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实验室连环悬案:怎么都跑不对的 PCR,我怀疑有人害我

归去来兮 2023-2-7 05:27 PM 2083人围观 杂谈

受害人陈述

我是一名快要开题的研二学生,入学来跟着师兄师姐也做了无数次的 PCR 实验了,怎么也算是经验颇丰了。


为了在开题报告里多放一些实验数据,最近从一大清早忙到半夜,一直跑 PCR,居然无一例外全都扑街了!


是试剂?引物?模板?还是有人要害我?亦或是传说中的 PCR 杀手作祟?


这太可怕了,你愿意跟我一层一层来揭秘吗?



第一次实验:
消失的样品

像往常一样,我配置了一个 50uL 的 PCR 体系,设置的 PCR 程序为 2h,等跑完我拿出来一看,样品居然只剩下一半左右!这是合理的吗?




可能情况

A:PCR 仪的热盖温度过低,液体都在盖上

B:小手一抖 PCR 管盖子没盖紧,蒸发了

C:实验室采购的 PCR 管质量太差,按紧了仍然蒸发

D:PCR 管热化了,盖子形变蒸发了

E:PCR 管内的液体变成蝴蝶飞走啦

F:有人针对我








答案解析

A 正确。当热盖温度过低,PCR 程序温度高于它的时候,会导致液体蒸发到盖上;B、C、D 正确。PCR 管盖子没盖紧、质量过差难以盖紧或者加热导致的 PCR 管形变盖子翘起来也会导致液体蒸发掉。E 错误。这一看就不对,除了香妃和蚕宝宝其他东西都是变不成蝴蝶哒,实验出 bug 的时候不要开始幻想,请老老实实学习。选 F,那大概率是你想多了。



来源: Super Lab
我有话说......