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酶与它们的同工酶

面气灵 2019-7-11 113人围观 医学

 

酶与同工酶

在离开课本了一段时间后,我们还记得那些曾经熟悉的酶和它们的同工酶吗?我们再来温习一下吧,在工作中我们也应该知道它们的临床意义哦。。。。


一、天冬氨基转移酶及其同工酶


天冬氨酸氨基转移酶(AST),也称谷草转氨酶(GOT),AST催化天门冬氨酸和α-酮戊二酸的氨基转移作用,形成谷氨酸和草酰乙酸。

【组织分布】AST广泛分布于全身各组织,尤其以心脏、骨骼肌、肝脏和肾脏中最为丰富,AST有两种同工酶,分别存在于细胞质(ASTs)和线粒体(ASTm)中,肝脏中AST大部分(约70%)为ASTm。


【临床意义】AST在心肌细胞内含量较多,当心肌梗死时,血清中AST活力在发病后6~12小时之内显著增高,48小时达到高峰,约3~5天恢复正常。AST也是肝炎患者的观察指标,AST/ALT比值对于判断肝炎的转归有重要价值:急慢性肝病时AST/ALT比值<1,常提示肝脏损害较轻,AST/ALT比值>1,则提示肝脏损害较重。肝硬化和肝癌患者,肝细胞的破坏程度更加严重,线粒体也受到了严重的破坏,因此AST升高明显,AST/ALT>1,甚至>2。


【检测方法要点】多使用连续监测法,IFCC推荐用苹果酸脱氢酶(MD)作为指示酶。但由于产物草酰乙酸不稳定,易转变为丙酮酸,故将LD作为辅助酶。


二、γ-谷氨酰基转移酶及其同工酶


γ-谷氨酰基转移酶(GGT)又称γ-谷氨酰转肽酶,是一种含巯基的线粒体酶,参与体内谷胱苷肽的代谢。

【组织分布】肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富,血清中GGT主要来自肝胆系统。GGT在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统。GGT同工酶的形成与其糖链上唾液酸的含量、种类不同有关,正常血清GGT可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种同工酶,其中以Ⅱ型为主,Ⅰ型次之,Ⅲ型最少。不同组织的GGT同工酶有差异,但主要酶学性质都近似。


【临床意义】血清GGT主要用于诊断肝胆疾病,可了解急性肝炎是否痊愈,能否向慢性肝炎转化,诊断酒精性肝炎及肝损伤程度,辅助诊断原发性和继发性肝癌,原发性肝癌时,GGT-Ⅱ明显提高。测定尿液中GGT有助于诊断肾小管疾病。


【检测方法要点】多使用连续监测法,以色素原GCNA为底物,宜采用双试剂法,底物启动模式。


三、肌酸激酶及其同工酶


肌酸激酶(CK)能催化高能磷酸键在肌酸和ATP之间转换,生成磷酸肌酸和ADP的可逆反应。磷酸肌酸的高能磷酸键是肌肉收缩时能量的直接来源。

【组织分布】CK主要分布在脑组织和各种肌肉组织中,为二聚体结构,由M和B两个亚基构成,可组成三种同工酶,即CK-MM、CK-MB、CK-BB。CK-MM主要存在于骨骼肌中,平滑肌以CK-BB含量相对较高,CK-BB在脑中的含量明显高于其他组织,心肌是CK-MB含量丰富的唯一器官。


【临床意义】CK-MB是确诊AMI的实验指标之一,心肌梗死发生后4~8小时开始升高,12~48小时达峰,2~3天恢复正常。皮肌炎、肌营养不良、骨骼肌损伤也会使CK升高,主要为CK-MM,应注意肌营养不良时CK升高,但随着肌肉萎缩会有所下降。脑血管意外时,部分患者CSF和血液中CK均升高,主要为CK-BB。甲状腺功能低下时,CK升高可达正常上限的50倍,主要为CK-MM。


【检测方法要点】多使用酶偶联连续监测法,常用NAC、谷胱甘肽和巯基乙醇作为激活剂,偶联己糖激酶(HK),以葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-P-D)为指示酶。注意溶血标本测定CK时结果明显偏高,其原因为红细胞中的腺苷酸激酶(AK)的干扰。


