常用生殖免疫学检查项目及临床意义

一、生殖免疫功能异常主要表现

1.抗原系统异常，主要是配偶间组织相容性抗原或血型抗原不相容。

2.抗体系统异常，主要是封闭抗体缺乏或自身抗体水平异常。

3.细胞免疫及细胞因子反应异常。

二、抗原系统检测

1.组织相容性抗原（HLA）检测

HLA位于人类第6条染色体上，胎儿的一条6号染色体来源于母亲，一条携带着父亲的HLA复合体。夫妇间HLA相似性大（共同Ag比例高）是导致RSA的原因之一。机制是父方的HLA抗原会刺激母体产生相应的HLA抗体，这些抗体能保护胎儿免受母体免疫系统攻击。如果夫妇间的HLA相容性过高，母体对胚胎的父系抗原免疫识别功能低下，就不能有效的刺激母体产生保护性抗体，胎儿暴露在母体免疫系统的监测之下，使母体产生排斥反应，导致死胎、流产。

2.血型抗原系统

以往有妊娠史或输血史的患者，可发生ABO血型或Rh因子血型不合。在ABO血型不合夫妇中，约1/5的妊娠发生流产。机制是胎儿红细胞通过胎盘进入母体，使母体致敏产生相应抗体，抗体又通过胎盘进入胎儿体内与相应抗原结合而致溶血。A、B血型的母亲多形成IgM抗体，不能通过胎盘。O型血母亲对A、B抗原均可产生IgG抗体，IgG抗体可通过胎盘，所以O型血母亲最易发生复发性流产。如父亲带有Rh抗原而母亲为Rh阴性，子代的Rh抗原诱发母体产生溶血性抗体而致流产。

三、抗体系统的检测

1.封闭抗体

正常孕妇血清中存在抗配偶的淋巴细胞的特异性IgG抗体，即配偶淋巴细胞抗体（APLA），它可以抑制淋巴细胞反应（MLR）,封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用，防止辅助T细胞识别胎儿抗原的抑制物，并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子（MIF），故称为封闭抗体。

2.自身抗体的检测

1）抗精子抗体

存在于女性血清或宫颈黏液中及男性血清、精浆和精子附着处。正常情况下，精浆中存在的免疫抑制物可以抑制女方对其配偶精子抗原的免疫应答，使女方形成免疫耐受。但当生殖道黏膜受损、炎症等使机械屏障破坏时，男女双方机体就容易产生抗精子抗体。生殖道中的抗精子抗体与精子直接结合，干扰精子运动、精卵结合及受精卵着床，引起不孕。引起自然流产的抗精子抗体主要存在于女方血清中，作用于滋养细胞层，影响胚胎的生长发育，导致流产。男性血-睾屏障破坏时精子及其可溶性抗原与免疫系统接触，产生抗精子抗体，影响精子功能。精子对女性是一个同种异体抗原，性交活动可视为一个反复注射抗原的过程，

2）抗心磷脂抗体（ACA）

ELISA方法，阴性≤10U/ml；弱阴性10~20U/ml；中度阳性21~80U/ml；强阳性>80U/ml。

少部分ACA弱阳性，建议至少间隔6周进行2次或2次以上，以中度阳性和强阳性意义最大。

ACA是以心磷脂为抗原的自身抗体，干扰磷脂依赖性的凝血过程，抑制血管内皮细胞合成前列腺素。ACA多发于组织炎症、损害及粘连后，主要引起小血管内血栓形成，引起蜕膜、胎盘血流不畅、血供不足等导致流产。复发性ACA阳性率15~20%，无自然流产者阳性率为2~5%，且其中大部分为低度阳性。曾有过自然流产史且ACA高水平者，RSA发生率达70%。曾经自然流产≥3次且ACA阳性者，再次自然流产概率达90%。需要注意的是，某些感染性疾病如梅毒、疟疾、甲肝、HIV、巨细胞病毒感染及结核等可使ACA呈阳性，因此阳性需6~8周复查。

3.抗子宫内膜抗体（EmAb）

ELISA方法，P/N≥2.1为阳性。

正常情况下，子宫内膜位于宫腔内，不会诱发机体产生自身免疫反应。剖宫产及人工流产术等使血通过输卵管逆流引起子宫内膜异位症，诱导机体产生抗子宫内膜抗体。EmAb会抑制排卵，阻碍精卵结合，影响早期胚胎发育，使子宫内膜着床环境发生变化干扰胚胎着床。EmAb还会破坏子宫内膜结构，导致子宫内膜发育不良，内膜和基底膜细胞结构改变，子宫内膜分泌不足，干扰胎盘的生长，导致流产。异位的内膜在卵巢激素作用下，周期性脱落、出血、不断刺激机体免疫系统，引起广泛性体液和细胞免疫反应而产生自体抗体EmAb。EmAb与子宫内膜抗原的抗原抗体反应及其引起的补休活化均直接对子宫内膜产生免疫性病理损伤，妨碍孕卵着床及着床后胚胎发育，异位内膜所激活的免疫反应可改变输卵管周围及子宫内膜局部微环境，影响精子活力及卵子穿透力而导致不孕。

