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EB病毒（EBV）为疱疹病毒科，疱疹病毒Ⅳ型，是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒。淋巴细胞中潜伏感染的EBV可表达2种不翻译成蛋白质的RNA（即EBV-encoded RNAs，EBERs），包括EBER1 和EBER2，6种核抗原（ EBNA1、EBNA2、EBNA3A、EBNA3B、EBNA3C 和LP），2种潜伏期膜蛋白（潜伏膜蛋白，latent membrane protein，LMP），包括LMP1、LMP2A/B。EBV在人群中感染非常普遍，约90%以上的成人血清EBV抗体阳性。除原发性EBV感染可致传染性单核细胞增多症（infectious monont-ucleosis，IM）外，EBV 还引起慢性活动性EBV感染（chronic active EBV infection，CAEBV）和EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（EBV-HLH）等非肿瘤性重症EBV 相关疾病。EBV还是一种致肿瘤病毒，与许多肿瘤的发生相关，如霍奇金淋巴瘤（HL）、非霍奇金淋巴瘤（NHL），鼻咽癌（NPC），胃癌和移植后淋巴细胞增殖症（PTLD）等。 EBV原发感染后建立终身潜伏感染。EBV潜伏感染可分为四种类型： ➤ EBV潜伏感染0型，在健康的EBV既往感染个体，EBV在记忆性B 细胞潜伏，只表达EBERs，这些个体称为健康携带者。 在EBV感染相关疾病中，EBV有三种潜伏感染类型。 ➤ 潜伏感染Ⅰ型， 除EBERs外，EBV只表达EBNA1和BamHI A右侧片段（BARTs），如Burkitt’s淋巴瘤； ➤ 潜伏感染Ⅱ型，EBV表达EBNA1、LMP1、LMP2、BART'S和EBERs，如鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤； ➤ 潜伏感染Ⅲ型，EBV 表达所有的潜伏感染基因，如免疫抑制病人的淋巴组织增生性疾病（表1）。
针对不同的EBV 感染相关疾病，选择适当的临床标本和实验室检测方法，对于EBV 感染相关疾病的诊断和治疗十分重要。为提高国内EBV 感染相关疾病的诊治水平，特组织病毒学、临床和实验室诊断等方面的专家，参考国内外最新研究成果，制定此专家共识，以规范EBV 实验室诊断方法的临床应用。 1. EBV特异性抗体检测 （1）特异性抗体谱： EBV编码多种结构抗原，包括病毒衣壳抗原（VCA）、早期抗原（EA）、膜抗原（MA）、核抗原（NA）等。机体感染EBV后针对不同的抗原产生相应的抗体（图1）。原发性EBV感染过程中首先产生针对VCA的IgM和IgG（抗VCA-IgM/IgG）；在急性感染的后期，抗EA-IgG出现；在恢复期晚期，抗EBV核抗原（EBNA）IgG产生。目前主要用于实验室检测的EBV 特异性抗体包括抗VCA-IgG、抗VCA-IgM 和抗EBNA-IgG。另外，抗VCA-IgA 和抗EA-IgA 阳性提示持续性EBV 抗原刺激，常用于CAEBV 或EBV 相关肿瘤的诊断和监测。
