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新冠核酸检测无内参?这 9 大原因一分析就明白

归去来兮 2022-12-1 05:07 PM 3984人围观 杂谈

大家在做新冠核酸检测的时候经常会碰到一个问题:某个反应孔的内参没有曲线,甚至整板的内参都不起,往往这时大家第一个想到的就是标本不合格,需要重新采样,其实不然,内参基因无扩增曲线的原因有很多,需要具体情况具体分析。


图 1

图源:作者拍摄

首先,我们先要搞明白什么是内参?新冠核酸检测中的内参分为两种,一种是内源性内参,另一种是外源性内参。


内源性内参其实就是人体组织和细胞中表达比较恒定的管家基因,常用的管家基因包括 GAPDH、BETA-actin、18sRNA、B2M、HPRT 和 TBP 等。内源性内参可以监测标本的采集、检测、扩增等各个环节。因此,内源性内参的应用比较广泛。


外源性内参,是一种人工设计合成的与模板扩增效率相似的基因片段,需要额外加到提取溶液中,外源性内参由于是人工设计的基因片段,其扩增效率与靶基因相近,因此能够更好地反应核酸提取及扩增的过程。


在搞清楚上述两个概念之后,我们再来分析一下新冠核酸检测中无内参的原因:



01

标本采集的原因

❶ 标本采集不合格可能会导致内参基因无扩增曲线,原因在于未采集到足够的细胞,核酸提取后内参基因片段极少,导致内参基因无法正常扩增。


但是,当下应检尽检、愿检尽检所使用的采样管通常是 10 合 1 或 20 合 1 的采样管,这种情况下,因标本采集不合格引起内源性内标无扩增曲线的情况极为少见。


来源: 丁香园检验时间
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