一图搞定 ELISA 试验原理

各位检验人周末好，往期有小伙伴留言想要学习 ELISA 试验原理，本周「每周一图」栏目为大家安排：

酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种酶标固相免疫测定技术。其基本原理是把抗原（或抗体）结合到固相载体上，并将抗原（或抗体）与某种酶连接成酶标记抗原（或抗体）。在检测时，将待检样本和酶标抗原（或抗体）按一定程序与固相载体上的抗原（或抗体）反应，然后用洗涤的方法去除未反应的部分，加入底物后，底物被结合在固相载体上的酶催化产生有色物质，通过定性或定量检测有色产物量，可确定样品中待测物质含量。

塑料固相载体一般选用聚苯乙烯，将抗原或抗体结合到固相载体上的过程称为包被。当包被的蛋白质浓度过低时，固相载体表面不能被完全覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分的吸附到固相载体表面，产生非特异型显色，在这种情况下，需用 1%-5% 牛血清蛋白或 5%-20% 小牛血清再包被一次以消除干扰，此过程称为封闭。

ELISA 可用于检测抗原和抗体。检测抗原最常用的方法为双抗体夹心法，检测抗体时最常用间接法，这两种方法都属于非竞争性结合试验。目前应用较多的竞争性试验是检测 HBeAb 和 HBcAb。

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