VCA：病毒衣壳抗原；EBNA：EBV 核抗原；EA：早期抗原 图1 EBV 原发感染和既往感染后抗体滴度变化 （2）抗体亲和力：机体在初次接触病原体时产生的特异性IgG 抗体对相应抗原的亲和力随着免疫反应的进行会逐渐升高，抗VCA-IgG 抗体亲和力的检测可帮助鉴别EBV 原发感染和既往感染，其检测方法包括免疫荧光或酶联免疫方法。 （3）检测方法及标本类型：EBV特异性抗体检测的适宜标本为血清或血浆，检测方法主要包括免疫荧光法、免疫酶法、酶联免疫法、化学发光法、免疫印迹法等，其中酶联免疫法和化学发光法由于可以实现自动化检测，在临床应用较为广泛。 （4）临床意义：对于免疫功能正常的患者，一般情况下结合抗VCA-IgM、抗VCA-IgG 和抗EBNA-IgG 3 个抗体的检测结果可以区分EBV 原发感染和既往感染：抗VCA-IgG、抗VCA-IgM 抗体阳性而抗EBNA-IgG 阴性提示EBV 原发感染，抗VCA-IgM 阴性而抗VCA-IgG 和抗EBNA-IgG 阳性则是典型的EBV 既往感染抗体类型（详见表2）。但有的病例抗VCA-IgM 产生延迟，有的则缺失或长时间存在，并且EBV 再激活时也可能出现抗VCA-IgM，抗VCA-IgM 有时也会出现假阳性（如人巨细胞病毒感染时），4岁以下儿童抗VCA-IgM 水平低且持续时间短；抗EA-IgG 在原发感染后期出现，少数病例可能在原发感染后长时间检出，并且EBV 再激活时也可能出现抗EA-IgG；约5%的健康携带者缺失抗EBNA-IgG 抗体，另外免疫抑制患者抗EBNA-IgG 抗体也可能会丢失或水平很低；有的既往感染过EBV的患者抗VCA-IgG 可能为阴性；鼻咽癌患者VCA-IgA 和EA-IgA 抗体滴度明显高于健康携带者。因此EBV感染后血清学反应复杂多样，有时给抗体结果解释尤其是单份血清的抗体结果解释带来困难。 根据EBV 感染过程中抗体产生的不同动力学特点，同时检测患者血清中几种EBV 抗体（抗VCA-IgM/IgG、抗EA-IgG 及抗EBNA-IgG）和抗VCA-IgG亲和力可以提高诊断原发性EBV感染的敏感性和特异性，帮助判断原发性EBV 感染、既往EBV感染或既往EBV感染再激活。
2. 嗜异凝集抗体检测 嗜异凝集抗体为IgM抗体，在病程第1～2 周出现，在病程5 周内达到高峰，随后迅速下降，但是少数患者可以持续约6～12 个月。在成人和青少年，85%～90% 原发性EBV 感染者会出现嗜异凝集抗体；但是大约只有50%的2 ～5岁儿童原发性EBV 感染后此抗体为阳性，而小于2岁的儿童原发性EBV 感染后此抗体的阳性率仅10%～30%。 （1）检测方法及标本类型：采用试管法或血凝反应板法，标本类型为血清或血浆。 （2）临床意义：此抗体检测缺乏特异性，其他急性感染如原发性巨细胞病毒感染、自身免疫性疾病或肿瘤等也可能呈阳性反应。国内儿童IM 的发病高峰年龄为4～6 岁，因此该抗体检测在国内儿童IM 的诊断中价值不大。因此，不推荐用于国内儿童EBV原发性感染所致IM的诊断。 3. EBV核酸载量检测 EBV-DNA 载量测定（最常用的标本是外周血）已经被广泛应用于EBV 相关疾病的诊断、病情监测、治疗效果评估和预后判断等。无菌体液（如肺泡灌洗液、脑脊液等）样本也可检测EBV-DNA，用于EBV 相关疾病的辅助诊断。 （1）检测方法及标本类型：检测方法采用实时荧光定量PCR法，不同EBV 相关疾病的适宜EBV-DNA 检测的样本不同，详见表3。
