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一文读懂|梅毒实验室检测方法汇总

归去来兮 2022-1-11 687人围观 技术


梅毒(syphilis)是一种全球分布的系统性性传播疾病,它的病原体是苍白密螺旋体(Treponema pallidum,TP)(又称梅毒螺旋体)。

人是梅毒的唯一传染源,感染后,既能产生各种各样的症状,又可多年无症状而呈潜伏状态。患病后病程漫长,早期侵犯生殖器和皮肤,晚期侵犯全身各器官,并生多种多样的症状和体征,病变几乎能累及全身各个脏器。在艾滋病出现之前,是最令人生畏的性传播疾病。


01
中国梅毒感染现状 

据统计,2010年至2020年,中国梅毒累计发病4832807例,累计死亡652例。

2020年中国梅毒发病数量为464435例,相比2019年减少了71384例;死亡人数为54例,相比2019年增长了12例。

2020年中国梅毒发病率为33.0831/10万,死亡率为0.0038/10万;2019年中国梅毒发病率为38.3677/10万,死亡率为0.003/10万。


02
认识梅毒螺旋体 

梅毒螺旋体细长,5-15×0.1-0.2um,形似细密的弹簧,螺旋弯曲规则,平均8-14个,两端尖直。电镜下显示梅毒螺旋体结构复杂,从外向内分为:外膜(主要由蛋白质、糖及类脂组成)、轴丝(主要由蛋白质组成)、圆柱形菌体(包括细胞壁、细胞膜及胞浆内容物),一般染料不易着色。在光镜暗视野下,人们仅能看到梅毒螺旋体的折光性,其活动较强。

主要传播途径有:性传播、血液传播和母婴传播,临床表现分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒。


03
梅毒的实验室检测方法 

梅毒的确诊依据临床症状与实验室检测。

实验室检测分为以下几类:

01
暗视野显微镜检查

暗视野显微镜下,典型的梅毒螺旋体呈白色发光,其螺旋较密而均匀,平均814个。运动规律,运动性较强,观察其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。见到梅毒螺旋体,结合典型临床表现,有确诊梅毒的价值。未检出螺旋体不能排除梅毒的诊断。

02
镀银染色检查

梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染成棕黑色,在普通显微镜下观察,梅毒螺旋体染成棕褐色。

03
核酸扩增试验

采用聚合酶链反应(PCR)法。通过特异引物和特定条件下的热循环反应,对皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊液等样品中的梅毒螺旋体进行核酸检测。

每一次检测需同时做阳性对照、阴性对照,只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段视为实验成立,可作出核酸检测阳性或阴性结果的判定。

04
血清学检查

当人体感染梅毒螺旋体后4周~10周,一方面对感染损伤的局部组织及TP表面释放的心磷脂类物质发生免疫应答,产生非特异性抗心磷脂类抗体(反应素);另一方面对TP的外膜脂蛋白、外膜鞘蛋白等抗原发生免疫应答,产生抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。

根据检测所用抗原不同,梅毒血清学试验分为两大类:一类为非梅毒螺旋体血清学试验(又称梅毒非特异性抗体试验);另一类为梅毒螺旋体血清学试验(又称梅毒特异性抗体试验)。

1、非梅毒螺旋体血清学试验

a性病研究实验室玻片试验(VDRL

b快速血浆反应素环状卡片试验(RPR

c甲苯胺红不加热血清试验(TRUST

2、梅毒螺旋体血清学试验

a)梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)

b)荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)

c)梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(ELISA)

d)梅毒螺旋体快速检测试验(RT)

e)梅毒螺旋体化学发光免疫试验(CLIA)

f)梅毒螺旋体IgM抗体检测

梅毒螺旋体血清学试验的敏感性和特异性均较高,可适用于人群的筛查、产前检查及健康体检等。

05
组织病理

梅毒的基本病理变化如下:

a血管内膜炎:特别是小动脉内皮细胞肿胀与增生;

b血管周围炎:血管周围大量淋巴细胞和浆细胞浸润;

c二期梅毒后期和三期梅毒常见上皮样细胞和多核巨细胞等组成的肉芽肿性浸润;

d银染色、免疫组化染色和PCR检测可发现组织中的梅毒螺旋体病原体。

一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒组织病理变化又有所不同。

06
脑脊液检查

晚期梅毒患者,当出现神经症状,经过驱梅治疗无效,应作脑脊液检查。这一检查对神经梅毒的诊断、治疗及预后的判断均有帮助。检查项目应包括:细胞计数、总蛋白测定、VDRL试验及胶体金试验。


04
梅毒诊断依据 

本部分仅讨论实验室检测部分。应根据流行病学史、临床表现及实验室检查等进行综合分析,作出诊断。

01
一期梅毒

a)暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验

硬下疳损害刮取渗液或淋巴结穿刺液可查见梅毒螺旋体,或核酸扩增试验检测梅毒螺旋体核酸阳性。

b)非梅毒螺旋体血清学试验

阳性。如感染不足6周,该试验可为阴性,应于感染6周后复查。

c)梅毒螺旋体血清学试验

阳性。如感染不足4周,该试验亦可为阴性,应于感染4周后复查。

02
二期梅毒

a)暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验

二期梅毒皮损如扁平湿疣、湿丘疹及黏膜斑,其刮取渗液可查见梅毒螺旋体,或核酸扩增试验检测梅毒螺旋体核酸阳性。

b)非梅毒螺旋体血清学试验

阳性。

c)梅毒螺旋体血清学试验

阳性。

03
三期梅毒

a)非梅毒螺旋体血清学试验

阳性。

b)梅毒螺旋体血清学试验

阳性。

c)脑脊液检查

白细胞计数≥10×106/L,蛋白量>500mg/L,且无其他引起这些异常的原因。脑脊液VDRL试验(或RPR/TRUST试验)或FTA-ABS试验(或TPPA/TPHA试验)阳性。

d)组织病理检查

有三期梅毒的组织病理变化。

04
隐性梅毒(潜伏梅毒)

a)非梅毒螺旋体血清学试验

阳性。

b)梅毒螺旋体血清学试验

阳性。

c)脑脊液检查

有条件时可进行脑脊液检查以排除无症状神经梅毒。隐性梅毒一般无明显异常。

05
胎传梅毒(先天梅毒)

a)暗视野显微镜检查、镀银染色检查或核酸扩增试验

在早期胎传梅毒儿的皮肤黏膜损害或组织标本中可查到梅毒螺旋体,或核酸扩增试验检测梅毒螺旋体核酸阳性。

b)梅毒血清学试验

——出生时非梅毒螺旋体血清学试验阳性,滴度大于或等于母亲分娩前滴度的4倍,且梅毒螺旋体血清学试验阳性。

——梅毒螺旋体IgM抗体检测:阳性。

——出生时不能诊断胎传梅毒的儿童,任何一次随访过程中非梅毒螺旋体血清学试验由阴转阳,或滴度上升,且梅毒螺旋体血清学试验阳性。

——在18月龄前不能诊断胎传梅毒的儿童,18月龄后梅毒螺旋体血清学试验仍阳性。


 

本文编辑:乐乐高

来自: 科跃中楷
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