4.抗透明带抗体（ZPAb）

透明带是一层包绕着卵母细胞及着床前受精卵的一层嗜酸性明胶样糖蛋白膜，在诱发精子顶体反应、精卵识别、结合、穿透和阻止多精子入卵的过程中起重要作用。透明带有很强的免疫原性，当机体受到与透明带有交叉性抗原性的抗原刺激或各种致病因子使透明带抗原变性时，机体发生同种或异种免疫反应，产生抗透明带抗体，稳定透明带结构，使精子不易穿透透明带，或即使受精也因透明带不能自孕卵表面脱落而妨碍胚胎着床，导致不孕。ZPAb在母胎识别中起免疫损伤作用，促进母体对胎儿的免疫排斥反应。ZPAb对透明带的孕卵有损伤作用，孕卵即使着床也因前期损伤作用而不能正常发育导致流产。

5.抗卵巢抗体（AoAb）

ELISA方法，P/N≥2.1为阳性。

AoAb靶抗原位于卵巢颗粒细胞、卵母细胞、黄体细胞及间质细胞中。正常妇女体内可以存在一定量的非致病性AoAb，用于清除体内的衰老组织细胞，但在感染及创伤等情况下，免疫细胞对自身组织产生过度应答而产生大量AoAb，引起自身免疫性卵巢炎，影响卵巢生殖内分泌功能，从而影响卵泡发育、成熟及排出或阻止精子穿入卵母细胞，使雌孕激素分泌减少，导致不孕或流产。

6.抗hCG抗体

hCG由胎盘合体滋养细胞层细胞产生，对于正常妊娠的维持不可或缺。异常情况下，绒毛膜组织中的hCG作为抗原刺激机体产生抗体hCGAb。自然流产妇女阳性率为25%，hCGAb与hCG表面抗原特异性相结合，可灭活hCG，使体内性激素水平低下，引起流产。

四、细胞免疫及细胞因子反应异常

子宫蜕膜组织中含有的免疫细胞包括大颗粒淋巴细胞、NK细胞、蜕膜巨噬细胞、T淋巴细胞以及少许B淋巴细胞。这些免疫的比率随着妊娠的发展而改变，它们聚焦在胎盘部位的蜕膜处，与侵入的滋养细胞密切接触并分泌多种细胞因子调节母胎界面间的免疫平衡。子宫内膜虽然没有典型的黏膜免疫系统，但有相当数量的淋巴细胞，同时，子宫内膜上皮和间质细胞也是重要的免疫潜能细胞，这些免疫潜能细胞和其分泌的生长因子及细胞因子有效地调控子宫内膜的免疫活性，在防止感染及调节生殖活动中起着重要作用。

子宫内膜不同细胞分泌的细胞因子及作用表，这些因子表达缺陷或增强，可导致妊娠失败。

辅助性T细胞在妊娠免疫中发挥重要作用，Th细胞根据其分泌的细胞因子不同可分为Th1和Th2两个亚群。Th1/Th2平衡在调节妊娠免疫耐受中起重要作用。Th1细胞以分泌IL-2、IFN-y及TNF为主，主要介导细胞免疫反应和局部炎症反应，参与免疫应答，与免疫损伤有关。Th2细胞以分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10为主，主要介导体液免疫反应，抑制免疫炎症，参与介导免疫耐受的形成。Th1/Th2细胞因子互相制约，它们之间的协调将决定机体细胞免疫和体液免疫之间的平衡。一旦这种动态的平衡被打破，将导致或促进疾病的发生，Th1/Th2型细胞因子的失衡与RSA密切相关，现已证明RSA妇女蜕膜免疫细胞产生过量胚胎细胞因子，Th1/Th2平衡偏向Th1，Th2受抑制，Th1型细胞因子与妊娠失败密切相关，而Th2型细胞因子与妊娠成功相关。

宫颈与阴道的免疫细胞主要有抗原呈递细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞。在子宫颈管上皮黏膜下有免疫球蛋白合成细胞。它可对局部抗原起反应，产生抗体，经上皮分泌至黏膜面，进入覆盖黏膜面的黏膜层。其局部分泌的抗体主要为分泌型IgA（SIgA）。SIgA可中和病毒，抑制微生物黏附黏膜表面，可活化补休，在溶酶体和补休存在下具有杀菌作用，且可通过与抗原大分子合成为不可被吸收的复合物，起到调理细菌吞噬和阻止抗原进入体内的作用。IgA的合成受激素的影响，雌激素使合成IgA的免疫细胞减少，孕激素使其增加。

自然杀伤细胞（NK）是机体天然屏障的第一道防线，在体内对自体和异体的异常细胞具有自发的细胞毒作用。