（2）临床意义：不同临床样本中EBV-DNA 检测结果的意义不同（见表3）。血清或血浆中EBV-DNA 阳性提示患者体内存在活动性EBV 感染或疾病与EBV 密切相关（如原发EBV 感染早期、EBV-HLH、大多数CAEBV、EBV 相关肿瘤等），需结合临床表现及其他检查结果综合分析判断；血清或血浆EBV-DNA 阴性提示为血清阳性转化的EBV 健康携带者、未感染过EBV 的患者、非EBV 相关疾病患者、以及部分EBV 相关疾病患者，如部分IM 患者及IM 后期，极少数CAEBV 患者（结合血清学判定）。外周血PBMC中EBV-DNA 载量高于102. 5 拷贝/μgDNA 是CAEBV 的诊断标准之一。全血样本EBV-DNA 载量主要用于免疫缺陷患者EBV 感染的诊断，以提高诊断EBV 感染的敏感性，不推荐用于有免疫力的患者。因血清EBV 阳性转化的健康携带者每10^6个PBMC 中大约有1～50个EBV 感染的细胞， 约7个拷贝（1～30个拷贝） EBV-DNA/10^6PBMC 。因此，血清阳性转化的EBV 健康携带者的全血或PBMC 标本中可能检出低水平的EBV-DNA 载量。 4. EBERs原位杂交试验 EBERs （ EBER1/EBER2）是EBV 编码的不翻译成蛋白质的ＲNA。EBERs 大量存在于EBV 潜伏感染的细胞中，每个细胞可达10^6 ～10^7 拷贝，是EBV 潜伏感染的最好标志物，其主要功能是抑制干扰素介导的抗病毒效应和凋亡。 （1）检测方法及标本类型：采用原位杂交法，标本类型为病理组织或细胞涂片。 （2）临床意义：原位杂交检测EBERs 能够定位EBV 感染的细胞类型，是明确肿瘤与EBV 相关的金标准。各种实验室诊断方法采用的标本类型、检测方法以及特点详见表4。
EBV感染与多种临床疾病相关，熟悉不同EBV感染实验室诊断方法的优缺点，针对不同的EBV 感染相关疾病，选择适当的临床样本和实验室检测方法，对于EBV相关疾病的诊断和治疗十分重要。 1.原发性EBV感染相关疾病 （1）IM：IM 是原发性EBV 感染引起的良性自限性疾病，其典型临床表现为发热、咽峡炎和颈淋巴结肿大的“三联征”，外周血淋巴细胞显著增多并出现异型淋巴细胞，可合并肝脾肿大和肝功能异常。多数预后良好，少数可出现严重并发症，如噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（HLH）。 （2）免疫缺陷患者EBV 原发性感染（X连锁淋巴增生症，移植患者等） （3）其他EBV 原发性感染相关疾病（EBV 脑膜炎或脑炎、心肌炎、间质性肺炎等）：EBV 感染几乎可以累及各个脏器，有些患者EBV 原发感染临床表现不符合典型IM 的临床特征，而以某一脏器受累为主，如间质性肺炎、心肌炎及脑炎等。 2.持续性或再激活EBV 感染相关疾病 （1）CAEBV：CAEBV 是一种严重的EBV 感染疾病，其临床表现是IM 样症状持续或反复发作，并逐渐出现多种器官的慢性损害，如持续性肝功能损害、多发性淋巴结病、肝脾大、噬血细胞综合征、视网膜炎、间质性肺炎、牛痘样水疱病及蚊虫叮咬过敏等。 （2）EBV-HLH：EBV-HLH 是淋巴细胞、巨噬细胞异常增生和活化，以发热、肝脾肿大、血细胞减低、高甘油三脂血症和（或）低纤维蛋白原血症为特点的临床综合征，是一种严重威胁患者生命的过度炎症反应综合征。EBV 原发感染和再激活均可引起EBV-HLH。 3.肿瘤相关性疾病 （1）NPC：NPC 是目前最为明确的与EBV 感染相关的人类上皮性肿瘤，位列中国肿瘤发病率前10位，尤其在两广等南方地区发病率最高，故又被称为“广东癌”。在流行地区，WHOⅢ型非角质化未分化（主要亚型）NPC 肿瘤组织中几乎全部可以检测到EBV 基因组。
来源: 中华实验和临床病毒学杂志编辑委员会.
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