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新冠核酸检测结果不准?采样管问题被很多人忽视了

归去来兮 2022-12-1 215人围观 杂谈

近期,国内新冠疫情频发,防控形势严峻。新冠病毒核酸检测质量对于疫情防控具有重要作用。目前病毒采样管仅需I类医疗备案,产品鱼龙混杂,招标参数关注点浮于表面,往往集中在采样管的材质、 规格尺寸、是否为灭活采样管等方面,忽视了更为关键的保存性能指标,为疫情的“动态清零”和“精准防控”增加了难度。


什么是病毒采样管?

作用是什么?


病毒采样管是一类用于保存病毒样本活性或维持样本中核酸稳定的一次性检测耗材,一般由一次性采样拭子、一次性病毒采样管和生物安全袋三部分构成。



病毒采样管中的红色液体是病毒保存液,分为灭活型和非灭活型两种,根据《区域新型冠状病毒核酸检测组织实施指南(第三版)》中建议“人群筛查应选择具有病毒灭活功能,如含胍盐(异硫氰酸胍或盐酸胍等)或表面活性剂的采样管”。它的优点是能够迅速灭活拭子当中的新冠病毒, 防止检测中出现交叉感染,同时能够抑制核酸酶的活性,维持病毒核酸的稳定。






拭子的科技含量与性能指标

一次性采样拭子是利用植绒技术,将尼龙绒毛垂直喷射在涂有胶水的ABS杆上制成的。可以完整、快速将采集患者病灶处的上皮脱落细胞脱离释放到保存液中,用于病毒检测。





尼龙植绒拭子优势

高吸附:尼龙植绒拭子的“吸附”效率比其他拭子高20%~60%。

快采集:植绒尼龙拭子仅需3秒~11秒即可吸收采集样品;而棉质拭子的取样时间长达15秒~120秒。

高释放:国内一项病原体的采集实验发现,植绒尼龙拭子对病原体的采集后释放效率,在不同稀释浓度下都几乎与无拭子阳性对照组相近;而棉质拭子的病原体采集后释放效率明显偏低,且结果受稀释浓度影响更大。




拭子对人体的安全性

疫情常态化监测使核酸大筛成为生活日常,一周三检、四检,甚至一些服务行业人员需要每天进行核酸检测,拭子需要直接接触口腔和鼻腔粘膜,因此安全性不容忽视。

ISO10993-10:2010医疗器械生物学评价分别从细胞毒性、皮肤刺激性和皮肤致敏性三个维度,对采样拭子的生物安全性进行评估,帮助我们挑选对人体安全的采样拭子。




病毒采样管的科技指标

病毒采样管保存的拭子样本,需要送到分子实验室做核酸检测。由于新冠病毒的遗传物质是RNA,性质极其不稳定,温度太高容易降解,随处可见的核酸酶也会导致其降解,因此,采样管能否稳定保存病毒的RNA,成为核酸检测准确性的关键。

采样管质量的好坏,除了“看得见”的指标,更重要的是“看不见”的指标。“看得见”的指标包括采样管材质、工艺水平、密封性、灌装准确度等直接观察的质量指标。“看不见”的指标则包括了病毒核酸的保存效果、最低检测限保存效果、微生物指标、病毒灭活效率等方面,这些指标才是决定病毒核酸检测的关键。




关键指标1:病毒核酸的保存效果

病毒在保存管中被灭活,释放出遗传物质RNA,单链RNA在体外极其不稳定,极其容易发生降解和水解作用。

病毒保存液的作用就是维持病毒RNA的完整,抑制降解和水解。温度、运输条件、保存天数都会对RNA的完整性产生影响。RNA保护的越好,病毒的核酸检测越准确。


不同病毒采样管的保存性能差异很大,下图A和D两品牌采样管分别测试4℃、25℃和37℃保存病毒24小时的核酸检测结果,A保存管ct值与刚采样时的ct值几乎无变化,说明保存效果较好,而D保存管,自第4小时起,已无法检出病毒核酸。





关键指标2:最低检测限保存效果

该项指标目的是为了确保低病毒载量的样本检得出,不发生假阴性误判。

国家要求新冠检测灵敏度不高于500拷贝/ml,换言之,只要样本浓度不低于500拷贝/ml,就应该被检测到。而现实情况是,在大规模人群筛查,或者偏远地区核酸采样后,样本并不能立即送到实验室检测,原本病毒载量比较低的样本,有可能RNA降解比较严重,降至500拷贝/ml浓度以下,因此出现漏检,即假阴性检测结果。




关键指标3:微生物指标

达到“需氧菌总数(CFU/mL)≤200; 霉菌和酵母菌总数(CFU/mL) ≤100”的要求。

病毒采样管中的液体为病毒保存液,其中添加了颜色指示剂酚红。正常情况下,液体应为偏碱性,颜色为紫红色。一旦采样管微生物不达标,其繁殖会导致液体pH值下降,保存液由红转黄,可以通过管子液体颜色,直观判断微生物是否达标。微生物的存在会加速病毒RNA的降解,影响核酸检测的灵敏度。





关键指标4:病毒灭活效率

根据《医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册 (试行第二版) 》 通知,“人群筛查应选择具有病毒灭活功能,如含胍盐 (异硫氰酸胍或盐酸胍等) 或表面活性剂的采样管。”

抗疫一线非常需要能直接灭活病毒的样本保存液,这样可以大大提高样本采集、运输过程中的安全性。应具备高效的病毒灭活效率,如下表所示,该病毒保存管可在1min达到99.99%的病毒灭活效率。




面对巨大的检测需求和市场,势必会出现良莠不齐的产品,采样管的选择是至关重要的环节,产品质量对结果的影响巨大。不能说国内外资质是通关文牒,但是能顺利过关的产品,质量是经得住推敲的,比如无锡百泰克生物,国内一类备案证,美国FDA510K,欧盟CE认证,英国MHRA注册、加拿大MDEL等(其他的企业不一一列举了,可以在相关网站查询)。在关乎国计民生的新冠核酸筛查领域,要坚持品质至上的原则,确保核酸检测的准确性,不要因小失大。


编辑:yeah  审校:小冉

来自: 检验医学网
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