-Lea大概是5选4;抗-Jka、抗-Jkb大概是3选1;等等
其次,选择更灵敏的试验方法。如怀疑Rh系统抗体,可使用凝聚胺试验进行抗筛和交叉配血,凝聚胺法对Rh血型系统敏感性高,酶处理都无法检测的Rh系统弱抗体,聚凝胺试验可以检测出来。
这里,小编建议可使用上海市血液中心刘曦老师的直播课讲的改良凝聚胺试验,即在加入Lim试剂后,可将试管置37℃孵育1分钟,然后加入凝聚胺试剂,离心1分钟,倾倒掉上清液,再次将试管放37℃孵育一分钟,观察试管中是否有凝集,最后加入重悬液观察结果。两次37℃孵育1分钟可使抗原抗体反应更加充分,使凝聚胺试验敏感性更高。
再次,可以选择PEG抗人球蛋白试验增强抗原抗体反应。小编个人没有做过PEG试验,无法与大家分享心得体会。这里,给大家推荐一个微信小视频《教你在乡镇卫生院都可以做的实验方法》,来自微信视频号“我爱黄嬢嬢”。据说,某东某宝几十块钱购买的小小一瓶PEG 4000可以用到地老天荒,大家赶紧安利起来吧。小编也迫不及待的想去尝试一下了呢
原作者: 临床输血 | 涓涓溪流
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