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衣原体及检验

笔者苏洛 2018-11-20 12:00 AM 1678人围观 技术


一、衣原体的概念:
  衣原体是一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。由于它具有一些与细菌类似的生物学特性,现归属于广义的细菌范畴。


二、衣原体的发现:
1955年,我国学者汤非凡首先分离出沙眼衣原体。


三、主要致病性衣原体:
  衣原体寄生于人类、哺乳类及鸟类,仅少数致病。能引起人类致病的有沙眼衣原体、肺炎衣原体及鹦鹉热衣原体三个种。沙眼衣原体可分三个生物亚种,即沙眼生物亚种、性病淋巴肉芽肿生物亚种(LGV)及鼠生物亚种。前二个亚种对人有致病性,鼠亚种则不侵犯人类。肺炎衣原体是衣原体属中的一个新种,只有一个血清型,其代表株是TWAR株


四、生物学性状
  发育周期与形态染色 在宿主细胞内生长繁殖,有独特的发育周期,有两种形态结构不同的颗粒。
  (1)原体:呈球形或椭圆形,直径约0.3μm,外有胞壁,内含致密的核质,为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色。在细胞外较为稳定,无繁殖能力,但有高度的感染性。
  (2)网状体又称始体:呈球形或椭圆形,直径0.5~1μm,无胞壁,胞浆内无致密的核质,而有纤细的网状结构。吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期中的繁殖型,代谢活泼,不能在胞外存活,无感染性。
2.

  衣原体的发育周期:当原体与易感细胞接触时,通过细胞的吞饮作用进入细胞,形成吞噬小泡。原体在泡内变软,增大为网状体。约8h后,网状体在空泡内以二分裂方式繁殖、聚集,构成各种形状的包涵体。感染18~24h后,网状体浓缩形成具有坚韧细胞壁的原体,最后随宿主细胞破裂而释出,再感染新的易感细胞,开始新的发育周期。每个发育周期约需40~72h。
2.抗原成分 衣原体的抗原性相当复杂,有属、种、型等特异性抗原。
3.分离培养特性 衣原体专性细胞内寄生。绝大多数能在6~8d龄鸡胚卵黄囊中生长繁殖,并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒,也可在传代细胞(如HeLa-299等细胞株)中培养。
4.抵抗力 衣原体抵抗力弱,不耐热,加热50℃经30min或56~60℃ 5~1Omin可杀死,但耐寒,在冰冻条件下可存活数年。鹦鹉热衣原体比沙眼衣原体稳定。对四环素、青霉素、红霉素、螺旋霉素、利福平较敏感。

  临床意义
  (一)沙眼衣原体
1.沙眼 沙眼生物亚种引起。主要通过眼-眼或眼-手-眼的途径进行直接或间接接触传播。
2.包涵体结膜炎 由沙眼生物亚种引起。包括婴儿及成人两类。
3.泌尿生殖道感染 在经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染中,沙眼衣原体沙眼生物亚种是主要的病原。衣原体感染是男性尿道炎最常见的病因之一。在女性可引起尿道炎、宫颈炎、阴道炎、盆腔炎,也可与妇女不孕症有关。
4.性病淋巴肉芽肿 由性病淋巴肉芽肿生物亚种所致。主要经性接触传播,主要侵犯淋巴组织,女性以累及会阴、肛门、直肠及盆腔淋巴结多见,男性以累及腹股沟淋巴结为常见,发生化脓性炎症和慢性肉芽肿,有些可形成瘘管。
  (二)鹦鹉热衣原体
  主要引起鸟类或家禽感染,由其粪便污染环境,以气溶胶形式传给人,典型临床表现为非典型肺炎。
  (三)肺炎衣原体
  主要是人与人之间经过飞沫或呼吸道传播。引起青少年急性呼吸道感染,以肺炎为主。


五、微生物检验
1.标本采集 
  (1)沙眼急性期可在结膜病灶作刮片
  (2)性病淋巴肉芽肿病人可取腹股沟淋巴结脓液或生殖道上皮细胞刮片进行涂片
  (3)鹦鹉热衣原体采取病人血液、痰或咽喉分泌物
  (4)肺炎衣原体采集痰液、鼻咽拭子分泌物
2.染色镜检 寻找上皮细胞胞浆内的包涵体 
  (1)吉姆萨染色:原体呈紫红色,始体呈蓝色,包涵体呈深紫色
  (2)碘液染色:因包涵体的基质含有丰富的糖原,可被碘液染成深褐色
  (3)可利用抗LPS单抗进行直接法荧光抗体染色检测上皮细胞内的衣原体抗原。
3.核酸检测 采用核酸探针、PCR方法。
4.分离培养 各种衣原体均可在鸡胚卵黄囊和组织细胞内生长繁殖,但对鸡胚的敏感程度各有差异。将检查标本用链霉素处理后接种于鸡胚卵黄囊或传代细胞(Mc Coy和He La229株细胞)分离培养。用小鼠腹腔、颅内或滴鼻接种,小白鼠对不同种衣原体的敏感性不同,可以分离鉴定衣原体。

来源: 检验之韵
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