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免疫组化攻略:临床常用57个指标的意义

面气灵 2020-1-18 158人围观 医学



IHC与ICC有什么区别?


在上世纪30年代,免疫组织化学(Immunohistochemistry,简称IHC)的原理就已经为人所知,但直到1942年,第一个IHC研究成果才正式发表。这也被誉为免疫荧光技术的里程碑。哈佛大学医学院的Albert Coons在《免疫学杂志》上发表文章,利用FITC标记的抗体来鉴定感染组织中的肺炎球菌抗原。自那以后,组织固定方法、检测标记和显微镜都在不断改进,让免疫组化成为诊断和研究中的一个必备工具。


在病理科,利用特异的肿瘤标志物,医生通过IHC诊断肿瘤是良性还是恶性,确定肿瘤的分期和分级,并确定细胞类型和转移的来源,以便找到原发肿瘤的位置。同样,IHC也能用于药物开发,通过检测疾病靶点的上调或下调来判断药物疗效。


免疫组化指的是根据抗体与抗原特异结合的原理来检测组织切片中的抗原(如蛋白)。immuno的词根来自操作中所使用的抗体,而histo意味着组织。另一种类似的技术是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,简称ICC)。这两个词大家经常混着用,看着好像差不多,但实际上还是有点区别。


对于IHC,组织是来自患者或动物,经过冷冻或石蜡包埋。将这些组织制成约4μm厚的切片,封片后再处理。通过这种方法,研究人员可观察细胞组分的定位,同时维持周围组织的原先结构。


对于ICC,大部分细胞外基质及其他基质组分被去除,只剩下整个细胞来染色。ICC的来源可以是细胞悬液,来自患者或动物(如血涂片、拭子等),或在实验室中进行的组织培养细胞系。


除了生物学来源,IHC和ICC在样品处理的程度上也有所不同。ICC需要透化,要么通过固定过程,要么是单独的透化步骤,这样抗体才能与细胞内的靶点相结合。而IHC可能不要单独的透化步骤,这取决于切片的厚度和固定方法。包埋在石蜡中的IHC切片必须进一步处理,才能进行抗体染色。一旦处理好样品,IHC和ICC的染色操作就几乎没什么差异了。当然,就染色而言,根据所使用的抗体来优化还是少不了的。

 


肿瘤细胞免疫组化耐药预后标记


恶性肿瘤免疫组化耐药预后标记,全套4项:P-gp,GSTπ,TOPOⅡ,Ki-67。


乳腺癌免疫组化耐药预后标记,全套7项:P-gp,GSTπ,TOPOⅡ,Ki-67,ER,PR,C-erbB-2。


1、P-糖蛋白(P-gp)--药泵作用--胞膜/胞浆--阳性率越高,对下列药物耐药性越强:阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托蒽醌、长春花碱、长春新碱、紫彬醇、泰素帝。


2、谷光甘肽S转移酶(GST π)--解毒作用--胞浆--阳性率越高,对下列药物耐药性越强:阿霉素、顺铂、氮芥、环磷酰胺、瘤可宁。

 

3、拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)--靶点作用--胞核--阳性率越高,对下列药物越有效:蒽环类抗生素和鬼臼毒素类,如VP-16、替尼泊苷、玫瑰树碱、新霉素、柔红霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。阳性率高者对 VP-16尤其有效。

 

4、雌激素受体(ER)--性激素作用--胞核--阳性率越高,肿瘤对内分泌治疗越有效,预后越好。

 

5、孕激素受体(PR)--性激素作用--胞核--阳性率越高,肿瘤对内分泌治疗越有效,预后越好。

 

6、C-erbB-2--癌基因产物--胞浆--阳性率越高,肿瘤恶性程度越高。ER、PR 阳性而 C-erbB-2 也阳性者,用三苯氧胺治疗效果不好。

 

7、Ki-67--细胞增殖标志--胞核--阳性率越高,肿瘤增殖越快,恶性程度越高。

 

Ki-67 为细胞增殖的一种标记,在细胞周期 G1、S、G2、M 期均有表达,G0 期缺如,其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关。


