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一图 get 双向扩散试验

归去来兮 2021-3-9 04:40 PM 2126人围观 技术

各位检验人周末好,往期有小伙伴留言想要学习双向扩散试验相关内容,本周「每周一图」栏目为大家安排:



双向扩散试验应用的是沉淀反应原理。沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在特定条件下发生特异性结合所出现的沉淀现象,抗原多为蛋白质、多糖、血清、毒素等可溶性物质。沉淀反应分两个阶段,第一阶段为抗原抗体发生特异性结合,几秒到几十秒即可完成,出现可溶性小的复合物,但肉眼不可见;第二阶段为形成可见的免疫复合物,约几十分钟到数小时才能完成,如沉淀线、沉淀环等。

双向扩散试验是让抗原和抗体双方都在琼脂中各自向对方扩散,在比例恰当之处形成抗原抗体沉淀线,观察这种沉淀线的位置、形状及对比关系,可对抗原或抗体进行定性分析。双向扩散试验的平板法是鉴定抗原抗体的最基本最常见的方法之一,根据沉淀线的有无、形态、位置可做如下分析:

1.抗原或抗体是否存在以及相对含量的估计

沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致,沉淀线靠近抗原孔,则说明抗体含量较大;沉淀线靠近抗体孔,则说明抗原含量较大;如果不出现沉淀线,则说明无对应的抗原或抗体或者抗原或抗体过量。

2.抗原或抗体相对分子量的分析

抗原或抗体在琼脂内自由扩散,其速度受分子量的影响。分子量小者扩散速度快,反之则较慢。由于慢者扩散圈小,局部浓度较大,形成的沉淀线弯向分子量大的一方;如果二者分子量大致相等,则形成直线。

3.抗原性质的分析

两条沉淀线互相吻合相连,表明抗体与两个抗原中的相同表位结合而沉淀,两个抗体相同;沉淀线呈部分相切,说明两个抗原之间有部分相同;两条沉淀线交叉而过,说明两个抗原完全不同。

4.抗原或抗体纯度鉴定

用混合抗原或抗体鉴定抗体或抗原,出现一条沉淀线说明待测抗原或抗体纯,出现多条沉淀线说明不纯。

5.抗体效价滴定

固定抗原的浓度,稀释抗体,或者二者皆做不同的稀释,经过自由扩散,形成沉淀线,以出现沉淀线最高的抗体稀释度为该抗体的效价。


你还想学习哪块知识点呢?欢迎留言,下周日同一时间检验君为大家安排~


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来源: 检验时间 | 作者:Doctor.7
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