四、乳酸脱氢酶及其同工酶


乳酸脱氢酶(LD)是临床应用较多的一种脱氢酶,属于氧化还原酶类,是参与糖无氧酵解和糖异生的重要酶。

【组织分布】LD存在于所有体细胞的胞质中,以骨骼肌、肾和心肌中含量最为丰富。LD由M和H两个亚基组成四聚体,共形成5种结构不同的同工酶。分别命名为LD1(H4),LD2(H3M),LD3(H2M2),LD4(HM3),LD5(M4)正常成年人血清LD同工酶电泳区带的结果为LD2>LD1>LD3>LD4>LD5。LD1主要分布在心肌,也存在于红细胞中,且活性为心肌LD1的100倍;LD5主要分布在横纹肌和肝脏;LD3主要存在于脾和肺。LD同工酶的组织分布相对集中,但某些组织器官可存在一种或多种同工酶。


【临床意义】在急性心肌梗死时,升高最慢(8~10天),达峰晚,对早期诊断意义不大,但由于半寿期长,多用于回顾性诊断。肝脏疾病及肌肉损伤时LD可升高,以LD5为主。


【检测方法要点】LD活性的测定方法有两种:根据从乳酸氧化成丙酮酸的正向反应(L→P),监测吸光度上升速率,称为LD-L法;根据丙酮酸还原成乳酸的逆向反应(P→L),监测吸光度的下降速率,称LD-P法。正向反应连续监测法是IFCC和我国检验学会的推荐方法。


五、碱性磷酸酶及其同工酶


碱性磷酸酶(ALP)属磷酸单酯水解酶,是一组特异的磷酸酯酶,可催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。

【组织分布】ALP是一组同工酶,分为四型:生殖细胞型(GCAP)、胎盘型(PALP)、肠型(IAP)和非特异组织型(TUAP)。ALP几乎存在于机体的各个组织,但以骨骼、牙齿、肝脏和肾脏含量最多,正常人血清中的ALP主要来源于骨骼,由成骨细胞产生。


【临床意义】 ALP经肝胆系统排泄,所以当肝胆系统疾病时,尤其是梗阻性黄疸时,肝内胆汁反流入血,可引起血清ALP明显升高。肝细胞性黄疸时升高不明显。原发性和继发性肝癌时,血清ALP活性明显升高。变形性骨炎、成骨细胞癌、佝偻病、骨软化、甲状腺及甲状旁腺功能亢进等疾病时,血清ALP活性明显升高。


【检验方法要点】多使用连续监测法,IFCC推荐AMP作为缓冲液,AMP为激活型缓冲液,同时作为酶的底物参与磷酸酰基的转移,可增进反应速率,所测得的ALP活性要比用碳酸盐缓冲液高2~6倍,因此使用不同缓冲液的方法测的ALP活性参考区间不同。溶血标本ALP酶活力下降,抗凝剂EDTA-K2可抑制酶活性。


六、酸性磷酸酶及其同工酶


酸性磷酸酶(ACP)是一种在酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶,作用与ALP类似,但作用的最适pH偏酸,为4.5~7.0。

【组织分布】分布广发,主要存在于巨噬细胞,定位于溶酶体内,其中以前列腺含量最多。女性血中ACP可能来自血小板和破骨细胞。ACP同工酶分为前列腺ACP(PAP)和非前列腺ACP两大类。


【临床意义】血清中ACP活性测定主要是作为前列腺癌的辅助诊断、疗效观察及预后判断的指标。前列腺癌,特别是存在转移时,血清ACP明显增高,PAP更有诊断价值。


【检验方法要点】使用连续监测法检测,但ACP 性质极不稳定,血清室温放置2.5小时ACP活力即可下降10%左右。


七、淀粉酶及其同工酶


α-淀粉酶(AMY)属于糖苷链水解酶,作用于α-1,4糖苷键,是一种钙依赖性金属蛋白酶,卤素和其他阴离子对其有激活作用。

【组织分布】AMY主要存在于胰腺和唾液腺中,有两种同工酶,即唾液型(S-AMY)和胰腺型(P-AMY)。


【临床意义】AMY主要由唾液腺和胰腺分泌,可通过肾小球滤过,是唯一能在正常时出现在尿液中的血清酶。流行性腮腺炎、急性胰腺炎时,血和尿中的AMY 显著升高。急性胰腺炎发病后2小时血清AMY开始升高,12~24小时达峰,2~5天下降至正常。尿AMY约于发病后12~24小时开始升高,下降也较血清AMY慢,在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。


【检验方法要点】传统方法为碘-淀粉比色法,该法测定结果高于500U/L为诊断急性胰腺炎的重要依据。自动化生化分析仪常使用酶法连续监测,多以对硝基酚麦芽七糖苷或对硝基酚麦芽三糖苷为底物。



原作者: 裴世静 山西省临床检验质量控制中心 来自: 基层检验网
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