8、PCNA(增殖细胞核抗原)。


9、CEA 多数腺癌表达 CEA。

 

10、Rb ( retinoblastoma 视网膜母细胞瘤) 基因是肿瘤抑制基因,调节细胞周期。

 

11、P53 在免疫组化中均为突变型,阳性率越高,预后约差。野生型半衰期很短。

 

12、Nm23 是转移抑制基因,其阳性表达和肿瘤转移呈负相关。目前已被广泛应用于乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌、大肠癌、肝癌、喉癌等多种恶性肿瘤的检测。几乎所有的研究都表明,nm23 蛋白高表达患者淋巴结转移率相对较低,存活期相对较长。

 

13、E-CaE 钙粘附蛋白,介导细胞间粘连作用的跨膜糖蛋白,其功能丧失引起细胞之间连接的破坏,主要用于肿瘤侵袭和转移方面的研究。

 

14、PS2 雌激素调节蛋白,其表达和 ER 表达有关,可作为内分泌治疗和预后判断的指标之一。

 

15、CK18 低分子量角蛋白,主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常阴性,主要用于腺癌诊断。

 

16、CK19 分布于单层上皮和间皮,常用于腺癌诊断,肝细胞不表达,而胆管为阳性反应。

 

17、Heppar 1 肝细胞抗原,正常肝细胞和高分化肝细胞癌阳性,低分化肝细胞癌多弱阳性或阴性。

 

18、CK20 用于胃肠道腺癌、卵巢黏液性肿瘤、皮肤 Merkel 细胞癌诊断。鳞癌、乳腺癌、肺癌、子宫内膜和卵巢非黏液性肿瘤常阴性。

 

19、CK7 卵巢、肺和乳腺上皮常阳性,结肠、前列腺、胃肠道上皮阴性。

 

20、Villin 绒毛蛋白,正常组织中,villin 通常只表达于有刷状缘的细胞上,如胃肠道上皮细胞、胰腺和胆管上皮细胞以及肾实质的上皮细胞中(特别是近曲小管)。

 

Villin 在胃肠道癌、胰腺癌、胆囊癌和胆管癌组织中有很高的表达率,具有明显腺样结构的肿瘤上没有 villin 表达,则这个肿瘤为胃肠道、胰腺、胆囊或胆管来源的可能性极低。

 

乳腺癌也经常成为女性患者未知原发部位转移癌要鉴别排除的一种疾病。因为在转移癌组织上观察到明显的 villin 免疫组化阳性染色,则这个肿瘤就极不可能为乳腺来源。

 

其他 villin 免疫组化染色通常为阴性表达的肿瘤还有:如卵巢浆液性癌、尿道移行细胞癌和前列腺癌。间皮瘤也经常为 villin 阴性表达,因此在一些情况下 villin 还可以作为鉴别间皮瘤和腺癌使用抗体的一种。

 

但是也有一些非胃肠道来源的肿瘤可表达 villin,如子宫内膜样腺癌、卵巢粘液性癌、肾细胞癌和小部分肺癌。也有一些专家报道 villin在部分宫颈内膜腺癌病例中表达。

 

肝癌的诊断:villin 免疫组化染色可以显示出毛细胆管结构,因此它也可能在表达部分肝癌的管状结构上很有用。多克隆 CEA 是用于此目的的第一种试剂,而且 CD10(CALLA)在表达肝癌的该结构上也非常有用。多克隆 CEA、villin 和 CD10(CALLA)在肝癌病例上的表达,相互之间并没有任何的冲突,因此如果怀疑肝癌的可能性,建议将这三种抗体共同使用以协助疑难病例的诊断。

 

Villin 在神经内分泌肿瘤的研究上也很有帮助。众所周知,类癌和胰腺的胰岛细胞肿瘤具有相相似的形态学特征,仅在形态学上区分这两种肿瘤几乎是不可能的。Villin 在这种情况下特别有用,因为据文献报道在 85% 的胃肠道类癌病例中有 villin 的表达,但在胰岛细胞肿瘤上未见阳性表达报道。Villin 在类癌上的表达通常为胞膜阳性。

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来自: 医学生学术(MSA)
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