梅毒诊断2018最新行业标准发布

梅毒诊断最新行业标准WS273-2018中关于“梅毒螺旋体化学发光免疫试验”的规定如下：

是利用双抗原夹心法化学发光免疫分析原理，采用梅毒螺旋体多种特异抗原包被固相发光微孔板，用辣根过氧化酶标记相同蛋白抗原作为标记抗原，与样本中的梅毒螺旋体抗体形成双抗原夹心复合物后，加入化学发光底物液，测定其发光值，根据阈值判定结果。

具体材料如下：

a) CLIA试剂盒：含包被梅毒螺旋体抗原的微孔板（96孔），酶标记物，化学发光底物液A、B，洗涤液，封板膜，阳性对照血清，阴性对照血清等；

b) 其他：化学发光免疫分析仪，洗板机，微量振荡器等。

对于手工操作实验按以下操作程序进行（采用全自动化学发光分析则根据试剂使用说明书操作）：

a) 准备：自4℃冰箱中取出试剂盒，室温（20℃～27℃）平衡30 min；

b) 实验设计：将微孔板从密封袋中取出，设空白对照1孔，阴性对照2孔，阳性对照3孔，根据设计的样本数量在板架上放好微孔板条；

c) 加样：除空白对照孔外，其余每孔分别加入阴性对照、阴性对照、质控品或样本100μL；

d) 温育：用微量振荡器振荡混匀5s，用封板膜封闭微孔板，置37℃温育60 min；

e) 洗板：洗涤液洗板5次，拍干；

f) 加酶标记物：除空白对照孔外，其余每孔加入酶标记物100μL；

g) 洗板：洗涤液洗板5次，拍干；

h) 加底物液：每孔加入现配的化学发光底物工作液100μL，用微量振荡器振荡混匀5s；

i) 测量：加入底物液后室温（20℃～27℃）静置避光反应5 min，立即在微孔板微孔板发光分析仪上依序测量各孔的发光值（RLU）。

根据化学发光分析仪测量的RLU自动判读结果。标本RLU≥阈值报告阳性，＜阈值报告阴性（或按各诊断试剂要求判定结果）。

• 检测结果要及时进行测量，否则可能会引起较大的测量误差。
  

• 血清标本应注意不含或极少含红、白细胞，否则可能会导致假阳性结果。

• 高血脂或者溶血样本、受到微生物污染样本及反复冻融或者热灭活后的样本均会影响检测的准确性然而导致错误的结果。

• 84消毒液等强氧化剂能引起发光底物液发生反应，导致结果误判，故化学发光操作实验室应禁止使用此类消毒剂。