What？开盖时间过长竟会引发项目失控？

8月8日那天一上班，笔者按常规程序检测特种蛋白免疫定量项目的室内质控，发现风湿类项目类风湿因子（RF）、抗溶血性链球菌O（ASO）失控（见下图倒数第二组质控点），话不多说，请各位同仁看图：

发现失控项目，检验同仁都知道，肯定是停做标本，查找原因。高低浓度质控同向同时失控、而且是多项目失控，首先考虑的系统误差，造成系统误差的原因一般是“共性”问题：

带着问题，笔者逐个检查。

1、首先仪器近期没有维修，仪器内部没有漏液、没有报警信息，其他质控结果稳定，可暂时排除仪器问题；

2、检查检测试剂（ASO和RF）、沉淀剂、稀释液均不是新换，更换天数均小于3天（试剂说明书要求开盖时间不大于7天），可暂时排除试剂问题；

3、质控品开瓶第三天，可以排除污染和失效的可能。

每天早晨是检验科最忙的时候，如果不早点纠正失控，就得耽误患者标本的检测，延迟发报告还可能早晨患者投诉，这个时候失控原因还在和我捉迷藏。无奈之下笔者只好抱着“试一试”的心态，重新开一只新质控检测，结果非常好（见图1最后那组质控点）。失控原因找到了，就是质控品问题，而且高低浓度两只质控品同时失控，实在少见，失效原因看来又是“共性”问题。

此两只质控品开盖日期是8月6日，与新开质控品是同一批分装的，为了保证开盖频次和暴露空气的时间，原装瓶1ml质控品分装到5个1.5ml离心管里，每只200ul，每只大约用3-4天。因是液体质控品，应该不存在瓶间差问题和溶解不均匀问题。

回顾前两天结果，发现8月7日质控结果就有“翘头”现象，说明开瓶第二天就出现问题了。按常规来说，质控品开盖第二天就有问题的实属罕见。但是笔者发现了一个小细节，检测三次后，离心管残留量很少，和以前不太一样。经询问8月6日做质控的同事，的确那天开盖时间有些长。难道是开盖后液体蒸发导致的失控？为了证实这个疑问，笔者查阅资料并做了一个小试验：恒温恒湿条件下观察10ul水分的蒸发速度。

笔者把10ul生理盐水三份分别滴到TRUST实验用纸片上（防渗水的），室温条件下（25℃/RH45%），水平平摊面积和1.5ml离心管中间内径略小，经观察，水分蒸发干净的时间是63min17s。

试验做到这里，似乎找到了失控原因。离心管的质控品如果在空气中暴露时间过长，有水分蒸发导致质控目标物浓缩造成的可能。我们分装的质控品每只200ul，如果累计开盖1小时，将有10ul的水分蒸发掉，10/200=0.05=5%，目标物浓缩了5%，也相当于检测误差增加了5%，随着检测次数的增加，总容积在逐步减少的情况下，这个误差还会放大。

失控原因找到这里，笔者有些释然，但是还不能100%确定，毕竟追溯条件简陋，没有强有力的数据支撑，失控纠正了，只能靠日后实践中验证了。

【参考文献】

[1]尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第4版，北京：人民卫生出版社，2015.

[2]中华人民共和国卫生行业标准.WS/T 641-2018:临床检验定量测定室内质量控制.2018.

[3]Statistical Quality Controlfor Quantitative Measurement Procedures: Principles and Definitions. C24-A4 CLSI,2016